小鼠肾脏组织的双向电泳
2004-04-29梁恒邢建宇刘希成黄黎明
西安交通大学学报 2004年2期
梁 恒 邢建宇 刘希成 黄黎明
摘要:对小鼠肾组织双向电泳(2—DE)实验中的样品保存、裂解液、胶条泡胀和染色等步骤研究发现:在一73℃,以液态保存的样品仍需尽量以相同的保存时间用于对比,或使用新处理的样品使2—DE图谱反映样品原先的蛋白质组成;优化的裂解液组成是尿素9.8 mol/L、Tris 40 mmol/L、CHAPS 40 g/L、DTT 23 mmol/L、CA 5g/L、PMSFlmmol/L和ED丁A1mmol/L;胶条泡胀采用主动方式有利于大分子量蛋白质的2—DE分离;银染色过程中采用充分的水洗步骤使之获得背景鲜明的2—D图谱.在优化条件下,高分子区及碱性区蛋白质均得到理想分离,获得蛋白质点数达1 491个,明显优于已有文献方法.关键词:小鼠肾脏组织;双向电泳;蛋白质组中图分类号:Q503文献标识码:A文章编号:0253—987X(2004)02—0212—05