儿童狼疮性肾炎外周血IL-6、血沉、CD4+/CD8+水平变化及其预测价值*

杨米凤 廖亚彬 蒋雪梅 崔晶晶 毕欣 赵波

(昆明市儿童医院肾脏内科,云南 昆明 650200)

狼疮性肾炎(Lupus nephritis,LN)作为系统性红斑狼疮(Systemic iupus erythematosus,SLE)累及肾脏形成的免疫复合性肾炎,是造成患儿终末期肾衰竭的重要疾病之一,同时也是SLE病死率高的主要原因[1-2]。LN病程进展较为迅速,且预后不良,现阶段临床尚未完全阐明其发病机制,认为遗传、免疫、环境、感染及性激素等多种因素可能参与LN发生、发展[3-5]。因此,寻找评估、预测LN患儿病情及预后情况的临床指标尤为关键。白细胞介素-6(IL-6)作为一种具有多重生物学活性的免疫炎性细胞因子,参与机体多重组织细胞生长、分化等[6],已有研究证实,其在SLE患儿中呈高水平表达[7]。血沉(ESR)是敏感度较高的炎症指标,其水平升高提示机体出现炎症[8],而炎症反应贯穿狼疮性肾炎发生、发展全过程[9]。研究表明,LN发病过程中,T淋巴细胞亚群也会发生改变[10],外周血CD4+/CD8+作为免疫性指标,可有效反映机体免疫损伤情况。基于此,本研究观察LN患儿外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+,探讨其对患儿预后的预测价值,为临床诊疗提供参考。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取我院2019年1月—2022年9月收治的120例LN患儿作为观察组,纳入标准:①均符合LN相关诊断标准[11-12],且经肾组织活检证实。②首次诊断治疗。③临床资料详细完整。④患儿及家属知情并签署知情同意书。排除标准:①原发性肾脏病或其他原因继发性肾脏病。②伴有血液系统疾病或恶性肿瘤。③合并严重感染。④入院前4周内有免疫抑制剂、输血或激素治疗史。⑤伴有其他脏器功能障碍。⑥合并其他免疫相关性疾病。另选取同期体检健康儿童120例作为对照组。观察组依据SLE疾病活动度(Systemic iupus erythemato sus disease activity,SLEDAI)评分将其分为SLEDAI评分≥10分组(n=71)与SLEDAI评分<10分组(n=49);根据患儿治疗后预后情况分为预后良好组(n=34)与预后不良组(n=86),观察1年,以血肌酐较基线翻倍,估算肾小球滤过率下降50%及以上为预后不良,否则为预后良好。本研究经我院医学伦理委员会审批。

1.2 方法 两组均于空腹状态下抽取5 mL肘静脉血,以转速3 500 r/min、半径18.5 cm离心处理10 min,分离血清、血浆,贮存于-80 ℃环境下待检;采用北京奇松生物科技有限公司提供酶联免疫吸附试剂盒测定IL-6水平;采用上海科华试剂公司提供魏氏法试剂盒测定ESR水平;采用美国BD公司提供FACSCanto Ⅱ流式细胞仪测定CD4+、CD8+细胞,计算CD4+/CD8+比值。操作严格遵循仪器及试剂盒说明书。

1.3 观察指标 ①比较两组外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+,分析外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+与SLEDAI评分的相关性。②比较不同预后患儿外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+,分析LN患儿预后影响因素,评价外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+对LN患儿预后的预测价值。

2 结果

2.1 两组一般资料比较 观察组男24例,女96例,年龄6～14岁,平均(10.57±2.14)岁;对照组男30例,女90例,年龄6～18岁,平均(13.01±2.55)岁。两组性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2 两组外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+比较 观察组外周血IL-6、ESR高于对照组,CD4+/CD8+低于对照组(P<0.05),见表1。

表1 两组外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+比较

2.3 外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+与SLEDAI评分的相关性分析 SLEDAI评分≥10分组LN患儿外周血IL-6、ESR高于SLEDAI评分<10分组,CD4+/CD8+低于SLEDAI评分<10分组(P<0.05)(表2);进一步Pearson相关系数模型分析,LN患儿外周血IL-6、ESR与SLEDAI评分呈正相关,CD4+/CD8+与SLEDAI评分呈负相关(P<0.05),见图1。

图1 外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+与SLEDAI评分的相关性

表2 外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+与SLEDAI评分的相关性

2.4 不同预后患儿外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+比较 预后不良组外周血IL-6、ESR高于预后良好组,CD4+/CD8+低于预后良好组(P<0.05),见表3。

表3 不同预后患儿外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+比较

2.5 LN患儿预后的影响因素分析 以LN患儿预后为因变量(良好=0,不良=1),进行单因素、多因素分析,结果显示,SLEDAI评分、IL-6、ESR、CD4+/CD8+均为LN患儿预后影响因素(P<0.05),见表4。

表4 LN患儿预后的影响因素分析

2.6 外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+对LN患儿预后的预测价值 以LN患儿预后不良为阳性,良好为阴性,绘制ROC曲线分析可知,外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+预测LN患儿预后的AUC分别为0.777、0.751、0.788,联合预测AUC为0.921,均P<0.001;进一步对各预测方案预测价值比较显示,外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+联合预测的AUC明显较单一指标高(均P<0.05),见表5～6,图2。

图2 外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+预测LN患儿预后的ROC曲线

表5 外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+对LN患儿预后的预测价值

表6 外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+联合与单一预测方案预测价值比较

3 讨论

SLE作为一种可累及全身多个器官的自身免疫性疾病,是由机体免疫紊乱致使多种自身抗体分泌过量,形成免疫复合物沉积于器官及组织内,继而引发器官及组织损害[13-15]。据调查显示,70%左右SLE累及肾脏[16],且近年来,受多种因素影响,儿童LN发病率呈明显增长趋势,受到临床高度关注。

有学者指出,淋巴细胞功能异常与LN发病密切相关,而细胞因子在其发病过程中发挥至关重要作用[17]。细胞因子是一类具有高度生物学活性的糖蛋白或可溶性蛋白,各细胞因子间相互调节、制约,形成网络,共同参与机体免疫、炎症反应,而肾脏是在免疫反应中最易受到损伤的器官之一。本研究观察LN患儿外周血IL-6水平,发现相较于健康儿童,LN患儿IL-6水平明显升高,且其水平与LN患者SLEDAI评分呈正相关关系,提示外周血IL-6水平升高参与LN发生、发展过程。IL-6作为一种多功能炎性细胞因子,由B、T淋巴细胞产生,并可促进B淋巴细胞活化、增殖、产生抗体,其在正常水平状态时对人体有利,同时,IL-6作为原发性炎症物质,过量表达可造成机体一系列损害,致使大量巨噬细胞及单核细胞进入患处引起炎症反应[18-19]。因此,在LN发生发展过程中,IL-6水平显著升高,致使炎症反应加剧,进而严重损伤患儿肾脏,可能会影响患儿临床预后。进一步研究显示外周血IL-6水平升高为LN患儿预后不良的影响因素,故认为IL-6也可能作为该病预后预测的潜在指标之一。

ESR在自身免疫性疾病、肿瘤及各种感染时增快。既往研究指出,自身免疫性疾病发生时,免疫系统高度活化,致使机体产生大量免疫球蛋白及炎性介质,造成ESR明显增快[20]。本研究中观察组外周血ESR水平明显高于对照组,充分证实上述观点,且ESR水平与SLEDAI评分有关,充分说明LN作为一种慢性自身免疫性疾病,ESR水平变化与疾病活动度密切相关,可能参与该病病情进展。郑小丽等[21]研究指出,轻中度活动期LN患儿经治疗后,外周血ESR水平明显下降;另有学者指出,中西医结合治疗缓解期LN,患儿ESR水平显著下降[22],提示ESR水平变化可能与LN患儿临床预后有关。基于此,本研究观察不同预后患儿ESR水平,发现预后不良患儿ESR水平相对较高,且ESR水平升高为LN患儿预后影响因素,提示临床可将ESR作为LN预后预测的生化指标之一。

LN作为一种与免疫损伤密切相关的疾病,主要表现为外周血CD4+、CD8+水平异常,致使T淋巴细胞失衡,免疫功能损伤进一步加重。本研究中观察组CD4+/CD8+明显低于对照组,且CD4+/CD8+与SLEDAI评分有关,充分说明CD4+/CD8+与LN患儿疾病活动度有关。有学者指出,SLE作为一种自身免疫性疾病,疾病引起的免疫异常可致使肾脏损伤,而LN的发生也可加重免疫功能失调,进而致使病情加剧、恶化[23-24]。本研究还显示CD4+/CD8+水平与LN疾病活动度呈负相关关系,证实了上述观点,说明CD4+/CD8+与LN病情程度有关。LN患儿细胞免疫功能随病情加重而变化,CD4+作为T细胞免疫重要组成部分,其下降时,CD8+细胞活性明显降低,进而引起其数量上的升高,因此,CD4+/CD8+参与LN病情发展,临床可将其作为敏感的免疫学检测指标,用于评价LN病情进展及转归。

本研究绘制ROC曲线,发现外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+预测LN患儿预后的AUC分别为0.777、0.751、0.788,均在0.7以上,提示IL-6、ESR、CD4+/CD8+均可作为LN预后的预测指标。进一步研究显示外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+联合预测的AUC大于0.9,且明显较单一指标高,充分说明联合预测具有良好的预测效能。本研究不足之处,样本量有限,结果可能存在偏倚,且仅分析外周血各指标检测意义,缺乏动物模型及细胞模型方面研究,存在一定局限性,有待后续大样本量研究或动物模型及细胞模型证实。

4 结论

LN患儿外周血IL-6、ESR水平较高,CD4+/CD8+水平下降,且与SLEDAI评分及预后有关,临床检测其水平,可作为LN病情评估及预后预测的血液生化指标,为临床工作提供参考依据。