抑制VEGF基因表达对大肠癌细胞HT-29的增殖影响
2005-04-29王宏伟曹明智张金玉张峥王秀丽葛银林
生命科学研究 2005年4期
王宏伟 曹明智 张金玉 张 峥 王秀丽 葛银林
摘要:选择血管内皮生长因子(VEGF)基因为靶基因,设计两组针对VEGF mRNA的小干扰RNA,合成DNA寡核苷酸链,体外转录合成siRNA。以人大肠癌细胞系HT-29为靶细胞,应用脂质体转染的方法,将siRNA导入细胞。MTT法检测siRNA对细胞增殖率的影响,RT-PCR法比较转染前后VECF mRNA表达水平的变化,ELISA法检测细胞培养液中VEGF蛋白分泌量的变化。结果表明,两组siRNA转染后均能有效地抑制HT-29细胞的生长,VEGF mRNA的表达量大幅度减少;相对应的VEGF蛋白水平也显著降低,而作为阴性对照的错义序列组siRNA转染后则无上述作用。
关键词:小干扰RNA;HT-29;血管内皮生长因子;基因治疗
中图分类号:Q753;R392.11
文献标识码:A
文章编号:1007—7847(2005)04—0356—05