TDZ对诱导大蒜愈伤组织形成的影响

薛寒青 王舰 周淑兰

（青海省农林科学院生物所，青藏高原生物技术教育部重点实验室，青海西宁，810016）

TDZ对诱导大蒜愈伤组织形成的影响

薛寒青 王舰 周淑兰

（青海省农林科学院生物所，青藏高原生物技术教育部重点实验室，青海西宁，810016）

TDZ是一种新型植物生长调节剂，具有很强的细胞分裂素活性（CTK），研究了不同浓度TDZ对大蒜愈伤组织培养和大蒜鳞茎分化的影响。试验结果表明，15%浓度的TDZ对大蒜愈伤组织培养的促进作用最明显，诱导率达到75%；而在MS+15%TDZ的培养基上，愈伤组织增殖最快，诱导出的黄色致密愈伤组织分化能力最强，质量最好。

TDZ大蒜愈伤组织 诱导

大蒜为百合科葱属植物蒜 （Allium sattvumL.）的鳞茎，味辛辣，适应性强。据资料介绍，我国大蒜种植面积约0.8万hm2，产量达54万t，居世界第1位[1]。我国也是大蒜出口大国，主要种植地有山东、青海等地。其中青海种植面积达0.27万hm2，主要种植地区有乐都县和格尔木。大蒜营养丰富，含有氨基酸、肽类、蛋白质、糖类、脂肪、无机盐、维生素以及蒜油等多种营养物质。大蒜作为调味品已有数千年的历史，同时也是天然的药剂，其具有抗菌消炎、抗癌防癌、降血压、提高机体免疫功能等作用。目前全世界将其作为天然食物和药用保健食物，随着药理保健研究的深入，其食用量呈逐年上升趋势[2]。

人工合成的苯基脲衍生物TDZ是一种新型植物生长调节剂，具有很强的细胞分裂素活性（CTK），它的CTK活性要比一般CTK高几十倍至几百倍，研究表明，它可以促进植物芽的再生和繁殖，打破芽的休眠，促进种子萌发，促进愈伤组织生长，延缓植物衰老等[3]。并且可以作用其他的植物激素和生理活性物质来调节植物的生长发育，是一个作用力很强的植物生长调节剂，在农业上有广泛的应用。

近年来，它作为一种有效的形态发生调节剂在植物组织培养快繁体系中得到了广泛的应用，其应用范围遍及草本植物和木本植物。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验用大蒜品种为格尔木紫皮大蒜，该品种已通过青海省级品种审定。MS基本培养基可把其分成4个部分：大量元素MSⅠ（浓度为10×），微量物质MSⅡ（浓度为200×），铁盐MSⅢ（浓度为100×），有机物质MSⅣ（浓度为100×），置于4℃的冰箱中，按需取量。消毒剂为70%乙醇（C2H5OH）和0.1%的升汞（HgCl2）等溶液现用现配。激素为TDZ。

1.2 试验方法

①MS培养基配制 取MSⅠ100 mL/L，MSⅡ5 mL/L，MSⅢ10 mL/L，MSⅣ10 mL/L加入蒸馏水定容到1 L，加入蔗糖30 g/L，琼脂粉6.5 g/L调节pH值至5.8，经过高压蒸汽121℃灭菌20 min后待用。

②植物生长调节剂的配制 取药品TDZ配制成5%，10%和15%三种不同浓度，置于4℃的冰箱中保存待用。

③消毒剂的配制 将84消毒液配制成1∶200的溶液，配制70%乙醇（C2H5OH）和0.1%的升汞（HgCl2），配制浓度为1 mg/mL的多菌灵溶液。

④数据统计 在愈伤组织培养试验中，3个不同TDZ浓度（5%，10%和15%）处理，均在生长20 d，27 d和34 d时分别观察记录愈伤组织、出愈率和增殖系数。

2 结果与分析

TDZ对诱导大蒜愈伤组织形成的影响方差分析（表2～4）结果表明，差异显著性从F值表中查得F（3，8）= 4.07大于所计算的F统计量3.524，表明各浓度之间没有差异，这可能由于培养时间过短，愈伤组织生长不明显所致。

表1 不同浓度TDZ对诱导大蒜愈伤率的影响

表2 第20天时愈伤组织出愈率的方差分析

在愈伤组织形成培养的试验中，不同浓度的TDZ对愈伤组织形成有不同程度的促进作用，而加有15% TDZ浓度的培养组合对愈伤组织培养的促进作用最明显（表1，5）。

3 结论

本试验通过不同浓度TDZ对大蒜愈伤组织培养和大蒜鳞茎分化的影响，初步得出，在不同的观察时间MS+15%浓度的TDZ培养基对大蒜愈伤组织培养的促进作用最明显，诱导率达到75%；愈伤组织增殖最快，诱导出的黄色致密愈伤组织分化能力最强，质量最好。

表3 第27天时愈伤组织出愈率的方差分析

表4 第34天时愈伤组织出愈率的方差分析

表5 处理间方差分析

[1]Wang H M,Liu H M,Wang W J,et al.Effects of Thidiazuron,basal medium and light quality on adventitious shoot regeneration from in vitro cultured stem of Populus alba×P.berolinensis[J].林业研究:英文版，2008（3）：257-259.

[2]黄岳.TDZ处理对苹果梨坐果率和果实生长发育的影响[J].延边大学农学学报，2008（3）：176-180.

[3]吴丽君.TDZ和GA3对提高红叶石楠组培快繁效率的研究[J].福建农业学报，2008（2）：180-190.

Effects of TDZ on the Induction of Callus in Garlic Tissue Culture

XUE Hanqing,WANG Jian,ZHOU Shulan
(Institute of Biology,Qinghai Province Agriculture and Forestry Academy of Science,Qinghai-Tibet Plain Biological Technology Ministry of Education Key Laboratory，Xining,Qinghai 810016)

TDZ is a new plant growth regulator,it has very strong activity of kinetin(CTK).The effect of TDZ were studied on the callus formation and bulb differntiation in garlic.The results showed that:15%TDZ could significantly improve the callus induction in garlic had the most obvious promoter action to tissue culture of garlic.The percentage of callus formation reached 75%,but the callus propagated most quickly on the MS+15%TDZ culture medium,the callus were yellow and compact,the differentiation ability was the strongest,the quality was the best.

TDZ;Garlic tissue culture;Induction

10.3865/j.issn.1001-3547.2009.14.006

青海省科技厅立项重点课题

薛寒青（1965-），女，硕士，研究员，从事蔬菜、花卉组织培养和脱毒工作，电话：0971-5312581，13997070707。E-mail:hanqx77@sina.com

2009-05-04