不同厂家维生素B1片有关物质对比与研究

【摘要】目的：统一规范维生素B1片质量标准，优化有关物质检测方法，简化操作，保证试验结果真实可靠。方法：采用AiChrom-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5μm），以3.764 g/L己烷磺酸钠（磷酸调节pH值为3.1）为流动相A，甲醇∶乙腈（1∶1）为流动相B，梯度洗脱，对维生素B1有关物质进行分离；采用加校正因子的主成分自身对照法对维生素B1中的8个已知杂质进行定性和定量分析。结果：维生素B1与有关物质分离良好。17家企业生产的维生素B1片检出11种杂质。结论：建立的方法专属性良好，可有效地分离和测定维生素B1片中的有关物质。本研究为维生素B1有关物质杂质谱的研究提供科学参考。

【关键词】维生素B1；有关物质；杂质

【DOI编码】10.3969/j.issn.1674-4977.2024.06.011

【基金项目】江西省药品监督管理局科研项目（2023JS22）。

Comparison and Study of Substances Related to Vitamin B1 Tablets from Different Manufacturers

ZHENG Lupan1， HE Yafen1， FANG Wenchao1， DING Jinyou1， ZHANG Jihong2*

（1.Drug Testing Branch of Shangrao Inspection， Testing and Certification Institute， Shangrao 334000， China； 2.Product Quality Testing Branch of Shangrao Inspection， Testing and Certification Institute， Shangrao 334000， China）

Abstract： Purpose： To standardize the quality standards of vitamin B1 tablets， optimize the detection methods of related substances， simplify operations， and ensure the authenticity and reliability of test results. Method： An Ai-Crom-C18 chromatographic column （4.6 mm×250 mm， 5μm） is used， with 3.764 g/L sodium hexanesulfonate （pH adjusted to 3.1 with phosphoric acid） as the mobile phase A， Methanol∶Acetonitrile （1∶1） as mobile phase B， gradient elution， to separate vitamin B1 related substances； Qualitative and quantitative analysis of 8 known impurities in vitamin B1 was conducted using principal component self comparison method with added correction factors. Result： Vitamin B1 was well separated from related substances. Eleven impurities were detected in vitamin B1 tablets produced by 17 companies. Conclusion： The established method has good specificity and can effectively isolate and determine the relevant substances in vitamin B1 tablets. This study provides scientific reference for the study of impurity spectra of vitamin B1 related substances.

Keywords： Vitamin B1； regarding substances； impurity

0引言

维生素B1又称为盐酸VB1、盐酸硫胺或硫胺素，化学名：氯化4-甲基-3-[（2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基）甲基]-5-（2-羟基乙基）噻唑鎓盐酸盐。国内最早以“盐酸硫铵片”收载于《中华人民共和国药典》1953年版，自《中华人民共和国药典》1963年版起收载为“维生素B1片”。查阅相关文献及各国药典得知，目前国内外药典对维生素B1片有关物质的控制限度相对宽松，只有《中华人民共和国药典》2020年版二部对单个杂质和总杂质进行控制[1-2]。因此，为更好地控制该品种质量，本研究优化了检测方法，并分别利用本法及现行标准给出的检测方法对17个不同厂家生产的维生素B1片进行有关物质检测和对比分析，为研究统一规范维生素B1片质量标准，优化有关物质的检测方法，并对维生素B1片有关物质杂质谱的研究提供科学的数据参考。

1仪器和试药

1.1仪器

Uitimate3000戴安高效液相色谱仪（赛墨飞世尔）；BS124S电子天平（德国Sartorius）；BP211D型电子天平（德国Sartoriu公司）；XMTD-7000电热恒温水浴锅（北京市永光明医疗仪器有限公司）；Ai-Chrom-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5μm）；Agilent XDB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5μm）。

1.2试药

维生素B1对照品（中国食品药品检定研究院，100390-201806，97.0%）；EP杂质D（氧硫胺99.08%）；EP杂质E（硫代硫胺99.87%）；EP杂质C（氯硫胺99.33%）；EP杂质G（乙酰硫胺99.80%）；EP杂质A（硫胺素硫酸酯99.0%）；EP杂质H（酮二硫代氨基甲酸酯99.0%）；EP杂质F（乙基硫胺99.0%）；维生素B1片（分别为厂家A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K、L、M、N、O、P、Q）；甲醇、乙腈、己烷磺酸钠均为色谱纯；水为超纯水；其他试剂均为分析纯试剂。

2方法和结果

2.1样品的配制

2.1.1供试品溶液的制备

精密称取30片，研细，精密称取细粉适量（约相当于维生素B1 10 mg），置于10 mL量瓶中，加溶液I适量超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

2.1.2对照溶液的制备

精密量取供试品溶液1 mL，置于100 mL量瓶中，加溶液I稀释至刻度，摇匀，即得。

2.1.3系统适用性溶液的制备

分别精密称取对照品EP杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H和维生素B1适量，制成质量浓度为20μg/mL的混合标准溶液，作为系统适用性溶液。溶液I为流动相A∶流动相B（85∶15）。

2.2色谱条件

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以3.764 g/L己烷磺酸钠（磷酸调节pH值3.1）为流动相A，甲醇∶乙腈（1∶1）为流动相B；梯度洗脱：0～15 min，85%A；15～45 min，80%A；45～58 min，60%A；58～64 min，60%A；64～65 min，85%A；流速：1 mL· min-1；检测波长：248 nm；柱温：30℃；进样量：20μL。系统适用性试验见图1。

2.3专属性试验

取企业A生产的维生素B1片适量（约相当于维生素B110 mg），置于10 mL量瓶中，分别加入相应溶液，进行酸破坏溶液（0.1 mol/L盐酸1 mL），碱破坏溶液（0.01%氢氧化钠1 mL），氧化破坏溶液（3%过氧化氢1 mL），光破坏溶液（4000 lx光强），高温破坏溶液（50℃水浴）等降解试验。维生素B1降解情况：酸破坏溶液、碱破坏溶液及光破坏溶液均未检出新杂质；在氧化条件下，维生素B1迅速降解产生了3个较大的杂质，分别为未知杂质J、未知杂质N和未知杂质X，同时也产生了杂质D、杂质G和4个未知杂质等6个较小杂质；在高温条件下，未知杂质L和已知杂质G峰面积均有增大的趋势。结果表明，该方法能有效分离维生素B1片中杂质及相关降解产物[3-5]。

2.4线性、检测线及定量限的考察

分别精密称取杂质A、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H、维生素B1对照品适量，加溶剂制成质量浓度为600μg/mL的混合标准溶液。分别精密吸取上述混合标准溶液0 mL、0.1 mL、0.4 mL、0.6 mL、1.0 mL、1.2 mL，置于10 mL量瓶中，制成标准工作溶液。以对照品浓度为横坐标，各组分峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程，相关系数均达到0.999以上，线性良好。取维生素B1对照适量，加溶剂稀释制成质量浓度约为0.1/μg·mL对照品溶液，分别精密量取1μL、3μL、5μL、15μL注入液相色谱仪中。维生素B1检测限为0.89 ng，定量限为2.691 ng。

2.5样品测定

分别按“2.1”方法处理17家企业生产的维生素B1片，按“2.2”的色谱条件进样，记录色谱图，加校正因子的主成分自身对照法计算各有关物质含量，17个厂家结果见表1。17家企业样品共检出11种杂质，其中有5家企业样品检出单个杂质含量超出杂质鉴定限0.2%。

3结束语

根据国内现有维生素B1片检验标准的有关物质检查uZ0mEmQQi2w1CgJ1x4BLmQ==方法进行检测，维生素B1出峰较快，有关杂质不能有效分离，且对单个杂质尚未限定。以杂质鉴定限0.2%为单个杂质限度，1.0%为总杂质限度对单个杂质及总杂质进行控制。据统计，依据法定标准检测17家企业生产的维生素B1片有关物质项均在法定限度范围内。根据该方法检测，分别有企业M、企业L和企业K生产的维生素B1片检出单个杂质超出限定范围0.2%[6-7]。由此可知，目前的法定检测方法不易区分制剂维生素B1片的质量优劣，难以控制产品质量的变化，可能会导致内在质量的误判。本研究建立的检测方法专属性强、准确度好、稳定性良好，各组分均呈良好的线性关系，符合《中华人民共和国药典》2020年版四部“分析方法验证指导原则”，为评价不同厂家生产的维生素B1片质量优劣提供有力依据，也为液相色谱-串联质谱联用法测定维生素B1有关物质杂质谱的研究提供一些参考价值。

【参考文献】

[1]张佳茹，王晗，陈玉双，等.维生素B1有关物质检测方法的研究与应用[J].中国现代应用药学，2020，37（20）：2487-2492.

[2]赵娟，施润杰，张煌，等.不同厂家尼群地平片有关物质的对比研究[J].中西医结合心血管病电子杂志，2017，5（22）：87-88.

[3]易秋艳，范时根，李雯，等.不同厂家的阿立哌唑片剂中有关物质及溶出度的比较[J].华西药学杂志，2013，28（5）：532-534.

[4]王胜，周玲玲，马莹莹，等.HPLC法测定盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液中的有关物质[J].海峡药学，2020，32（6）：52-55.

[5]皮昌桥，白跃飞，孙董军，等.一种维生素B1杂质的合成方法[J].辽宁化工，2020，49（4）：341-343.

[6]国家药典委员会.中华人民共和国药典：2020年版四部[M].北京：中国医药科技出版社，2020：480-482.

[7]国家药典委员会.中华人民共和国药典：2020年版二部[M].北京：中国医药科技出版社，2020：1473-1474.

【作者简介】

郑露盼，女，1990年出生，助理工程师，学士，研究方向为食品药品质量标准研究。

通信作者：张继红，女，1979年出生，主管药师，硕士，研究方向为食品药品质量标准研究，149747048@qq.com。

（编辑：侯睿琪）