溃疡性结肠炎患者血清Elabela，LRG1水平表达与疾病活动指数的相关性研究

王 燕，胡秀娟，张 丽，吕竹洁，王 龙，仝高成（运城市中心医院 .消化内科；.消化内镜室，山西运城 044000）

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是临床常见的炎症性肠病，该病病程长且易反复发作，不仅可导致累积性肠道损伤，引起心肌梗死、中风等并发症，且具有潜在癌变风险，尤其是在疾病活动期间[1]。UC 发病机制尚不明确，目前认为肠道上皮血管通透性增加和肠屏障损伤与UC 的发生相关[2]。Elabela 是维持血管功能的重要调节因子，具有抗凋亡、抗炎和抗氧化作用，被认为是预测血管损伤的潜在指标[3]。富亮氨酸α2 糖蛋白1（leucine-rich α2 glycoprotein 1，LRG1）是一种50 kDa 的糖蛋白，含有富含亮氨酸基序的重复序列，在白细胞介素（interleukin，IL）-22，肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α，IL-1β 等刺激下，在神经细胞、肝细胞、中性粒细胞、巨噬细胞和肠上皮细胞等细胞中表达升高，参与血管生成，与关节炎、感染、心力衰竭等多种疾病有关[4-5]。Elabela和LRG1 在UC 的报道并不多见，鉴于此，本研究检测UC 患者血清Elabela，LRG1 水平，探讨两者与UC 疾病活动指数的相关性，以期为临床诊治提供参考。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取2022年1～12月运城市中心医院收治的98 例UC 患者为UC 组，其中男性55 例，女性43 例，年龄32～43（36.62±2.85）岁，体质量指数21～23（22.15±0.63）kg/m2。纳入标准：①符合《溃疡性结肠炎诊疗指南》[6]中诊断标准；②行结肠镜检查，内镜评估内容和黏膜病理学资料完整；③年龄＞18 岁。排除标准：①急性或慢性肝病；②并发或既往慢性免疫介导性炎症疾病（炎症性肠病除外）、既往结肠切除术史、活跃侵蚀性胃肠黏膜疾病；③正在接受任何形式的UC 治疗；④妊娠患者。参考《溃疡性结肠炎诊疗指南》[6]，根据黏膜病理学检查结果将UC患者分为活动期组（n=62）和缓解期组（n=36）。根据病情严重程度将UC 患者分为轻度组（n=26）、中度组（n=43）和重度组（n=29）。另选择收治的51 例结肠息肉患者为对照组1，体检中心体检健康的50 例志愿者为对照组2。对照组1 中男性29 例，女性22 例，年龄30～41（36.01±2.71）岁，体质量指数20～23（22.01±0.60）kg/m2。对照组2 中男性28 例，女性22 例，年龄31～45（36.72±2.49）岁，体质量指数20～23（22.06±0.57）kg/m2。三组性别、年龄、体质量指数比较，差异均无统计学意义（F/χ2=0.010，1.023，0.685，均P＞0.05）。本研究经运城市中心医院伦理委员会批准，并获得所有研究对象的知情同意。

1.2 仪器与试剂 XE-2100 全自动血细胞分析仪（日本Sysmex 株式会社），ESR40 全自动动态血沉分析仪（济南博坤科学仪器有限公司），Multiskan FC 全自动酶标仪（美国赛默飞公司），Elabela 试剂盒（上海语纯生物科技有限公司），LRG1 试剂盒（上海研启生物科技有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 内镜分级、黏膜愈合情况评估：根据内镜活动指数（endoscopic activity index，EAI）[7]对患者进行评分，其中造粒散射反射光：是记0 分，否记2 分；血管分型：正常记0 分，扭曲记1 分，缺失记2 分；黏膜出血：无记0 分，接触性出血记2 分，自发性出血记4 分；黏膜病变：主要包括黏液、渗出物、糜烂、溃疡等，无记0 分，轻度记2 分，显著记4 分。总分0～12 分，0～3 分为正常[8]，分值越高表示疾病活动性越强。本文根据EAI 将UC患者分为Ⅰ级组（4～6 分，n=25）、Ⅱ级组（7～9分，n=40）和Ⅲ级组（10～12 分，n=33）。所有UC 患者接受氨基水杨酸类抑制剂、糖皮质激素或免疫抑制剂治疗后再次接受内镜检查。根据内镜下黏膜愈合情况将患者分为愈合组（n=65 例）和未愈合组（n=33）。

1.3.2 实验室指标检测：采集所有受试者入组当日空腹静脉血7ml，取2ml 采用全自动血细胞分析仪检测血红蛋白水平，另取2ml 采用全自动动态血沉分析仪检测红细胞沉降率（ESR）水平。取3ml 经离心后（3 000r/min，5min）分离血清，-80℃保存待检。应用酶联免疫吸附试验检测血清Elabela 及LRG1 水平，具体操作根据试剂盒说明进行。

1.4 统计学分析 采用SPSS 25.00进行数据分析。计量资料符合正态分布以均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用独立样本t检验，三组间比较采用单因素方差分析。计数资料以率（%）表示，组间比较采用χ2检验。Pearson 法分析UC 患者血清Elabela 及LRG1 水平与EAI，HB，ESR 的相关性。受试者工作特征曲线（receiver operator characteristic curve，ROC）分析血清Elabela，LRG1 及联合检测对内镜下黏膜愈合的预测价值。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组血清Elabela，LRG1 表达水平及HB，ESR水平比较 见表1。UC 组血清Elabela，LRG1 和ESR 水平高于对照组1 和对照组2，HB 低于对照组1 和对照组2，差异具有统计学意义（t=11.410，12.269；39.000，38.194；15.065，15.483；7.192，7.412，均P＜0.05）。

表1 三组血清Elabela，LRG1 表达水平及HB，ESR 水平比较（±s）

项 目UC 组（n=98）对照组1（n=51）对照组2（n=50）F 值P 值Elabela（ng/ml）4.77±1.362.51±0.532.35±0.42132.2890.000 LRG1（ng/ml ）352.12±39.45121.02±21.06120.35±23.491 304.2430.000血红蛋白（g/L）102.35±10.93115.32±9.43116.15±10.2741.2430.000 ESR（mm/h）28.35±6.4913.65±3.4913.02±3.6598.9870.000

2.2 活动期组和缓解期组血清Elabela，LRG1 水平比较 活动期组血清Elabela（5.26±0.54ng/ml），LRG1（370.42±12.49ng/ml）水平高于缓解期组（3.93±0.42ng/ml，320.60±8.47ng/ml），差异具有统计学意义（t=12.705，21.242，均P＜0.05）。

2.3 不同病情严重程度患者血清Elabela，LRG1 水平比较 见表2。重度组血清Elabela，LRG1 水平高于中度组和轻度组，差异有统计学意义（t=10.751，35.077；3.205，11.771，均P＜0.05），中度组血清Elabela，LRG1 水平高于轻度组，差异有统计学意义（t=4.130，7.625，均P＜0.05）。

表2 不同病情严重程度患者血清Elabela，LRG1 水平比较（±s）

表2 不同病情严重程度患者血清Elabela，LRG1 水平比较（±s）

项 目轻度组（n=26）中度组（n=43）重度组（n=29）F 值P 值Elabela（ng/ml）3.95±0.214.51±0.675.89±0.20127.9360.000 LRG1（ng/ml）3 25.65±10.14356.12±18.75369.92±16.5953.2870.000

2.4 不同内镜分级患者血清Elabela，LRG1 水平比较 见表3。Ⅲ级组血清Elabela，LRG1 水平高于Ⅱ级组和Ⅰ级组，差异有统计学意义（t=19.466，48.725；3.854，8.710，均P＜0.05），Ⅱ级组血清Elabela，LRG1 水平高于Ⅰ级组，差异有统计学意义（t=8.447，8.812，均P＜0.05）。

表3 不同内镜分级患者血清Elabela，LRG1 水平比较（±s）

表3 不同内镜分级患者血清Elabela，LRG1 水平比较（±s）

项 目Ⅰ级组（n=25）Ⅱ级组（n=40）Ⅲ级组（n=33）F 值P 值Elabela（ng/ml）3.86±0.164.49±0.355.80±0.18434.8140.000 LRG1（ng/ml）324.15±8.71355.46±16.34369.16±13.4777.9030.000

2.5 愈合组和未愈合组血清Elabela，LRG1 水平比较 未愈合组血清Elabela（5.12±0.42ng/ml），LRG1（367.12±14.27ng/ml） 水平高于愈合组（4.08±0.37ng/ml，322.57±10.35ng/ml），差异有统计学意义（t=12.043，15.917，均P＜0.05）。

2.6 UC 患者血清Elabela，LRG1 水平与EAI，HB，ESR 的相关性 UC 患者血清Elabela，LRG1水平与EAI，HB 呈正相关（r=0.602，0.298；0.576，0.302，均P＜0.05），与血红蛋白水平呈负相关（r=-0.351，-0.334，均P＜0.05）。

2.7 血清Elabela，LRG1 对内镜下黏膜愈合的预测价值 见表4 和图1。血清Elabela，LRG1 联合预测内镜下黏膜愈合的曲线下面积高于Elabela，LRG1单独预测，差异有统计学意义（Z=4.101，4.228，均P＜0.05）。

图1 血清Elabela，LRG1 预测内镜下黏膜愈合的ROC 曲线

表4 血清Elabela，LRG1 对内镜下黏膜愈合的预测价值

3 讨论

溃疡性结肠炎（UC）病因尚不明确，被认为与遗传、环境、黏膜免疫失调等有关。自进入21世纪以来，抗肿瘤坏死因子治疗显著改善了UC 的治疗结果，治疗目标从症状缓解转变为内窥镜下组织学愈合。结肠镜检查是评估UC 患者病情的金标准，但作为一种可对患者造成明显疼痛的侵入性检查，其仅适宜诊断，并不适合实时评估患者的肠黏膜病变。因此有必要探寻能够准确地评估UC 患者的肠黏膜情况的生物学标志物。研究报道，免疫反应失调，血管壁损伤和血管通透性增高在UC 的发病中起重要作用[9]。研究发现，UC 小鼠模型中可观察到结肠黏膜区血管周围水肿，提示UC 小鼠肠道内皮损伤，肠道血管通透性增加，肠屏障功能障碍[10]。结肠炎期间瞬时受体电位香草素4 通道激活，通过降低血管内皮钙黏素的表达，增加血管内皮通透性促进结肠炎症的发展[11]。血管通透性增加提示肠道上皮屏障功能障碍，通常与UC 风险增加和疾病活动性增加有关[9]。

血清Elabela 是一种含有32 个氨基酸的激素肽，被认为是Apelin 受体的第二内源性配体，广泛分布于不同的组织器官中，在血压控制、心脏形态发生、细胞凋亡、血管生成、细胞增殖、迁移等生理过程中发挥重要作用，与心功能障碍、心力衰竭、高血压、肾脏疾病、癌症和中枢神经系统疾病等病理状况有关[12]。Elabela 在未分化胚胎干细胞中高度表达，调控内胚层分化，在血管内皮细胞中也有表达，可趋化血管内皮细胞迁移和增殖分化，对正常血管发育至关重要[12]。现有研究显示Elabela 通过抑制IL-6/信号转导子与激活子3 信号通路和激活谷胱甘肽过氧化物酶4 信号通路，缓解血管紧张素Ⅱ诱导的心脏成纤维细胞增殖、迁移和氧化应激，抑制不良心肌重塑和纤维化[13]。Elabela 也是一种新的apelin 受体（apelin receptor，APJ）内源性配体，Elabela/APJ 轴通过抑制血管紧张素转换酶（angiotensin I converting enzyme，ACE）表达和血管紧张素II 信号通路，抑制ACE 2 水平预防压力过载诱导的高血压和心力衰竭[14]。Elabela 还可通过激活成纤维细胞生长因子21-ACE2 信号通路，抑制动脉外膜成纤维细胞凋亡，并缓解氧化应激和炎症反应，修复受损血管和维持血管正常功能[3]。临床报道显示，肢端肥大症患者血清Elabela 水平高于健康对照组，血清Elabela 水平与收缩压、N-末端B 型利钠肽原水平呈正相关，血清Elabela 水平是肢端肥大症患者早期心血管受累的标志[15]。本研究发现UC 患者血清Elabela 水平显著高于对照组1 和对照组2，且随着疾病活动、病情严重程度、内镜分级的增加而增加。推测Elabela 参与UC的机制为：Elabela 在血管损伤早期代偿性升高以促使血管内皮细胞迁移和增殖，促使新生血管形成，修复受损血管。随着UC 活动度增加和病情加重，Elabela 水平虽增加，但其血管保护的生物学作用减弱，继而引起血管损伤程度加重，通透性增加，导致肠道上皮屏障功能障碍和UC 病情进展。

富亮氨酸α2 糖蛋白1（LRG1）是富亮氨酸重复序列蛋白家族的重要成员，作为转化生长因子β（transforming growth factor-β，TGF-β） 上游重要信号分子，通过激活TGF-β 信号通路介导TGF-β 的生物学效应，比如LRG1 与TGF-β 受体结合激活下游smad1/5/8 通路，启动血管生成信号通路，LRG1 还与TGF-β 受体1/激活素受体样激酶5 结合形成复合物，调节T 细胞分化，促进内皮型一氧化氮合酶合成等，与感染、恶性肿瘤、免疫疾病、心血管疾病等发病有关[16-17]。现有研究显示克罗恩病患者血清LRG1 水平显著升高，且与内镜活动性增加有关[18]，提示LRG1 可能作为炎症性肠病的标志物。本研究发现UC 患者血清LRG1 水平显著增高，并与UC 活动期、病情加重以及内镜分级增加有关，血清LRG1 水平与EAI 分级呈正相关，表明LRG1 过度合成可能促使UC 活动性增加和病情加重。分析LRG1 参与UC 的机制为：内皮细胞调节血管张力、血管通透性和白细胞黏附，在维持血管稳态中起着重要作用，促炎细胞因子可诱导核因子-κB 活化，激活内皮细胞中LRG1 并迅速释放。LRG1 作为一种新型的血管生成调节因子，通过激活内皮细胞中TGF-β 及其下游Smad1/5/8 通路，发挥促血管生成作用，并介导单核细胞捕获、黏附和随后的跨内皮迁移[19]，与血管炎症损伤、通透性增加以及肠屏障功能障碍有关。另外LRG1 过度表达可促使肠上皮血管异常增生，增加癌变风险[20]。ROC 分析结果显示，血清Elabela，LRG1 水平可预测UC 内镜下黏膜愈合情况，联合两者检测预测效能更高，表明血清Elabela，LRG1 对临床疗效判断具有一定价值。

综上，UC 患者血清Elabela，LRG1 水平增高，且与UC 活动期、病情加重和内镜分级增加有关。血清Elabela，LRG1 可作为UC 疾病活动、病情严重程度、内镜下黏膜愈合评估的标志物，通过靶向Elabela，LRG1 可能为UC 治疗提供新的方向和思路。本研究不足之处在于样本例数较少，且为单中心研究，可能存在一定偏倚，仍需进一步扩大样本例数加以证实。