人ＶＥＧＦ基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究

周文武　胡建国　马燕琳　林　玲　杨进福　唐　滔

摘要：为建立hVECF₁₆₅基因转染大鼠间充质干细胞的方法。采用密度梯度离心—贴壁培养法获Wistar大鼠BMMSC，并测定其生长曲线和表面标志CD34、CD44、CD45及SH3，然后向成骨细胞及脂肪细胞诱导分化；用脂质体介导pcDNA_3.1-hVECF₁₆₅转染BMMSC，观察转染后细胞形态和生长情况的变化，通过RT-PCR、Western和ELISA鉴定VEGF在细胞中的表达情况。 经培养的大鼠BMMSC，CD44、SH3检测为阳性，CD45、CD34阴性，可诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞；经RT-PCR、Western和ELISA检测证实阳离子脂质体能成功地将hVEGF₁₆₅基因转染至大鼠BMMSC中，并获得有效的表达．真核表达载体pcDNA_3.1-hVECF₁₆₅在BMMSC中获有效表达，为VEGF基因转染BMMSC移植对心梗后大鼠心功能及心室重构的影响提供了实验依据。

关键词：骨髓；间充质子细胞；VECF；转染

中图分类号：Q132．3

文献标识码：A

文章编号：1007-7847(2005)04—0301—07