扶正和解方治疗儿童呼吸道病毒性感染疗效及对免疫功能的影响

2024-03-20李欣旖胡宗侃解玉马文婷周蓉芳吕琦昝杰彧周玲芳袁泽婷

广州中医药大学学报 2024年3期

李欣旖，胡宗侃，解玉，马文婷，周蓉芳，吕琦，昝杰彧，周玲芳，袁泽婷

（1.上海中医药大学附属普陀医院儿科，上海 200062；2.上海中医药大学附属普陀医院感染科，上海 200062；3.上海中医药大学附属普陀医院中心实验室，上海 200062）

呼吸道病毒感染在儿科临床上较为常见，大多由儿童免疫力低下引起，感染后儿童往往会出现鼻塞、流涕、发烧以及咽喉肿痛等症状，如果没有得到及时有效的治疗就会导致疾病进展，不但影响患儿的身心健康，还会阻碍患儿的生长发育[1]。一些呼吸道病毒性传染病如甲型H1N1 流感、手足口病和麻疹等的高发和迅速传染给儿童的健康带来了极大威胁，而大多数抗病毒药物虽然起到了一定的治疗作用，但也给机体带来了更多的不良反应[2]。现有研究[3]显示，中医药对小儿呼吸道病毒感染有很大的治疗作用，其辨证论治特有的优势日益突显。扶正和解方为本院验方，是从小柴胡汤合银翘散衍化而来的，具有疏风散热、清热解毒等作用，已被研究证实对小儿病毒性感染疾病有辅助治疗作用[4]，但其作用机理仍不清楚。本研究以呼吸道病毒甲型H1N1感染患儿为研究对象，在常规治疗基础上加以扶正和解方治疗，并监测其临床疗效、中医证候积分以及免疫功能等变化情况，旨在探讨扶正和解方对呼吸道病毒甲型H1N1感染患儿治疗作用的可能机制，现将研究结果报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象及分组选取2022 年3~6 月上海中医药大学附属普陀医院收治的呼吸道病毒甲型H1N1 感染患儿，共203 例。根据患儿入院顺序，采用随机数字表法将患儿随机分为观察组101 例和对照组102例。本研究符合医学伦理学要求并通过上海中医药大学附属普陀医院医学伦理委员会的审核批准，同时所有入组患儿家属均签署了书面知情同意书。

1.2 诊断标准

1. 2. 1 西医诊断标准参照《诸福棠实用儿科学》（第8 版）[5]中的诊断标准，依据患儿临床体征、症状、病史、X线片检查及相关实验室指标检测等确诊为呼吸道病毒甲型H1N1 感染。①病史：有接触患者或去过疾病重灾区；②临床症状：发热（体温≥37.5 ℃）、头痛、咽喉疼痛、咳嗽、鼻塞、喷嚏、流涕等；③血液检查：可出现白细胞计数（WBC）和血小板（PLT）减少，或血钾水平降低，或天门冬氨酸氨基转移酶（AST）升高；④咽拭子或鼻拭子核酸检测结果阳性，并且可培养出病毒。

1.2.2 中医诊断标准参照《中药新药证候及疗效评价》[6]中的相关内容制定风热型流感的诊断标准。主症：身体发热、恶寒、汗出不畅、鼻塞、流涕、喷嚏；次症：面色少华、大便溏薄、头胀痛、咽痒、咳嗽、恶风、声嘶、咽痛；舌脉：脉象浮数、舌边红、苔薄黄。

1.3 纳入标准 ①符合上述中西医诊断标准；②体温≥37.5 ℃；③病例资料完善；④监护人同意参加本研究并签署了相关知情同意书的患儿。

1. 4 排除标准 ①伴有其他心脑血管疾病的患儿；②入组前1周接受其他项目研究的患儿；③过敏性体质及已知对本研究所用药物过敏的患儿；④伴有精神疾病，无法配合治疗的患儿；⑤依从性差，未按规定方案进行治疗或自行加用其他治疗措施，从而影响疗效和安全性判定的患儿。

1.5 治疗方法 2 组患儿均给予常规治疗，包括退热、维持正常水电解质、保障足够睡眠等。在此基础上，对照组患儿给予利巴韦林颗粒（四川百利药业有限责任公司，批准文号：国药准字H51023508）温开水冲服，每天剂量为4 mg·（kg·d）-1，分3～4 次服用，连续用药7 d；布洛芬颗粒（哈药集团三精制药诺捷有限责任公司，批准文号：国药准字H20073780）口服，每天剂量为20 mg·（kg·d-1），分2次服用，直至退热。观察组在对照组的基础上给予扶正和解方（为本院验方，由黄芩9 g、金银花9 g、藿香9 g、柴胡6 g、苍术6 g、生甘草6 g等中药组成）治疗。每日1 剂，由上海中医药大学附属普陀医院煎药室统一用煎药机熬制，每剂中药煎取100 mL。低于3岁者每日1/2剂，3 岁及以上者每日1剂，分2次温服。治疗7 d为1个疗程，2组患儿均连续治疗1个疗程后评价疗效。

1.6 观察指标及疗效评价标准

1.6.1 中医证候积分参照《中药新药证候及疗效评价》[6]制定中医证候分级量化评分表，分别于治疗前后对2组患儿进行中医证候评分，其中，主症（身热较著、恶寒、汗出不畅等）按无、轻度、中度和重度4级分别计为0、2、4、6分，次症（咽痒、咳嗽、恶风、声嘶、咽痛等）分别计为0、1、2、3分；分值越高，表示症状越重。观察2组患儿治疗前后身热较著、恶寒、汗出不畅等主症积分和次症积分及总积分的变化情况。

1. 6. 2 临床症状消退时间记录2 组患儿发热、咳嗽、咳痰、咽痛等临床症状的消退时间并进行比较。

1. 6. 3 免疫学指标检测分别于治疗前后采集2组患儿晨起空腹静脉血5 mL，在转速为3 000 r/min、离心半径为10 cm的条件下离心10 min，取上层血清，用流式细胞仪（Thermo Fisher 产品，型号为Attune CytPix）测定T 淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+和B细胞表达水平。观察2组患儿治疗前后各项免疫学指标的变化情况。

1.6.4 炎症因子水平测定根据“1.6.3”项下方法分离血清，采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清淀粉样蛋白（SAA）、C 反应蛋白（CRP）、白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素6（IL-6）、可溶性白细胞介素2 受体（SIL-2R）、干扰素γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）等炎症因子水平，试剂盒均购自广州奥瑞达生物科技有限公司，严格按照试剂盒说明书操作。观察2组患儿治疗前后各项炎症因子水平的变化情况。

1. 6. 5 不良反应情况记录2 组患儿恶心呕吐、白细胞降低、皮疹等不良反应发生情况，比较2组患儿的不良反应发生率。

1.6.6 临床疗效评价标准参照《中药新药证候及疗效评价》[6]及文献[7]的相关内容制定疗效评价标准。①治愈：临床症状与体征全部消失，中医证候积分降低≥90%；②显效：临床症状与体征显著改善，75%≤中医证候积分降低＜90%；③有效：临床症状与体征有所好转，35%≤中医证候积分降低＜75%；④无效：临床症状与体征无改善，中医证候积分降低＜35%。总有效率=（治愈例数+显效例数+有效例数）/总病例数×100%。

1.7 统计方法应用SPSS 23.0统计软件进行数据的统计分析。计量资料（均符合正态分布和方差齐性要求）用均数±标准差（）表示，组内治疗前后比较采用配对t检验，组间比较采用两独立样本t检验。计数资料用率或构成比表示，组间比较采用χ2检验。均采用双侧检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2 组患儿脱落情况及基线资料比较研究过程中，观察组脱落1例，对照组脱落2例，最终观察组和对照组各有100 例患儿纳入研究。观察组100 例患儿中，男44 例，女56 例；年龄2～11 岁，平均年龄（6.28±1.35）岁；体温37.4～38.6 ℃，平均体温（38.24±0.36）℃；病程7～70 h，平均病程（28.29 ± 2.67）h。对照组100 例患儿中，男51 例，女49例；年龄2～12岁，平均年龄（6.36±1.28）岁；体温37.6～39.1 ℃，平均体温（38.37±0.46）℃；病程6～68 h，平均病程（27.34±2.52）h。2组患儿的性别、年龄、体温、病程等基线资料比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），表明2 组患儿的基线特征基本一致，具有可比性。

2.2 2组患儿临床疗效比较表1结果显示：治疗7 d 后，观察组的总有效率为93.00%（93/100），对照组为88.00%（88/100），观察组的疗效优于对照组，但组间比较，差异无统计学意义（χ2=1.454，P=0.228）。

表1 2组呼吸道甲型H1N1病毒感染患儿临床疗效比较Table 1 Comparison of clinical efficacy between the two groups of children with respiratory H1N1 virus infection [例（%）]

2.3 2组患儿治疗前后中医证候积分比较表2结果显示：治疗前，2 组患儿的主症积分（包括身热较著、恶寒、汗出不畅等）、次症积分和总积分比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。治疗后，2组患儿的主症积分、次症积分和总积分均较治疗前降低（P＜0.05），且观察组的降低幅度均明显优于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。

表2 2组呼吸道病毒甲型H1N1感染患儿治疗前后中医证候积分比较Table 2 Comparison of TCM syndrome scores between the two groups of children with respiratory H1N1 virus infection before and after treatment（，分）

注：①P＜0.05，与治疗前比较；②P＜0.01，与对照组治疗后比较

组别观察组对照组t值P值治疗后14.50±2.56①②20.44±3.71①13.178 0.000例数/例100 100身热较著治疗前4.28±1.37 4.31±1.41 0.153 0.879治疗后1.24±0.82①②2.62±0.67①13.032 0.000恶寒治疗前4.76±1.06 4.74±1.24 0.123 0.903治疗后1.27±0.73①②2.65±0.81①12.656 0.000汗出不畅治疗前4.65±1.24 4.62±1.08 0.182 0.855治疗后1.43±0.59①②2.83±1.28①9.933 0.000次症治疗前16.28±3.21 16.32±3.34 0.0.86 0.931治疗后10.56±2.26①②12.34±3.53①4.247 0.000总积分治疗前29.27±3.16 29.99±3.28 1.581 0.116

2.4 2组患儿临床症状消退时间比较表3结果显示：治疗后，观察组患儿的发热、咳嗽、咳痰、咽痛等临床症状消退时间均较对照组明显缩短，差异均有统计学意义（P＜0.01）。

表3 2组呼吸道病毒甲型H1N1感染患儿临床症状消退时间比较Table 3 Comparison of time for the resolution of clinical symptoms between the two groups of children with respiratory H1N1 virus infection（，d）

注：①P＜0.01，与对照组比较

组别观察组对照组t值P值咽痛2.58±0.61①3.82±0.73 13.035 0.000例数/例100 100发热2.35±0.34①3.67±0.72 16.578 0.000咳嗽2.82±0.67①3.51±0.91 6.106 0.000咳痰3.16±0.91①4.18±0.64 9.168 0.000

2.5 2组患儿治疗前后免疫学指标比较表4结果显示：治疗前，2 组患儿的T 淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+和B 细胞表达水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。治疗后，2 组患儿的CD3+、CD4+水平均较治疗前升高（P＜0.05），CD8+、B 细胞水平均较治疗前降低（P＜0.05），且观察组对CD3+、CD4+水平的升高幅度及对CD8+、B 细胞水平的降低幅度均明显优于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。

表4 2组呼吸道病毒甲型H1N1感染患儿治疗前后免疫学指标比较Table 4 Comparison of immunological indicators between the two groups of children with respiratory H1N1 virus infection before and after treatment（，%）

注：①P＜0.05，与治疗前比较；②P＜0.01，与对照组治疗后比较

组别观察组对照组t值P值治疗后11.27±1.05①②14.35±1.13①19.967 0.000例数/例100 100 CD3+治疗前54.18±5.72 54.26±6.34 0.094 0.926治疗后66.92±6.17①②60.27±6.14①7.640 0.000 CD4+治疗前35.27±3.16 35.43±3.52 0.338 0.736治疗后47.19±4.17①②39.28±3.62①14.324 0.000 CD8+治疗前34.17±3.16 34.24±3.28 0.154 0.878治疗后23.19±2.64①②29.35±3.17①14.932 0.000 B细胞治疗前18.61±1.24 18.58±1.16 0.177 0.860

2.6 2组患儿治疗前后炎症因子水平比较表5结果显示：治疗前，2组患儿的血清SAA、CRP、TNF-α、IL-2、SIL-2R、IL-6、IFN-γ水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。治疗后，2组患儿的血清SAA、CRP、TNF-α、SIL-2R、IL-6水平均较治疗前明显降低（P＜0.05），血清IL-2、IFN-γ水平均较治疗前明显升高（P＜0.05），且观察组对血清SAA、CRP、TNF-α、SIL-2R、IL-6水平的降低幅度及对血清IL-2、IFN-γ水平的升高幅度均明显优于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。

表5 2组呼吸道病毒甲型H1N1感染患儿治疗前后炎症因子水平比较Table 5 Comparison of inflammatory factor levels between the two groups of children with respiratory H1N1 virus infection before and after treatment（）

注：SAA：血清淀粉样蛋白；CRP：C反应蛋白；TNF-α；肿瘤坏死因子α；IL-2：白细胞介素2；SIL-2R：可溶性白细胞介素2受体；IL-6：白细胞介素6；IFN-γ：干扰素γ。①P＜0.05，与治疗前比较；②P＜0.01，与对照组治疗后比较

组别观察组对照组t值P值例数/例100 100 SAA/（mg·mL-1）治疗前256.34±30.64 251.05±36.18 1.116 0.266治疗后94.14±10.35①138.67±11.67①28.548 0.000 CRP/（mg·mL-1）治疗前10.34±1.36 10.52±1.27 0.967 0.335治疗后4.18±1.34①6.15±1.29①10.591 0.000 TNF-α/（pg·L-1）治疗前26.94±4.28 26.85±3.64 0.160 0.873治疗后11.24±3.24①16.37±3.61①10.575 0.000治疗后2.96±0.64①②2.04±0.71①9.625 0.000组别观察组对照组t值P值例数/例100 100 IL-2/（ng·L-1）治疗前135.27±13.34 138.62±13.27 1.780 0.077治疗后246.35±26.19①②189.34±22.14①16.624 0.000 SIL-2R/（ng·L-1）治疗前451.28±36.82 448.24±31.64 0.626 0.532治疗后289.64±21.37①②356.27±25.46①20.045 0.000 IL-6/（pg·L-1）治疗前71.24±8.37 68.34±7.68 2.553 0.061治疗后30.64±5.19①②46.37±6.28①19.308 0.000 IFN-γ/（ng·L-1）治疗前1.46±0.34 1.51±0.61 0.716 0.475

2.7 2组患儿不良发应发生情况研究过程中，对照组患儿出现3 例恶心呕吐、2 例白细胞降低及3 例皮疹，不良反应发生率为8.00%；观察组患儿出现1例恶心呕吐及1例白细胞降低，不良反应发生率为2.00%；观察组的不良反应发生率略低于对照组，但组间比较，差异无统计学意义（χ2=3.789，P=0.052）。

3 讨论

儿童呼吸道病毒甲型H1N1感染是儿科临床上较为常见的疾病，其起病急，病情变化快，且易复发，很容易对患儿的免疫力造成较大的影响，如果得不到及时的治疗，很可能会波及到其他的器官系统，从而引发严重的并发症，对患儿成长发育造成较大的影响[8]。中医无该病毒感染病名的相应记载，临床上可归属于“风热”“感冒”“热伤风”等范畴，属于中医外感病的一种，因外感疫毒而生热化火，病之愈重，热愈炽盛，为疫毒之邪侵袭肺卫所致之热，并非热极转化之热，故治当以解毒为主[9]。通常邪毒都是由外感风邪造成的，当风邪侵入肺系，就会导致营卫失和、阴阳气血不能正常运行；另外，儿童肺部比较脆弱，容易导致气道阻塞、肺失宣降而出现咳嗽、流涕的症状，还可侵犯咽喉而导致咽喉干痒、肿痛等症状[10]。小儿之体稚阴稚阳，外感风邪，风邪易游走于表里之间，故需用和解法来调和表里、肺卫和肝脾，以达内通外达、表里双解、肝脾调和之效。呼吸道病毒甲型H1N1 感染的病因主要是风、湿、热、毒，故需配合疏风和解法来解证。

基于此，本研究探讨了扶正和解方治疗儿童呼吸道病毒甲型H1N1感染疗效及其对中医证候积分、免疫功能的影响，研究结果显示：治疗7 d后，观察组的总有效率为93.00%（93/100），略优于对照组的88.00%（88/100），但组间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；在症状改善方面，观察组患儿的发热、咳嗽、咳痰、咽痛等临床症状消退时间均较对照组明显缩短，中医证候积分较对照组明显降低，差异均有统计学意义（P＜0.05 或P＜0.01）。表明扶正和解方治疗儿童呼吸道病毒甲型H1N1感染疗效显著，可明显缩短病程，缓解病情。分析其原因：本研究所用的扶正和解方是从小柴胡汤合银翘散衍化而来的。小柴胡汤出自《伤寒杂病论》，能和解表里以平衡营卫，攻补兼施而扶正袪邪[11]；银翘散为一种辛凉平剂，除能清风热表邪之外，还有使邪气透散的功效[12]。全方以柴胡为君药，黄芩为臣药，金银花、藿香、苍术为佐药，甘草为使药。遵循小儿服药宜精不宜轻之原则，用金银花疏散风热[13]；小儿呼吸道病毒甲型H1N1感染初期存在风热之邪内伏化热，黄芩是肺经要药之一，具清热解毒之功效[14]，与柴胡合用，能和解表里、透达膜原；甘草调和药性；结合小儿多有肺脾气虚之特点，加藿香辟秽化湿，后用苍术之类健脾燥湿以扶正袪邪[15]。全方诸药合用，共奏疏风散热、清热解毒之功效。

同时，本研究发现，治疗后，2 组患儿的T 淋巴细胞亚群CD3+、CD4+水平均较治疗前升高（P＜0.05），CD8+、B 细胞水平均较治疗前降低（P＜0.05），且观察组对CD3+、CD4+水平的升高幅度及对CD8+、B 细胞水平的降低幅度均明显优于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。表明扶正和解方治疗儿童呼吸道病毒甲型H1N1感染，可有效改善患儿免疫功能。因扶正和解方汤中的柴胡含有大量皂苷，除具有解热镇痛作用外，还有一定的免疫功能调节作用；金银花可疏散风热、清热解毒，其含有有机酸、环烯醚萜等成分，对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、呼吸道合胞病毒、腺病毒等病原菌及病毒有一定的抑制作用，可以降低各种上呼吸道传染病病毒的入侵，从而达到消炎、提高机体免疫力的效果[16]。

血清淀粉样蛋白（SAA）是一种特异性蛋白，为体内急性期的炎症反应标志物，其血清水平是反映感染性疾病的早期敏感指标；C反应蛋白（CRP）在机体受到感染或组织损伤时其含量急剧上升，可反映机体炎症或组织损伤的情况[1]。本研究结果显示：治疗后，2组患儿的血清SAA、CRP水平均较治疗前明显降低（P＜0.05），且观察组对血清SAA、CRP的降低幅度均明显优于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。表明扶正和解方具有较好的抗炎、抗病毒作用。

肿瘤坏死因子α（TNF-α）属多源性细胞因子，其可对人体的免疫应答产生影响，还可启动中性粒细胞的趋化，从而启动炎症级联反应，其过表达会导致多脏器系统的损伤[17]。白细胞介素2（IL-2）属T细胞生长因子，可与其受体结合，从而介导人体T 细胞免疫；可溶性白细胞介素2 受体（SIL-2R）则可与IL-2 受体竞争性结合，致使T 细胞的发育受到抑制，从而削弱人体免疫功能[18]。白细胞介素6（IL-6）具有广泛的生物活性，其在细胞因子网络组成中起到了关键的作用，可参与调节人体的免疫反应和疾病的免疫病理学过程[19]。而干扰素γ（IFN-γ）是人体免疫细胞和某些非免疫细胞经过病毒以及其他的干扰素诱导剂刺激后而分泌的一种小分子蛋白，具有调节机体免疫力、抗病毒、抗肿瘤的功效。本研究结果显示：治疗后，2组患儿的血清TNF-α、SIL-2R、IL-6水平均较治疗前明显降低（P＜0.05），血清IL-2、IFN-γ 水平均较治疗前明显升高（P＜0.05），且观察组对血清TNF-α、SIL-2R、IL-6 水平的降低幅度及对血清IL-2、IFN-γ 水平的升高幅度均明显优于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。这说明扶正和解方可较好地改善儿童呼吸道病毒甲型H1N1 感染后的免疫功能，并调控炎症反应，继而有效缓解病情。

综上所述，扶正和解方用于治疗儿童呼吸道病毒性感染疗效确切，可有效改善患儿中医证候，调控炎症反应，提高机体免疫功能，加快临床症状缓解并缩短病程。