生猪疫病诊断及综合防治技术

文│崔运好 （山东省平邑县畜牧发展促进中心）

养猪业不仅在全球经济发展中发挥着重要作用，还给群众餐桌上提供了丰盛的畜产品。常见的猪疫病包括猪瘟、猪圆环病和猪蓝耳病，猪疫病的暴发和传播给该行业带来了巨大的挑战，不仅会降低猪的生产性能，还不利于养猪业的绿色健康发展。准确的诊断方法和综合的防治技术对控制猪疫病的传播和暴发至关重要。笔者通过介绍猪疫病的诊断方法和综合防治技术的研究进展为猪疫病的控制和防治提供参考。

一、猪疫病的诊断方法

1.临床观察。通过观察猪的临床症状初步判断是否存在猪疫病。常见症状包括发热、食欲减退、精神沉郁、腹泻等。临床观察作为最常用的诊断方法只能初步判断是否存在猪疫病，结果具有主观性和局限性，无法提供确切的诊断结果。

2.病原学检测。通过PCR（聚合酶链式反应）和ELISA（酶联免疫吸附测定法）等病原学检测方法来诊断疾病。PCR的原理是在体外复制和扩增特定的DNA或RNA片段。在生猪疫病诊断中可以通过提取病原体样本中的核酸，如病毒的RNA或细菌的DNA作为PCR模板。首先，设计合适的引物，包括前向引物和反向引物。这些引物应与目标基因的序列完全匹配，以确保特异性扩增。在生猪疫病诊断中可以选择与特定病原体相关的基因作为靶标，如病毒的保守区域或细菌的特定基因片段。其次进行PCR反应，PCR反应涉及3个主要步骤：变性、引物结合和延伸。在高温条件下，样本中的DNA或RNA被变性为单链，并分离为两个模板链。最后，反应体系中的引物结合到目标基因的特定区域，引物的设计使其能与目标序列的两端相互衔接，合成新的DNA链。

ELISA方法基于抗原与抗体的特异性结合原理，通过检测特定抗体在猪血清中的含量来判断是否感染疫病。在ELISA检测中，通过将特定病原体的抗原固定在微孔板上，然后加入猪血清样本。如果该猪血清中存在特定病原体的抗体，加入底物后会触发酶促反应，并产生可测量信号，通常是颜色变化，根据颜色强度可以判断猪血清中特定病原体抗体的含量。

3.病毒分离。病毒分离是一种常用的病原体诊断方法，也是猪疫病诊断中重要的技术手段。病毒分离可以从临床样本中成功地将病原体分离出来，并在体外培养，以确定疾病的存在和鉴定病原体的类型。首先，从患病猪体内采集适当的临床样本，如血液、组织、分泌物或粪便等。然后，样本中的病毒通过离心、超滤、沉淀等方法被释放并提纯，以消除其他非病原体成分的干扰。接下来将纯化后的样本接种到特定细胞系或动物模型中进行培养，细胞系通常是从猪或其他动物中提取的可供病毒生长的细胞。在培养基中提供适宜的营养物质和环境条件，促使病毒在细胞内繁殖和扩增。通过培养基的定期更换和细胞形态变化可以检测到病毒的生长和复制。

4.血清学检测。血清学检测可以通过凝集试验和中和试验来实现，主要是检测血清中的抗体水平。凝集试验是一种简单而常用的血清学检测方法，通过观察血清与特定病原体抗原之间的凝集反应来判断是否存在抗体。在凝集试验中，将猪血清与抗原混合，如果猪血清中存在与抗原相应的抗体就会发生凝集反应。通过观察凝集程度可以初步判断猪是否感染猪疫病。中和试验是另一种血清学检测方法，用于检测猪血清中的中和抗体。中和抗体能与病原体抗原结合，并阻止其进一步感染细胞或产生病理反应。在中和试验中，将猪血清与病原体感染细胞进行共同培养，如果猪血清中存在中和抗体，它们会中和病原体并阻止其对细胞的感染。通过细胞存活情况可以判断猪血清中是否存在中和抗体，进而诊断是否感染猪疫病。

5.分子免疫学检测。分子免疫学检测是一种基于基因工程和免疫学技术的先进方法，用于诊断猪疫病。该方法通过检测特定的免疫相关基因或蛋白质来确定猪体内的病原存在与否，具有高度的敏感性和特异性。一种常见的分子免疫学检测方法是免疫印迹（Western blotting）。该技术基于特定抗体与目标蛋白质的特异性结合原理，可以检测猪血清中的特定抗体。在免疫印迹中，将猪血清中的抗体与目标蛋白质进行电泳分离，并通过酶反应或荧光等方法进行检测。通过观察特定蛋白质条带的出现与强度可以确定猪血清中是否存在特定抗体，从而进一步确认病原体的存在。

二、猪疫病的综合防治技术

1.疫苗接种。针对不同的猪疫病类型，科学家们开发出了特定的疫苗，如猪瘟疫苗、猪蓝耳病疫苗等。疫苗接种可以有效提高猪只免疫力，减少感染风险，并在疫情暴发时控制疫情的扩散。疫苗接种后通过引入病原体的抗原或弱毒株刺激猪的免疫系统产生特异性抗体和免疫记忆，使猪在接触真正的病原体时能迅速应对并抵御感染。疫苗接种需要制定合理的接种计划，确保生猪获得充分的免疫保护。

2.加强环境卫生管理，做好生物安全措施。良好的环境卫生管理对预防猪疫病至关重要，定期清洗饮水设备和饲喂设备，保持猪舍正常的通风和温湿度，利用次氯酸、烧碱等不同的消毒剂轮换对猪舍进行消毒，彻底杀灭病原菌，降低疾病传播风险。生物安全措施包括隔离感染猪群，限制人员和物品进入猪场，严格控制病原体进出和确定猪群的生物安全区域。通过建立生物安全措施可以有效减少病原体的传播风险，保护生猪健康，定期监测病原体，及时进行隔离治疗，清除潜在风险。

3.动物的运输管理。运输过程中容易引起疫病传播，因此，合理管理动物运输对控制猪疫病至关重要。目前，部分承运人的动物运输知识和技巧不足，在运输过程中经常出现动物死亡的情况，不仅造成经济损失还可能引起疫情传播。因此，运输动物前，官方兽医要严格进行动物检疫，运输车辆采取适当的隔离措施，车厢地板做好防滑、防水处理，及时做好动物排泄物收集工作，确保不同来源或不同健康状况的猪在运输过程中不发生交叉感染。加强对运输人员的培训与监管，运输车辆配备相应的清洗、消毒设施，防止病原体跨地区传播。

4.监测和早期警报系统。建立一个高效的早期警报系统是做好生猪疫病监测和疫病防控的关键。此系统通常包括定期的疫情监测、快速诊断方法的开发和应用，以及与兽医机构的密切合作。首先，定期的疫情监测是早期警报系统的基础。通过对猪群的定期检查和样本采集可以及时获取疫情信息，包括病例数量、症状表现、病原体检测情况等。这些数据的收集和分析可以揭示潜在的疫情趋势和风险，为制定针对性的防控策略提供依据。其次，快速诊断方法的开发和应用是早期警报系统的重要组成部分。传统的疾病诊断方法通常需要耗费较长的时间，而在动物疫病防控中时间至关重要。因此，研发和使用快速诊断方法（如PCR技术、ELISA等）可以迅速确定病原体的存在，并在早期及时识别疫情，这样可以加快对疫情的响应速度，减少疫情扩散风险。最后，与兽医机构的密切合作是确保早期警报系统有效运作的关键。兽医机构拥有专业的知识和经验，可以提供技术支持、指导和培训，帮助建立和维护监测系统，并对疫情发展进行及时评估和报告。通过与兽医机构的合作可以形成一支强大的防控团队，共同应对猪疫病的威胁。

三、结语

在生猪疫病诊断和综合防治中，准确的诊断方法和科学的防治技术起着关键作用。PCR、ELISA和病毒分离等诊断方法能帮助确定疫病的存在和病原体的类型，为疫情监测和控制提供了重要依据。疫苗接种、环境卫生管理、动物运输管理和生物安全措施等综合防治技术可以有效预防猪疫情的发生和传播，保护猪只健康和养殖业的稳定发展。病原体的变异和新型病毒的出现使疫情监测和诊断变得更加复杂。同时，疫苗的研发和推广也需要不断的科研投入和技术创新。因此，加强生猪疫病的研究与合作，提高疫情监测和防控能力，推动疫苗研发和应用是保障猪只健康和养殖业可持续发展的关键。未来，我们需要进一步加强生猪疫病的国际合作与信息共享，共同应对全球范围内的疫情挑战，不断完善诊断方法和防治技术，保障猪只健康和养殖业的可持续发展。