血清胆红素联合溶血三项试验在新生儿溶血病早期诊断中的应用价值研究

周 林，林承祥，李 樱，黄聘婷

（麻城市人民医院输血科，湖北 麻城 438300）

新生儿溶血病（HDN）是指因母子血型不合，母体血型抗体和胎儿血型抗原不匹配，经胎盘进入胎儿的抗体诱导胎儿或新生儿红细胞破坏，从而引起的同族免疫性溶血疾病。常见类型有Rh 溶血和ABO 溶血，其中ABO 溶血约占85.3%[1]。HDN 患儿多为足月新生儿，常见临床症状有黄疸、水肿、肝脾肿大及贫血等[2]，如不及时、有效地进行诊断和治疗，不仅会影响新生儿的神经功能、免疫功能、肾功能及心肌细胞的发育，严重时还会诱发胆汁黏稠综合征、新生儿胆红素脑病，甚至导致循环、呼吸系统衰竭，危及新生儿生命[3]。HDN 非常容易引起新生儿高胆红素血症，早期及时诊断和治疗对提高HDN 的治愈率及防止后遗症出现具有重要意义。目前，溶血三项试验通常被临床应用于HDN 的检测中，另外血清胆红素也被视为HDN 的评价指标[4]。为探究血清胆红素和溶血三项试验在HDN 早期诊断中的应用价值，本文特选取96 例母亲为O 型血的HDN 患儿为研究对象，现将研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2021 年11 月至2022 年10 月在我院出生的96例母亲为O 型血的溶血病患儿，产妇血型均为O 型RhD阳性血型。患儿血型：B 型39 例，A 型57 例；患儿日龄3 h 至20 d，平均（6.3±1.8）d。患儿均出现黄疸、水肿、肝脾肿大、贫血等症状。其中，排除患先天性肝胆系统疾病患儿。医院伦理委员会批准本研究，患儿家长知情且均签署知情同意书。

1.2 方法

（1）血清胆红素检测：取患儿3 mL 静脉血，3000 r/min 转速下离心，获得血清后应用全自动生化分析仪（贝克曼，型号AU5800）测定血清胆红素含量，血清总胆红素正常参考范围3.4 ～20.5 mmol/L。（2）溶血三项试验：包括直抗试验、游离试验、释放试验。取患儿3 mL 静脉血，应用新生儿血型检测卡、HDN 胎儿不完全抗体检测卡进行溶血三项试验，严格按照试剂要求进行操作。患儿依据HDN 诊断标准及溶血三项试验结果分为A、B、C、D四组，其中A组直抗和释放试验（+）、游离试验（-），B 组三项试验均为（+），C 组游离和释放试验（+）、直抗试验（-），D 组直抗试验（+）、游离和释放试验（-）。（3）治疗方法：以患儿具体情况为依据进行对症处理，包括蓝光、换血、丙种球蛋白等治疗。

1.3 观察指标

观察96 例HDN 患儿血型分布及不同血型患儿的溶血三项试验结果。比较四组HDN 患儿的溶血三项试验结果。对比四组HDN 患儿治疗前后的胆红素含量。分析胆红素对HDN 的早期诊断价值。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件对数据进行分析，计数资料用百分数（%）表示，采用χ2检验；计量资料以±s表示，采用t/F检验。以P＜0.05为差异显著，具有统计学意义。

2 结果

2.1 96 例HDN 患儿血型分布及不同血型患儿的溶血三项试验结果

96 例HDN 患儿中，直抗试验阳性率A 型血患儿高于B 型血患儿，且差异有统计学意义（P=0.030）；释放试验和游离试验在两种血型患儿中的阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）。详见表1。

表1 96 例HDN 患儿血型分布及不同血型患儿的溶血三项试验结果[例（%）]

2.2 四组HDN 患儿溶血三项试验结果比较

96 例HDN 患儿直抗试验阳性率为10.42%，释放试验阳性率为100.00%，游离试验阳性率为62.50%。直抗试验和释放试验同为阳性者占比4.17%，直抗试验、释放试验和游离试验均为阳性者占比6.25%，释放试验和游离试验同为阳性者占比56.25%，仅释放试验阳性者占比33.33%。阳性率比较C 组＞D 组＞B 组＞A 组，且差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表2。

表2 四组HDN 患儿溶血三项试验结果比较[例（%）]

2.3 四组HDN 患儿治疗前后胆红素含量比较

治疗前，四组HDN 患儿胆红素含量显著高于正常范围，且组间比较差异不显著（F=0.207，P=0.891）。治疗后各组患儿的胆红素水平均明显下降，且与治疗前比较差异显著（P＜0.05）。详见表3。

表3 四组HDN 患儿治疗前后胆红素含量比较（μmmol/L，±s）

表3 四组HDN 患儿治疗前后胆红素含量比较（μmmol/L，±s）

组别 例数 治疗前 治疗后 t 值 P 值A 组 4 269.4±79.21 161.3±31.24 2.539 ＜0.05 B 组 6 266.3±82.45 182.1±40.83 2.242 ＜0.05 C 组 54 252.4±87.64 185.1±48.36 4.941 ＜0.05 D 组 32 243.9±80.76 184.7±43.28 3.669 ＜0.05

2.4 胆红素对HDN 的早期诊断价值分析

胆红素预测HDN 阳性的ROC 曲线下面积（AUC）为0.716，灵敏度为0.600，特异性为0.872，详见图1、表4。表明胆红素可以作为HDN 的早期诊断指标，但灵敏度略低，容易造成漏诊。

图1 胆红素对新生儿溶血病早期诊断分析

表4 胆红素对HDN 早期诊断价值的分析

3 讨论

HDN 是临床上一种危险性较大的新生儿疾病，临床主要表现为黄疸、贫血、血清胆红素水平上升及水肿等。HDN 发生的主要原因是母亲与胎儿之间ABO 血型或Rh血型不合[5]。其发病机理为，胎儿代表父母双方的红细胞抗原表型不一致，当胎儿体内代表父体红细胞抗原的红细胞经脐带进入母体时，两者相互融合产生相应抗体，随后抗体通过胎盘传递给胎儿，最终出现抗原抗体等一系列免疫反应，发生溶血，严重威胁新生儿与母亲的生命安全[6]。临床研究数据显示，HDN 在ABO 血型中的发生率要远高于Rh 血型[7]，且ABO 血型HDN 中以母亲为O 型、新生儿为A、B 型为主，在ABO 血型引起的HDN 中大多数症状都较轻，有明显溶血症状的患儿约占6%[8]。Rh 血型引起的HDN 多发生于多胎或多次输血的孕产妇中，其发病率低，但大部分的溶血程度较严重。目前，临床上诊断HDN 的最有效方法是溶血三项试验，包括直抗试验、释放试验和游离试验，其中直抗、释放试验的目的在于了解红细胞上结合的血型抗体，二者能够确诊HDN；而游离试验能反映新生儿血清中母体血型抗体水平，但不能作为诊断HDN 的依据[9]。

释放试验 和游离试验是诊断新生儿HDN 的主要方式，胎儿血清中IgG 类抗体可采用游离试验检测，IgG类抗体的检测有利于HDN 的观察和治疗[10]。母体内IgG抗体效价和抗体数量随孕期的增加而增加，当抗体数量超过母体自身抵抗范围时，HDN 则容易被引发，此时IgG 经由胎盘途径进入胎儿的血液循环系统。由本研究结果可知，游离试验的阳性率为62.50%，提示游离试验的检测敏感度稍差，这可能与母体IgG 进入胎儿体内量的多少有关。释放试验检测结果为阳性则提示母体IgG抗A、B 抗体使患儿红细胞致敏。在本研究中，释放试验的阳性率为100.00%。对HDN 溶血三项试验结果进行组合分析，结果显示释放和游离试验均为阳性的概率显著高于其他组合，这表明在新生儿溶血的早期诊断中，溶血三项试验具有较高的价值。

直接胆红素和间接胆红素共同组成人体的血清总胆红素，其是肝、脾等脏器及骨髓中的单核吞噬细胞吞噬红细胞的产物[11]。研究表明，总胆红素在HDN 诊断中也具有重要的参考价值。杨冬梅等[12]研究发现，在HDN 患儿体内，短时间内血清胆红素水平能够快速上升且显著高于正常水平，这表明血清胆红素在HDN的诊断中可作为关键性指标。本研究中，治疗前HDN患儿胆红素含量显著高于正常范围，组间比较差异不显著（F=0.207，P=0.891）。治疗后各组患儿的胆红素水平均明显下降，且与治疗前比较差异有统计学意义（P＜0.05）。此外，在HDN 早期诊断中，血清胆红素预测HDN 阳性的AUC 为0.716，灵敏度为0.600，特异性为0.872，这表明以胆红素对HDN 进行早期诊断具有一定的价值。

综上所述，血清胆红素联合溶血三项试验有助于HDN 的早期诊断。