AIDS患者感染侵袭性真菌的临床特征和危险因素研究*

张雅婷,张媛媛,何 柳,项 杰

武汉市金银潭医院检验科,湖北武汉 430023

获得性免疫缺陷综合征(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所导致的疾病[1]。HIV可攻击人体免疫细胞,特别是CD4+T淋巴细胞,导致该细胞数量进行性减少,使机体的免疫功能严重受损,从而极易并发各种机会性感染[2]。致病性真菌和某些条件致病性真菌引起的侵袭性真菌感染(IFI)在AIDS患者中十分常见。有研究报道,47%的AIDS患者的死因与IFI有关[3]。由于IFI起病隐匿,临床特征不典型,单靠实验室检测技术常常导致漏诊[4]。本研究通过探讨AIDS患者合并IFI的危险因素以及各项指标对于AIDS患者IFI的预测价值,为临床诊断、治疗提供新思路。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2021年1月至2023年4月本院收治的194例AIDS患者为研究对象,所有患者均由本院和武汉市疾病预防控制中心艾滋病确证实验室采用蛋白印迹法(WB)确诊,检测结果均为HIV阳性。通过查阅电子病历档案,将194例AIDS患者分为IFI组(107例)和非IFI组(87例)。IFI诊断标准[5]:(1)结合患者临床特征,有IFI病史;(2)影像学检查显示肺部有炎症征兆;(3)微生物检查,感染部位包括呼吸道、消化道、泌尿道、血液等,所有纳入研究者同时进行相应的真菌培养和细菌培养。排除标准:(1)合并巨细胞病毒、EB病毒感染者;(2)合并乙、丙型肝炎病毒或梅毒螺旋体感染者;(3)合并结核分枝杆菌感染者;(4)恶性肿瘤患者;(5)合并其他细菌、支原体、衣原体感染者。本回顾性研究已通过本院医学伦理委员会审批(伦理编号:KY-2023-17)。

1.2方法

1.2.1血常规及生化指标等检测 全血淋巴细胞计数(LYM)、全血中性粒细胞计数(NEU)、血红蛋白(Hb)采用全自动血细胞分析仪(迈瑞6900)及其配套试剂进行检测。清蛋白(ALB,溴甲酚绿法,中生北控生物科技股份有限公司)、C反应蛋白(CRP,乳胶免疫比浊法,善迪诺股份有限公司)、血清葡萄糖(GLU,己糖激酶法,中生北控生物科技股份有限公司)采用全自动生化分析仪(雅培C16000)进行检测。CD4+T淋巴细胞计数采用BD流式细胞仪(FACSCanto Ⅱ)及其配套试剂进行检测。1,3-β-D-葡聚糖(BG)检测采用BG检测试剂盒(酶联免疫比色法,丹娜生物有限公司)进行检测。所有检测严格按照试剂说明书进行。

1.2.2真菌培养及鉴定 (1)非血液标本真菌培养:取适量标本接种于两管沙保罗氏琼脂培养基(江门市凯林贸易有限公司),分别于25 ℃和37 ℃条件下培养7 d。(2)血液及骨髓液真菌培养:抽取患者15 mL血液注入真菌/分枝杆菌复合瓶(美国BD医疗器械有限公司),置于全自动血培养仪(美国 BD BACTECTMFX)培养14 d,若培养过程中报阳,抽取复合瓶中适量血液,处理方法同非血液标本真菌培养。(3)真菌鉴定:依据菌落特点和显微镜下形态,念珠菌采用郑州安图生物质谱仪鉴定,丝状真菌根据菌落形态和经乳酸酚棉兰染色后的显微镜镜下形态来确定。所有检测过程按照《全国临床检验操作规程》(第4版)[6]和《医学真菌学:实验室检验指南》[7]标准执行。

2 结 果

2.1IFI组病原菌分布 107例IFI组患者共分离出114株病原菌,分离菌株以白念珠菌、新型隐球菌和马尔尼菲篮状菌为主。见表1。

表1 IFI组病原菌分布特征

2.2两组相关资料比较 与非IFI组相比,IFI组血清ALB、Hb、LYM、CD4+T淋巴细胞计数明显降低(P<0.05),而CRP、NEU、BG水平明显升高(P<0.05)。两组性别、年龄、吸烟、喝酒和合并高血压情况等比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 两组相关资料比较[n或或n(%)或M(P25,P75)]

2.3AIDS患者合并IFI的多因素Logistic回归分析 以AIDS患者是否合并IFI作为因变量(未合并IFI=0,合并IFI=1),将表2中差异有统计学意义的变量(CRP、ALB、Hb、NEU、LYM、CD4+T淋巴细胞计数和BG)作为连续性自变量以实测数赋值,进行多因素Logistic回归分析。分析结果显示,CD4+T淋巴细胞计数降低、血清ALB水平降低为AIDS患者合并IFI的独立危险因素(P<0.001)。见表3。

表3 AIDS患者合并IFI的多因素Logistic回归分析

2.4血清ALB联合CD4+T淋巴细胞计数对AIDS患者合并IFI的预测价值 ROC曲线分析结果显示,血清ALB和CD4+T淋巴细胞计数单独和二者联合预测AIDS患者合并IFI的曲线下面积(AUC)分别为0.890、0.954和0.960。血清ALB和CD4+T淋巴细胞计数的截断值分别为32.4 g/L和117个/μL。见表4、图1。

图1 CD4+ T淋巴细胞计数、血清ALB单独和二者联合预测AIDS患者合并IFI的ROC曲线

表4 血清ALB、CD4+ T淋巴细胞计数对AIDS患者合并IFI的预测价值

3 讨 论

AIDS是HIV感染所导致的以机体免疫功能受损为主要特点的传染病。HIV可进行性攻击机体免疫细胞,导致多种机会性感染和肿瘤[8]。IFI是AIDS患者合并感染的最常见形式[9]。在我国,AIDS患者发生机会性感染的主要病原性真菌为念珠菌属、肺孢子菌、隐球菌、马尔尼菲篮状菌和曲霉菌。AIDS患者一旦发生IFI,病原菌可侵犯患者心、脑、肝、肾、肺、脾、血管等,给机体造成极大的伤害[10]。在临床上,由于AIDS患者免疫功能受到不同程度的损伤,免疫反应导致的典型临床表现常在AIDS合并IFI患者中缺失,从而容易发生漏诊。因此,临床需要提高对AIDS患者合并IFI的诊断能力,以利于该类患者的治疗和预后[11]。

本研究共有194例AIDS患者,IFI患者为107例。这107例感染者中共分离出114株致病性真菌,其中最多的是白念珠菌,占71.05%。新型隐球菌和马尔尼菲篮状菌也比较常见,分别占11.41%和7.01%。这与班立芳等[12]的结论是一致的,说明念珠菌属仍然是AIDS患者合并IFI的主要病原体。

本研究Logistic回归分析发现,CD4+T淋巴细胞计数和血清ALB水平降低是AIDS患者合并IFI的独立危险因素。CD4+T淋巴细胞是人体免疫系统中重要的辅助细胞,参与机体体液免疫和细胞免疫。当机体被HIV感染时,病毒能够识别CD4+T淋巴细胞表面的特异蛋白质分子,并在细胞内复制和繁殖,导致外周血CD4+T淋巴细胞数量下降,使机体免疫功能降低,从而增加感染的发生概率[13-14]。因此,CD4+T淋巴细胞计数是评价AIDS患者免疫状况的重要指标。《艾滋病合并侵袭性真菌病诊治专家共识》中指出,建议以CD4+T淋巴细胞计数<200个/μL作为IFI筛查阈值[15]。本研究中,107例IFI组患者有101例CD4+T淋巴细胞<200个/μL,这与上述共识是一致的。ROC曲线分析结果显示,CD4+T淋巴细胞计数的AUC为0.954,当该指标截断值为117个/μL时,预测的灵敏度和特异度分别为88.0%和97.0%,预测效能较高,在临床上具有很好的参考价值。

血清ALB是机体血浆蛋白中最主要的成分[16]。有资料显示,它不仅维持着人体正常的营养状态,起到平衡血浆胶体渗透压的作用,还参与机体多种炎症反应并影响疾病预后[17]。AIDS患者由于处于免疫抑制阶段,肝脏合成功能受损,并伴有长期炎症反应,故血清ALB低于正常水平[18]。在本研究中,IFI组血清ALB水平为(28.64±6.15)g/L,非IFI组血清ALB水平为(38.52±4.89)g/L,AIDS合并IFI的患者血清ALB水平明显降低(P<0.001)。这与李娇[19]的研究结果一致。ROC曲线分析结果显示,血清ALB预测IFI的AUC为0.890。当截断值为32.4 g/L时,灵敏度和特异度分别为76.6 %和87.0%。因此,当AIDS患者血清ALB水平低于32.4 g/L,临床应该警惕真菌感染,并及时进行适量ALB补充,改善患者的其他伴随症状,提高生存质量。此外,ROC曲线分析结果发现,CD4+T淋巴细胞计数和血清ALB联合预测AIDS合并IFI的AUC为0.960,灵敏度和特异度分别为89.6%和89.5%,高于2项指标单独预测的效能。

综上所述,CD4+T淋巴细胞计数和血清ALB对AIDS患者合并IFI均有良好的预测价值。二者联合应用可以获得更好的预测效能,可以在临床中加以推广。本研究不足之处在于数据仅来源于单一机构,样本数量有限,有待大样本数据进行论证。