杠柳毒苷理化性质研究

赵美玲，李哲肖，冷志爽，赵莺歌

（1. 天士力控股集团有限公司天士力研究院，天津 300410；2. 石家庄以岭药业股份有限公司，河北 石家庄050035）

杠柳毒苷为香加皮中一种具有甾核和不饱和五元内酯环结构的甲型强心苷，具有强心利尿[1]、抗肿瘤[2]、抗炎、免疫调节[3]等药理作用。其强心作用与其他甲型强心苷类成分一样可选择作用于心脏，有加强正性肌力作用，可增加心肌收缩力，减慢心率，相对于洋地黄毒苷和地高辛等强心苷类成分，具有治疗窗较宽、起效迅速，持续时间短，无蓄积等优势[3]。近年来，均以复方的形式治疗慢性充血性心力衰竭，自 2005 版起《中国药典》中已注明“香加皮有毒，服用不宜过量”[4]，香加皮毒性反应主要表现为强心苷中毒症状[5]，而杠柳毒苷为香加皮强心的主要有效成分，以单体形式入药。规范香加皮的药量，可保障临床用药的安全有效。有研究[6]表明，杠柳毒苷口服存在显著的肝肠循环，且在肠道内会被肠道菌群大量代谢为毒性更强的杠柳次苷，从而限制了其口服制剂的应用，所以，临床亟需开发新剂型。本文旨在考察杠柳毒苷原料药的理化性质的探索，为制剂开发提供参考思路及技术支持，加快产品研发历程。

1 仪器与材料

MSA/125P-CE 型和 BS200S-WEI 型天平（Sartorious 公司）；S220-R-CN 型 pH 计（Mettler Toledo 公司）；e2695-2998 型高效液相色谱仪（PDA，Waters 公司）；HPP750 型和 ICH260L型恒温恒湿箱（Memmert 公司）。

磷酸二氢钠（AR）、氢氧化钠（AR），均为国药集团化学试剂有限公司产品；无水磷酸氢二钠（AR）、盐酸（AR）、三水醋酸钠（AR）、冰醋酸（AR），均为天津市科密欧化学试剂有限公司产品；乙腈（HPLC）、甲醇（HPLC），均为默克集团产品；杠柳毒苷（97.2%，石家庄以岭药业股份有限公司自提）；对照品杠柳毒苷（93.8%，批号 111793-200901，中国食品药品检定研究院）；杠柳次苷（93.8%，批号 111793-200901）、杠柳苷元（93.8%，批号 111793-200901）均购自中国科学院成都生物研究所；其他试剂（国产分析纯，市售）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

含量色谱条件：色谱柱：C18 色谱柱（250 mm × 4.6 mm, 5 μm），流动相：乙腈—水（26 :74），检测波长：350 nm，流速：1.0 mL·min-1，柱温：30℃，进样盘温度：4℃，进样量：10 μL；检测波长：220 nm。典型色谱图见图 1。

Fig. 1 The typical chromatogram of the content of periplocin solution图 1 杠柳毒苷溶液的含量典型色谱图

有关物质色谱条件: 色谱柱：C18 色谱柱（250 mm × 4.6 mm, 5 μm），流动相：乙腈—甲醇—水（27 : 10 : 63），检测波长：220 nm，流速：1.0 mL·min-1，柱温：30℃，进样盘温度：4℃，进样量：10 μL。典型色谱图见图 2。

Fig. 2 The related substances typical chromatograms of periplocin solution图 2 杠柳毒苷溶液的有关物质典型色谱图

2.2 杠柳毒苷溶解度考察

参考《中国药典》2020 版四部通则 8004 中配制方法配制了不同 pH 值溶液[7]，对杠柳毒苷在不同 pH 溶液中的溶解度进行测定，并绘制了原料药溶解度曲线，考察结果见表 1，原料药的溶解度曲线见图 3。

Table 1 The solubility of periplocin in different pH media表 1 杠柳毒苷在不同 pH 溶液中的溶解度

Fig. 3 The solubility curves of periplocin in different pH media图 3 杠柳毒苷在不同 pH 介质中的溶解度曲线图

2.3 杠柳毒苷引湿性考察

依据《中国药典》2020 版四部通则 9103 药物引湿性试验指导原则[8]，盐杠柳毒苷引湿增重等于 6.32%，具有引湿性。

2.4 杠柳毒苷在不同条件下的稳定性考察

分别将样品放置于高湿（25℃/RH 75%、25℃/RH 92.5%）、高温高湿（60℃/RH 75%）、加速（40℃/RH 75%）和强光照射（总照度不低于 1.2×106Lux·hr）条件下，5、10、15 天后分别取样测定含量和有关物质，并与 0 天数据进行比较，结果如表 2 所示。

Table 2 The stability of periplocin in different conditions表 2 杠柳毒苷在不同条件下的稳定性

为了更加全面了解影响杠柳毒苷稳定性的因素，进行了酸碱氧化降解的降解试验，试验结果见表 3。

Table 3 The stress degradation test results of periplocin表 3 杠柳毒苷的强制降解试验结果

2.5 杠柳毒苷溶液的渗透压及 pH 值考察

测定了 0.1 mg·mL-1的杠柳毒苷溶液的渗透压为 1.0 mosmol·kg-1，pH 值为 3.86。

2.6 不同 pH 介质的溶液稳定性考察

考察了 pH 值范围为 1.0～10.0 内杠柳毒苷溶液在 60℃ 条件下的稳定性情况，考察结果见表 4。

Table 4 The stability of periplocin in different pH media at 60℃表 4 不同 pH 值杠柳毒苷溶液在 60℃ 条件下的稳定性

2.7 离子相容性考察

准确移取 5 份 8 mL 的 1 mg·mL-1杠柳毒苷溶液于量瓶中，分别加入 2 mL 0.5mg·mL-1的AlCl3、FeCl3、CaCl2、CuSO4、MgSO4溶液于量中震荡混匀，放 60℃ 条件下考察工业生产中常见 5 种金属离子与杠柳毒苷的相容性情况，考察结果见表 5。

Table 5 Effects of different metal ions on the stability of periplocin solution表 5 不同种金属离子对杠柳毒苷溶液稳定性的影响

3 讨论

对于创新药物来说，剂型的选择在新药研发中是非常重要的方面，以尽可能的降低化合物的毒性，提高疗效为指标.剂型选择应根据药理、毒理和临床等方面的研究结果，并结合化合物的性质综合考虑确定，结合强心苷类的常用给药方式及杠柳毒苷的药理学特性，建议杠柳毒苷剂型开发优先选择注射给药。

杠柳毒苷因具有治疗窗较宽、起效迅速，持续时间短，无蓄积的特点，在治疗心衰方面具有优异的临床价值。现有大量的文献报道，杠柳毒苷的药理学性质，鲜有文字报道其理化性质，而理化性质是制剂开发前的重点研究内容。本文重点考察了原料药的溶解度、引湿性、稳定性，试验结果表明，杠柳毒苷原料药在各 pH 水介质均属于微溶，且溶解度存在一定的 pH 值依赖性，为后续非口服制剂规格的选择提供了依据；杠柳毒苷具有引湿性，为后续其贮藏保存提供了依据；杠柳毒苷在高温、高湿、酸的条件下均不稳定，在氧化、强碱及光照条件下较为稳定；金属离子影响溶液的稳定性，可为后续制剂处方开发提供科学的参考思路及技术支持，加快产品研发历程。