食用植物油中黄曲霉毒素B1检测质量控制方法研究

关键词：食用油，黄曲霉毒素B1，质量控制，质控要点

DOI编码：10.3969/j.issn.1002-5944.2024.013.036

0 引言

黄曲霉毒素B1是一种由黄曲霉等特定菌株产生的有毒物质，被认为是毒性最强的黄曲霉毒素。根据1993年世界卫生组织（WHO）癌症研究机构的分类，黄曲霉毒素B1被归类为天然存在的一类致癌物质[1]。黄曲霉毒素B1主要通过食用被霉菌污染的食物和饲料而进入人体，其毒性是砒霜的68倍，是氰化钾的10倍，长期摄入可能导致肝脏损伤、免疫毒性、异常毒性、肿瘤等严重疾病[2]。有数据表示，黄曲霉毒素B1摄入1毫克就可能致癌，一次性摄入20毫克就能致命。日常生活中，农副产品较易感染产生黄曲霉毒素的霉菌，如发霉变质的花生、玉米、小麦，变质的大米、发苦的坚果、小作坊自榨油、久泡的木耳、未经清洗的砧板等都会存在不同程度的接触黄曲霉毒素。普通的消毒方式高温（100度沸水5分钟）是无法消灭黄曲霉素的。历年抽检结果表明，各类食物中黄曲霉毒素B1超标情况不容乐观，尤其是小作坊，每年因黄曲霉毒素B1中毒而引起的疾病和死亡人数数量庞大，给社会和经济发展带来巨大负担[3]。食用植物油是不可或缺的食品添加剂，是人们日常生活中食用最为频繁的一种食用油。然而，由于植物油生产的过程中易受到霉菌的感染污染，致使其中的黄曲霉毒素B1含量容易超过国家标准的限量要求[4]。因此，对植物油中黄曲霉毒素B1进行检测和控制具有重要的现实意义。

习近平总书记在关于食品药品安全工作的重要指示精神中强调，要认真落实李克强总理批示要求和国务院有关会议部署，坚持人民至上、生命至上，用最严谨的标准、最严格的监管、最严厉的处罚、最严肃的问责，毫不松懈抓好食品药品安全工作，保证广大人民群众吃得放心、安心，守护好人民群众“舌尖上的安全”。确保相关检测任务的准确性和高效率是检测机构的首要任务。尽管当前的黄曲霉毒素B1检测方法标准包含了检测步骤和质量控制要求，但却存在着缺乏详细质控要点和相应控制方法描述的问题。特别是针对新上岗的检测人员而言，由于标准中质控要点和方法描述不够详细，导致难以在短时间内掌握相关的质控方法。这一情况给检测实验室在保证质量和提高检测效率方面带来了额外的困难。因此，完善并细化质控要点以及提供相应的控制方法描述，对于提升检测效率和保证质量至关重要。

本文主要以国家标准《食品安全国家标准-食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》（GB 5009.22—2016）为主线进行研究，对食用油中黄曲霉毒素B1检测检测方法、免疫亲和柱、检测仪器、质控样等的选择以及色谱柱的选择和维护等环节的质控要点提出质量关键控制要点和应采取的具体方法进行剖析和总结。此外，为加强实验室内部质量控制，并确保质量控制措施的持续有效性，本文提出了几点建议：加强员工培训和监督机制、优化岗位设置，以及重视结果反馈和改进跟踪等。希望通过这些举措，可以有效地防止或减少质量事故的发生，保障实验室工作的质量和可靠性。

1 黄曲霉毒素B1检测过程各环节质量控制

1.1 方法的选择

GB 5009.22—2016《食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》共有四个检测方法，分别是：第一法为同位素稀释液相色谱—串联质谱法、第二法为高效液相色谱—柱前衍生法、第三法为高效液相色谱—柱后衍生法、第四法为酶联免疫吸附筛查法。其中第一法需要昂贵的设备和专业技术支持，操作复杂，对实验人员技能要求高，成本较高。第四法灵敏度较低，容易导致误差，仅能作为初步筛查手段。第二法比第三法前处理步骤多，操作相对复杂，需要特殊试剂，费时且成本较高。此外，第三法样品准备简单，灵敏度高，结果稳定可靠，故推荐第三法高效液相色谱—柱后衍生法作为黄曲霉毒素B1常用的检测方法。

1.2 仪器的选择

本实验室配有符合方法要求D品牌及W品牌液相色谱仪，采用同一品牌免疫亲和柱、相同人员、相同试剂、相同标准溶液同时对同一质控样进行处理上机分析。D和W仪器的分析条件及结果如表1所示。D和W仪器的平均回收率分别为96.9%、94.0%；线性分别为0.9999和0.9991。D品牌仪器回收率、峰形及线性均优于W品牌，故选择D品牌仪器作为该项目日常检测设备。此分析结果表明了即使同一分析条件和统同一检测样品，但不同的分析仪器其分析结果也存在差异。

1.3 免疫亲和柱的选择

标准要求免疫亲和柱柱柱回收率≥80%，且对于不同批次的亲和柱在使用前需进行质量验证。本实验选择了国内知名的A品牌以及进口品牌R作比较（3平行试验），实验结果见表2。A品牌及进口品牌R免疫亲和柱回收率分别为83.29%、93.21%。R品牌黄曲霉毒素B1免疫亲和柱柱效比A品牌黄曲霉毒素B1免疫亲和柱高出约10个百分点（相同质控样），故选择R品牌免疫亲和柱。由此可见，对于新采购的免疫亲和柱每批都必须抽查一定比例做空白试验及回收率试验，确定它们不含有影响测定的杂质及良好的净化效果。

1.4 色谱柱的选择、维护和保养

现今行业内液相色谱仪基本上默认通过峰面积进行定量，而且峰面积定量更准确。为定量更加准确，使得色谱峰的完美对称，实验采用全新的色谱柱，并且尽可能采用同一品牌的仪器和色谱柱，如W品牌仪器采用W品牌的色谱柱，D品牌仪器采用D品牌的色谱柱。色谱柱要注意维护保养，先以甲醇∶水=10∶90（V∶V）冲洗柱子45 min，再换上流动相平衡45 min，待基线稳定后进行进样，若基线漂移不符合要求时应延长平衡时间。不能用纯有机溶剂直接冲洗色谱柱，防止盐析出，堵塞色谱柱或仪器管路，导致色谱柱报废。

1.5 质控样的选择

在化学分析方法验证中，质控样是常用的一种方法，通过将已知量的待测样品加入生物介质中配制而成，用于质量控制。质控样可以帮助验证检测方法的准确性和可靠性，确保实验结果的准确性和可比性。选择质控样需考虑样本的代表性、稳定性以及与实际样品的相似程度，以确保质控的有效性和可靠性。在检测不合格样品时应选择含量接近、基质一致的质控样。同时，质控样的制备和处理必须与检测样品处理方法一致，并且确保制备过程准确无误，避免样品污染或损坏等情况，以保证实验结果的可比性。此外，确保质控样品的保存条件良好，避免在样品保存过程中出现变质或降解现象。

1.6 标准溶液的选择及使用

为确保实验数据的准确性和可信度，选择标准溶液时应优先考虑具有证书的标准物质。这些标准物质经过溯源程序确定其特性值，能够追溯到准确表示该特性值的计量单位。此外，每个标准值都应配有特定置信水平的不确定度，以确保数据的可靠性和可比性。通过选择合适的标准溶液，可以有效提高实验室实验结果的准确性和可重复性。标准溶液在临用前应按GB 5009.22—2016附录A进行校准。标准溶液曲线应严格按照标准要求配制及储存，如在检测前对标准溶液进行校准和验证，注意标准溶液的保存，避免其受到光、热、氧化等因素的影响而导致浓度发生变化，以此确保检测结果的准确性和可靠性。

2 其他质量控制方法

2.1 加强人员培训及监督

为确保实验室工作的质量和可靠性，首先需要建立完善的人员培训制度。通过定期对不同岗位的人员组织理论学习和实验操作培训，以提升其业务水平，确保其具备必要的技能和知识。其次，对检测人员进行必要的考核。通过留样复测、人员比对等方式进行不定期的质量监督，实时监控和考核实验人员的检测水平，确保其符合要求。如果发现不符合要求的情况，应及时采取纠正措施，直到检验项目考核合格才能继续上岗。此外，要加强监督和管理。建立严格的质量管理制度，设立专门的监督机构或责任人员，对检测过程进行全程监控和管理，并及时发现和解决问题。最后要严格按照操作规程进行检测。明确工作流程和操作规范，并要严格遵守标准操作程序，确保检测过程的准确性和可靠性。

2.2 优化岗位设置

按检测环节分段检测，定岗定人，流水线作业。根据检测工作的流程及特点，将检测过程分解为若干个环节，然后在每个环节设立专门的岗位和负责人，实现流水线作业，提高工作效率和质量控制水平。一方面可以提高检验人员对所检验环节的熟练程度，避免工作交叉和责任模糊，确保每个环节的任务得到专业、细致地执行，降低检验错误，提高检测效率；另一方面节约了检验人员从一种操作过度到另一实验操作适应的时间，使每个岗位的工作人员充分熟悉工作流程和操作规范，积累足够的经验和技能，能显著提高检测效率，提升实验室在应对大批量检测任务时更多更快更准的提供检验数据的能力。通过落实各环节的责任人，环环相扣，互相监督，能增强各检验人员的责任意识，促使检验人员全员参与到实验室质量管理活动中，减少质量事故发生[5]。此外，通过优化岗位设置也可以提升工作人员的专业水平和团队协作能力，促进检测人员和整个检测体系的健康发展。

2.3 重视结果反馈和跟踪改进

通过及时收集、分析和反馈检测结果，不断改进检测方法和流程，是持续提高检测质量和准确性的重要环节，也是发现潜在问题、及时制定改进方案和实现持续改善的必要手段。为确保各环节的质量控制和数据可靠性，需要各环节负责人严格执行相关的标准质控要求，并接受质量管理人员的严格监督，以确保各环节处于受控状态。此外，质控及数据审核人员应及时反馈质控结果，各环节负责人也要及时跟进。对不符合要求的情况，应立即查找原因，并采取必要的纠正措施，确保措施得到及时有效的落实。同时，针对新出现的问题，应立即展开研究并制定解决方案，以确保实验室工作的连续稳定性和数据的可靠性。根据不符合质控结果情况，及时采取纠正措施，对于纠正后的质量情况，应重新组织质量验证，当新质控结果符合要求后方可进行新的样品分析[6]。

3 结语

本文通过研究食用油黄曲霉毒素B1中检测过程对检测方法、检测仪器、免疫亲和柱、质控样、标准溶液的选择等重要环节的质控要点，提出了质量关键控制要点和应采取的具体方法，总结了针对各质控要求可采取的质量控制方法。同时提出了通过加强人员培训及监督、优化岗位设置和重视结果反馈和跟踪改进三方面提高黄曲霉毒素B1检测质量和效率，以期为在新进或新上岗人员的培训、人员监督、质量监控等方面提供了质量控制方案。

作者简介

莫星忧，硕士研究生，助理研究员，研究方向为食品加工与安全。

吕柏东，通信作者，硕士研究生，助理研究员，研究方向为食品加工与安全。

（责任编辑：张瑞洋）