献血者不规则抗体筛查中全自动血型分析仪与微板法的作用分析

陈明 彭杰梅

1 宜春市中心血站 （江西 宜春 336000）

2 宜春市第二人民医院 （江西 宜春 336000）

内容提要： 目的：研究全自动血型分析仪和微板法在为献血者进行不规则抗体筛查中的效果。方法：以2022年1月～2023年1月60例献血者的血液样本为例，全部样本均使用微板法（微板组）、全自动血型分析仪方法（全自动组）进行检测，比较两组筛查结果、判断脂血标本血型情况及溶血标本血型情况以及不规则抗体类型。结果：全自动组所检测出的抗-E共有2例、抗-P1共有3例、抗-I共有1例、抗Mur共有1例、冷自身抗体3例，微板法对凝集情况均未检出。全自动组溶血标本血型判断正确率高于微板组（P＜0.05）。全自动组脂血标本血型判断正确率高于微板组（P＜0.05）。全自动组不规则抗体及O细胞凝集与IgM及IgG抗体检出率高于微板组（P＜0.05）。结论：在为献血者筛查鉴定不规则抗体当中，可以得出准确的结果。

现阶段，对于无偿献血，属于医疗当中重要的用血来源。因此，为了可以确保能够为临床安全用血，为献血者筛查血液时，采用不规则抗体，可以将其血液内有关抗体确认下来[1]。不规则抗体指的主要是将抗-A/B以外的血型抗体排除，其类型主要有红细胞自身、同种抗体。目前，对血型鉴定的时候，所用到的相关试剂，灵敏度已明显升高[2,3]。由于因鉴定血型鉴定错误，所引起的速发性溶血反应已显著降低，但是因为多次输血与妊娠等多种因素，会产生迟发性的溶血反应，还会时不时地发生，不规则抗体使血型鉴定的难度增大，还会引起疑输血不良反应。因此，对于献血者，对其血液筛查不规则抗体可保障临床安全用血[4,5]。在当前，针对献血者的不规则抗体筛查，微板法以及全自动血型分析仪属于十分常用的筛查手段，为了能够找出合理的筛查方案，本次以60例献血者的血液样本为例，对相关内容重点分析。

1.资料与方法

1.1 临床资料

以2022年1月～2023年1月60例献血者的血液样本为例，入选的献血者中男性30例，女性30例；年龄22～46岁，平均（34.49±4.51）岁。纳入的献血者均符合健康检查，献血者了解本次调查内容，符合献血要求。

仪器与试剂：全自动血型分析仪（生产厂家：深圳市爱康生物科技有限公司；型号：Metis150-8s）检测血型、全自动加样器[（生产厂家：北京普利生仪器有限公司；型号：AMP2000-S型）、低速离心机（生产厂家：四川蜀科仪器有限公司；型号：LD-5M）、振荡孵育器（生产厂家：上海珂淮仪器有限公司；型号：MTC-100）、酶标仪（生产厂家：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司；型号：MR-96A）、人ABO血型反定型用红细胞试剂盒（生产厂家：长春博迅生物技术有限责任公司；生产批号：211113）、血型鉴定及不规则抗体筛查质控品（生产厂家：深圳市爱康试剂有限公司；生产批号：211212）]。

1.2 方法

微板组采用微板法：结合于微孔板红细胞凝集法的原理相，对微孔板选择，96孔U型的，并使用STAR加样仪，对样本及试剂，进行处理；加样本为50μL血浆，Oc试剂为50μL，在1700r/min速度之下离心，在离心3min后，放于孵育振荡器（4分值）内：Accel设置为1，1200r/min速度下振荡，之后放置2分值，选用酶标仪比色，并对结果进行相应的判读。

全自动组予以全自动血型分析仪筛查。借助微孔板红细胞凝集法，将入选者5mL的全血标本，以及10mL质控品，放到离心机内，在3000r/min转动速度之下，离心12min，借助阶梯型微孔板，合理分配样本以及试剂，放于恒温孵育器内，温度在30°C下，孵育1h，借助数字图像处理法，进行判定，完成首次筛查。若是首次结果是阳性，借助盐水介质法等方式，明确抗体性质，在使用已确定的红细胞抗原，覆盖上谱细胞，应用抗球蛋白法，鉴定抗体的特异性。

1.3 观察指标与判定标准

⑴筛查结果：统计不规则与IgM和IgG抗体以及O细胞凝集检出情况，检出率=检出数/总数×100%。O细胞凝集判定标准：①全自动血型分析仪筛查：SPC＜10：凝集，=10：可疑，＞10代表是无凝集；P/C在30以内代表凝集，15～30，代表可疑，15以上，代表无凝集；LIA在300以内，代表凝集，100～300，代表可疑。100以上代表无凝集。把SPC当成判断的参数，若是另外2个参数值，在可疑范围内，需要判定参数值结果；而如果SPC值于可疑的范围内，需要将其送到血型室做有关鉴定；②微板法：判定O细胞凝集标准：cutoff的参考值是0.6。⑵两组判断脂血标本血型情况比较：统计判断正确与无法判读和误判数量。⑶两组判断溶血标本血型情况比较：统计判断正确与无法判读和误判数量。⑷两组不规则抗体类型：对2种筛查方法不规则抗体类型统计：冷自身抗体、抗Mur、抗-I、抗-P1、抗-Leb、抗-E及抗-M。

1.4 统计学分析

统计学软件SPSS25.0处理数据，计数资料用%表示，行χ2检验，P＜0.05为数据差异显著。

2.结果

2.1 比较两组筛查结果

两组不规则抗体等检出率比较，相对于微板组，全自动组更高（P＜0.05），见表1。

表1.筛查结果比较[n(%)]

2.2 比较两组判断脂血标本血型情况

全自动组脂血标本血型判断正确率高于微板组（P＜0.05），见表2。

表2.两组判断脂血标本血型情况比较[n(%)]

2.3 比较两组判断溶血标本血型情况

两组溶血标本血型判断正确率比较，全自动组高于微板组（P＜0.05），见表3。

表3.两组溶血标本血型情况比较[n(%)]

2.4 两组不规则抗体类型比较

全自动组所检测出的抗-E、抗-P1、抗-I、抗Mur以及冷自身抗体各2例、3例、1例、1例、3例，微板法对凝集情况均未检出，见表4。

表4.不规则抗体类型比较[n(%)]

3.讨论

在健康的人群中，约有0.30%～2.00%的人群存在着不规则的抗体，而血型抗体是诱发溶血性输血反应的主要因素[6,7]。所以，为了更好地保障临床安全用血，应强化展开对于无偿献血者不规则抗体的筛查[8-10]。

临床上为了取得更为准确与可靠的筛查结果，以及临床科技的不断进步，全自动血型分析仪法在临床应用日益广泛，且此种操作手段可以在鉴定血型期间，确保整个过程都可以自动化处理。并且，筛查血型准确性也十分高，且其抗干扰能力较强，进而针对盐水内，不规则抗体，可以被准确的观察到。对于全自动血型分析仪，在筛查不规则的抗体灵敏度期间，相比于微板法要更好，也更容易将盐水介质凝集试验的阳性抗体发现，继而确保血液的安全性。该分析仪的试剂用量仅需要25μL，在试剂的成本方面，相比于微板法更优[11,12]。采用全自动血型检测仪所检测的标本血型，均设置质控监测（1个），可将假凝集情况观察到，可以显著提升检测特异性，而且有着较好的重复性，试验的过程更加自动化，标准化与规范化，并有着更为可靠的鉴定结果，全程都可以进行自动的记录备份，以及长期保存原始数据，便于最终查询结果等，300人份/h的检测速度，也更加适用于血站处理大批量的标本。全自动组不规则抗体及O细胞凝集与IgM及IgG抗体检出率高于微板组（P＜0.05）。此结果得出的因素为，我国血站在筛查不规则抗体以及献血者的血型期间，主要采用U型的微孔板手工比色法，具体操作期间，每一环节都由人工操作，因此人为等因素易对最终检验结果造成影响。借助微板法对筛查献血者不规则抗体进行初筛，虽然可以大批量筛查血液样本，但在具体检测期间，将盐水当成反应介质，多数于室温下将完成有关操作，因此可使得少量的稀与凝集弱的抗体，难以被检测到。而采用全自动血型分析仪在整个实验当中，均在自动化下完成，还可借助条码对整个检测过程进行控制，且可以借助自动成像系统对结果进行判断，且可以将其保存下来，经自动化检测能够将由于人为失误等因素，而可以避免出现结果偏差，有效地补充了微板法筛查的不足。本研究结果表明：全自动组所检测出的抗-E、抗-P1、抗-I、抗Mur以及冷自身抗体各2例、3例、1例、1例、3例，微板法对凝集情况均未检出。对于抗-M抗体属于天然的一种抗体，也属于对于干扰血型鉴定的抗体，2种方式检出率都十分高，而且微板法所检出的大多数抗体，均为有着冷抗体性质的同种抗体。所以，临床价值相较而言是非常有限的。而在微板法漏检的抗体种类当中能发现，抗-Leb以及抗-P1属于冷抗体。于常温下，不会将O细胞凝集，只有在特定条件下才可以激活补体。而对于微板法，一般于室温条件下完成，而全自动血型分析仪孵育温度在30°C左右。因此，采用微板法易使得该类抗体出现漏检的情况。就算是采用全自动血型分析仪进行筛查，在检出冷自身抗体方面，检出率较微板法高，但于一般情况下，随着温度日益上升，冷凝集素凝集能力，会逐渐降低，并有假阴性几率。本研究还得出：全自动组溶血标本血型、脂血标本血型的判断正确率均明显高于微板组（P＜0.05）。由此可以看出：采用全自动血型分析仪有着非常强的抗干扰，可以避免出现误判等情况出现。

综上所述，和无偿献血的特点及血站血型筛查的特点，在为无偿献血者对不规则抗体筛查中，全自动血型分析仪筛查应用价值较高，同时较比微板法更加具有优势性，能够将无偿献血者血液质量安全提升。