宫颈癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平与细胞凋亡指数相关性的研究

吴 倩,张 微,方呈祥

(湖北民族大学附属民大医院,湖北 恩施 445000)

宫颈癌是常见的女性生殖器官恶性肿瘤,其发生发展与人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染、免疫抑制、性生活过早、性伴侣过多、生育年龄过早、生育次数多等多种因素密切相关[1-2]。宫颈癌患者临床表现为阴道异常流血,白色或血性、水样或米泔水样有腥臭味的阴道排液等,其严重影响患者的正常生活[3-4]。另外,宫颈癌患者早期症状并不明显,待患者自觉症状明显入院检查时病情已发展至中晚期,治疗效果不佳,预后较差。目前,宫颈癌的发病率和死亡率逐渐增加,使患者的生命受到了严重地威胁,对宫颈癌的防范与治疗也带来了巨大挑战。鳞状细胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC)是临床上常用的宫颈癌辅助诊断标志物[5];糖链抗原125(carbohydrate antigen125,CA125)也是近年来肿瘤研究领域的热点[6],其可作为肿瘤标志物用于宫颈癌的诊断及预后评估[7];可溶程序性死亡分子1(programmed death ligand-1,PD-L1)与肿瘤免疫逃逸和耐受密切相关[8]。细胞凋亡在肿瘤的发生发展及转归中均发挥着重要作用[9],细胞凋亡指数可作为宫颈癌潜在的诊断指标[10]。本研究比较了宫颈癌患者与健康妇女的血清SCC、CA125及PD-L1水平及细胞凋亡指数,并分析了宫颈癌患者不同临床病理特征血清SCC、CA125及PD-L1水平的变化情况及其与细胞凋亡指数的相关性,为临床宫颈癌的治疗提供参考依据。

1 研究对象与方法

1.1 研究对象

选取2020年10月至2022年2月在湖北民族大学附属民大医院就诊的76例宫颈癌患者为实验组。纳入标准:①患者均经过阴道活检、病理检查等确诊为宫颈癌;②均为首次确诊;③未进行过相关治疗;④临床资料完整。排除标准:①伴有其他恶性肿瘤;②自身免疫系统疾病;③严重的心肺肝肾功能不全;④伴有其他宫颈类疾病。另选同时期来院进行体检的76例健康女性为对照组。实验组的年龄为33～71岁,平均年龄(52.50±8.62)岁;对照组的年龄为31～72岁,平均年龄(53.55±9.15)岁,两组的年龄比较差异无统计学意义P>0.05)。

本研究经我院医学伦理委员会批准(编号:20200208),患者及家属知情同意。

1.2 方法

1.2.1血清SCC和CA125及PD-L1水平的测定

收集实验组患者入院次日及对照组体检者的清晨空腹静脉血5mL,保存于EDTA抗凝管,静置30～120min,以3 500r/min离心15min,分离上层血清,通过全自动电化学发光免疫分析仪及配套试剂盒检测血清SCC、CA125、PD-L1水平。

1.2.2细胞凋亡指数的检测

采用流式细胞术检测细胞凋亡指数。实验组取宫颈癌组织、对照组取正常宫颈组织,浸于磷酸盐缓冲液,剪碎过筛,制成单细胞悬液,浓度为1×106/mL,取1mL单细胞悬液,离心、弃上清,加1mL磷酸盐缓冲液,离心、弃上清,预冷的70%乙醇固定细胞,于4℃冰箱过夜。次日离心、弃上清,磷酸盐缓冲液漂洗,加Pnase合成期酶37℃作用30min,加50μg/mL碘化丙啶1mL,4℃避光染色20min,过滤,CELLQUEST软件计算细胞凋亡指数。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 两组血清SCC、CA125及PD-L1水平的对比

实验组的血清SCC、CA125及PD-L1水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),见表1。

表1 两组血清SCC、CA125及PD-L1水平的比较

2.2 两组细胞凋亡指数的对比

实验组的细胞凋亡指数为(6.87±2.89),对照组的凋亡指数为(2.44±0.56),实验组的细胞凋亡指数高于对照组(t=13.132,P<0.001)。

2.3 宫颈癌患者不同临床病理特征血清SCC、CA125及PD-L1水平的对比

临床分期为Ⅲ～Ⅳ期宫颈癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平均高于Ⅰ～Ⅱ期者(P<0.05);肿瘤分化程度为高分化宫颈癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平均高于中分化者,且中分化者均高于低分化者(P<0.05);淋巴结转移宫颈癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平均高于淋巴结未转移者(P<0.05);不同病理分类宫颈癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平比较差异均无统计学意义P>0.05),见表2。

表2 宫颈癌患者不同临床病理特征血清SCC、CA125及PD-L1水平的比较

2.4 宫颈癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平与细胞凋亡指数的关系

宫颈癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平均与细胞凋亡指数呈正相关(r值分别为0.689、0.662、0.495,P<0.001),各散点图均由左下角区域分布到右上角区域,见图1。

图1 宫颈癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平与细胞凋亡指数相关性散点图

3 讨论

宫颈癌是女性中常见的生殖系统恶性肿瘤,近年来其发病率及病死率有所增加,对女性的身体健康和生命安全造成了极大的威胁[11]。早期宫颈癌患者的临床表现及体征并不明显,且不具备特异性,待症状明显已进展为浸润癌,此时肿瘤细胞突破基底膜,侵入血管、淋巴管,易发生淋巴结血行转移,治疗效果不佳,预后较差[12]。因此,探索与宫颈癌病情相关的指标并分析其与临床病理特征的关系对早期宫颈癌的诊断及防治具有参考意义。目前,随着医疗技术的进步与生物、免疫学的发展,血清学指标检测以操作简便、用时较短成为重要的检查手段,已广泛应用于癌症的监测中,参考价值较高。本研究对比了宫颈癌患者与健康妇女血清SCC、CA125及PD-L1水平及细胞凋亡指数,并观察了不同临床病理特征宫颈癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平的变化情况,分析了血清SCC、CA125及PD-L1水平与细胞凋亡指数的关系,为宫颈癌的早期诊断及治疗提供参考依据。

3.1 血清SCC和CA125及PD-L1水平与宫颈癌的关系

SCC是存在于口腔、肺、子宫、子宫颈等鳞状上皮细胞的细胞质中的一种抗原,其分泌、合成与机体内的鳞癌细胞密切相关,能够调控细胞凋亡过程,还参与细胞外基质降解及癌细胞转移、侵袭等过程[13]。相关研究指出,鳞状细胞发生恶性改变时,SCC的基因表达与调控出现异常改变,蛋白质的合成也受到干扰,引起SCC基因活化,使其分泌与合成大量增加,从而出现SCC异常高表达[14]。CA125是与卵巢癌诊断相关的一种大分子糖蛋白,其表达水平在卵巢癌的早期诊断、病情监测及预后评估中具有重要意义。有研究表明,在子宫内膜、宫颈内膜、输卵管等机体组织中均检测出CA125,另外,约有半数以上的宫颈癌患者存在血清CA125水平异常升高,且其水平变化与临床分期及淋巴结转移也密切关联[15]。宫颈癌的发病与免疫逃逸及免疫监视功能减弱存在密切相关性,PD-L1与宫颈癌的发病、病情进展存在密切联系。PD-L1属于协同抑制因子,在多种细胞中表达,其与T细胞抑制信号密切相关,能够降低患者体内抗肿瘤免疫反应,协助肿瘤细胞进行免疫逃逸,促进肿瘤发展[16]。有研究表明,宫颈癌伴有PD-L1异常高表达[17]。本研究通过电化学发光法测定宫颈癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平发现,宫颈癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平均高于健康女性,提示血清SCC、CA125及PD-L1水平与宫颈癌的发病密切相关。

3.2 血清SCC和CA125及PD-L1水平与细胞凋亡指数的关系

细胞凋亡是细胞的一种基本生物学现象,其在内环境的稳定中发挥着重要作用,在癌症患者体内,细胞凋亡对肿瘤的发展、治疗同样发挥着重要作用[18]。本研究进一步检测两组的细胞凋亡指数,结果显示,与对照组相比,实验组的细胞凋亡指数显著增加,表明宫颈癌的发病与细胞凋亡水平有关。随着病情严重程度的进展,细胞凋亡指数发生改变,破坏了宫颈上皮细胞原有的平衡,导致病情加重。本研究又进一步检测了宫颈癌患者不同临床病理特征的血清SCC、CA125及PD-L1水平,并分析其与细胞凋亡指数的关系,结果显示,伴有临床分期加重、肿瘤分化程度增加、出现淋巴结转移的宫颈癌患者,其血清SCC、CA125及PD-L1水平增幅更大(P<0.05),而不同病理分类(鳞状细胞癌与腺癌)的血清SCC、CA125及PD-L1水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);另外,宫颈癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平均与细胞凋亡指数呈正相关,提示血清SCC、CA125及PD-L1水平可能与宫颈癌的进展有关,临床可将其作为监测、诊断及治疗宫颈癌的参考指标。

但本研究也存在一定的局限性,一方面,患者来源单一且样本数较少,研究结果缺乏广泛性;另一方面,关于血清SCC、CA125及PD-L1水平的变化与宫颈癌进展相关的机制通路尚不清楚,因此仍需进一步研究探索。

综上所述,宫颈癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平显著升高,与临床分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移密切关联,且与细胞凋亡指数均呈正相关,提示临床上可将血清SCC、CA125及PD-L1作为对宫颈癌早期诊断和治疗的重要检测指标。