Sysmex XN系列血细胞分析仪与显微镜镜检对白细胞分类计数百分比检测中的对比分析

吴炳荣 上饶市鄱阳县疾病预防控制中心 （江西 上饶 333100）

内容提要：目的：评价Sysmex XN系列血细胞分析仪（仪器法）与显微镜镜检（镜检法）对白细胞分类计数的准确性，为临床标本检查的规范化提供依据。方法：选择90份用仪器法检测血常规结果出现白细胞分类计数有报警提示的标本，同时进行显微镜镜检（镜检法）复检，比较仪器法和金标准镜检法的结果。结果：送检的90例血清样本，有62例为真阳性，符合率为68.89%；28例呈现假阳性，假阳性率占31.11%。仪器法检测存在单核细胞假性升高，中性粒细胞假性减低现象。结论：Sysmex XN系列血细胞分析仪白细胞出现报警提示可以有效筛选阳性标本，但同时对阳性标本需要进行人工镜检复核，以避免假阳性结果。

随着医学技术不断发展，医疗器械更新换代也日趋频繁，血细胞分析仪也从最初的二分类、三分类发展到如今的五分类全自动血细胞分析仪。这些自动分析仪的投入使用，让可检验的项目种类更多、更全，用时也更短，检测结果也更精密和准确。也是因为这些自动分析仪的投入，临床中人工镜检的使用率明显降低。但实际上当人体外周血细胞发现病理改变时，尤其出现红细胞形态变化时，全自动血细胞分析仪对细胞形态改变不够精确。以Sysmex XN-1000型号为例，该设备是通过半导体激光流式细胞分析及核酸染色法对血细胞进行分析，但当人体内血液发生溶血、高胆红素血症、高脂血症、乳糜血等情况时，对仪器检测就会造成较大的影响，仪器显示的数值常会与真实数值存在较大差异，因此并不能完全摒弃人工镜检[1]。基于此，本文以SysmexXN-1000全自动血细胞分析仪为例，将其对白细胞五分类异常检测结果与人工镜检的结果进行对比分析，以评价SysmexXN-1000血细胞分析仪的临床诊疗价值。

1.资料与方法

1.1 一般资料

将上饶市鄱阳县莲湖乡中心卫生院检验科揽收的行血细胞计数检查样本作为研究对象，具体抽样方式为2021年10月1日～2021年10月30日每天都从XN-1000细胞分析仪选择3份提示白细胞分类报警信息的样本，连续30日共收集90例样本，样本收集处理后送至上饶市鄱阳县疾病预防控制中心检测。

1.2 试剂与仪器

仪器选择：希森美康生产SysmexXN-1000型血细胞分析仪，对应的试剂、质控品、校准品等均采用厂家配套；人工镜检光学显微镜选择奥林巴斯生产光学显微镜；希森美康SP-1000i推片仪的染色液为珠海BASO生物技术生产瑞士-吉姆萨染色液。

1.3 “报警信息”系统设置

SysmexXN-1000分析仪出现报警信息时一般分为可疑性信息及异常信息两种，对于可疑报警信息一般分析仪会对每个信息设置直方图，检验人员可通过直方图判断报警信息的真实性。通常每个报警指标的临界值设定为100，当某指标Q-flag值<100，提示阴性；若该指标Q-flag值为100～300则判断为阳性。Q-flag值越高，意味着可信度也更高[2]。白细胞相关报警信息主要包括散点图分布异常、白细胞计数升高或降低、中性粒细胞计数降低或升高、淋巴细胞计数升高或降低、单核细胞计数升高、嗜酸粒细胞计数升高、嗜碱粒细胞计数升高、未成熟粒细胞存在、核左移、异常淋巴细胞等。

1.4 方法

1.4.1 仪器法

血液采集后2h内进行检测，排除标本发生凝块、凝集、溶血等现象。具体方法如下：确认仪器状态良好，应用厂家配套校准品对一起进行校准，后保证SysmexXN-1000分析仪时刻处于工作状态并严格进行室内控制，在仪器工作正常前提下评价仪器的性能。

①空白计数：将SysmexXN-1000稀释液选作受检样本，在体液模式下连续3次对其进行化验，将每项检查最高值作为最终得到的检测结果数值。仪器出厂设置标准计数为：白细胞计数≤1×106/L，红细胞计数≤3×109/L。本研究将SysmexXN-1000稀释液当做受检样本，经反复三次检查后白细胞计数均提示为0，红细胞计数也一样为0，两项指标均显著低于厂商设定的标准值。因此，SysmexXN-1000血细胞分析仪空白计数值完全符合临床检测标准。

②连续3次检测证实仪器质控良好后应用Sysmex XN-1000分析仪对本次纳入研究的90个血清标本进行全血细胞分析。

1.4.2 手工法

纳入研究的90份血清标本均采用统一推片仪进行推片、染色，随后进行白细胞分类计数分析，将平均值作为计数结果。人工镜检由经验丰富的检验医师完成，具体操作流程严格按第四版《全国临床检验操作规程》进行，将血涂片进行白细胞分类并与全自动血细胞分析仪进行对比[3]。进行血涂片分析时，注意染色应深浅适宜，细胞展开良好、位置分布均匀，在血片体尾交接处。每张血涂片分类100个白细胞，取2张血片各类细胞均值，同时注意观察是否有幼稚细胞、异常淋巴细胞及其他异常细胞形态。显微镜下注意分辨是否有嗜碱性粒细胞（Basophils，BA）、嗜酸性粒细胞（Eosinophil，EO）、单核细胞（Monocyte，MO）、淋巴细胞（Lymphocyte，LY）以及中性粒细胞（Neutrophilicgranulocyte，NE）等各类异常细胞。人工显微镜分类复检：BA>1.5%、EO>6.5%、LY>65%、NE>85%以及2.0×109/L

1.5 统计学分析

所有数据均录入SPSS 21.0并进行统计学分析，检测结果进行配对样本t检验，P<0.05为有显著差异。

2.结果

2.1 白细胞分类仪器报警提示检测样本的镜检结果

90例样本中，62例真阳性，符合率为68.89%；28例假阳性，假阳性率为31.11%，见表1。

表1.白细胞分类仪器报警提示检测样本的镜检结果

2.2 白细胞分类仪器法与镜检法结果比较

本研究显示，仪器法检测存在单核细胞假性升高，中性粒细胞假性减低现象，见表2。

表2.白细胞分类仪器法与镜检法结果比较

3.讨论

血细胞分析是临床最常用的检验项目，对多种疾病诊断具有重要价值。白细胞计数和分类价值最高，尤其对血液系统疾病的诊断，对良恶性血液病的诊断及预后评估具有重要作用。不同的白细胞分类计数对应不同生理功能，不同诱发因素也可引发不同类型白细胞出现改变，比如细菌、病毒、真菌感染等。因此，及时完善血常规检查，明确各类白细胞计数及分类能够更真实反映患者机体处于生理还是病理情况。WBC分类及计数可能受许多影响因素感染，比如存在抗凝不充分、高脂血症、高蛋白血症、乳糜血、外周血内存在较多有核红细胞、巨大血小板或血小板病理性聚集等。传统人工镜检即检验医师用显微镜对血涂片中白细胞进行计数统计和人工分类，该检查比较繁琐，且依赖较大人力资源，近年来，随着各医疗机构对全自动血细胞分析仪的引进，已经越来越少应用人工进行镜检，尽管全自动血细胞分析仪能够大幅度降低血常规的检验压力，但在实际临床中其取得的结果准确性在特定情况下尚有争议。全自动血细胞分析仪具有操作简单、快捷、重复性高、精密度高等特点，被广泛用于各医疗机构检验科中。不过，不同仪器原理、不同厂家型号，各仪器间的检测结果也存在一定系统差异。而全自动血细胞分析仪对临床多种疾病诊断均有较高的价值，能够显著提高诊断效率和准确率，也是帮助医师尽早完成诊断和赢取宝贵救治时间的关键所在，因此也被广泛应用。XN-1000作为Sysmex系列产品中非常先进的技术模块颠覆了传统的全自动血细胞分析原理，同时具有流式细胞术及电阻抗双重计数原理，还能够依据客户检验需求进一步进行个性化设置，比如产品参数、处理速度、自动复检方式、试剂系统、摆放方式以及标本分类等[4,5]。不过，全自动血细胞分析仪在对各类细胞形态进行分析时，尤其是体内存在大量有核红细胞、异型淋巴细胞、幼稚细胞、原始细胞等进行分类时存在一定不足，如过度依赖仪器不做人工镜检就会造成漏诊甚至误诊，引发不必要医疗纠纷。并且，通过与核酸荧光染色、半导体激光、荧光染料染色等诸多技术手段相结合，SysmexXN-1000能够对血清中有形成分进行准确的定量分析。并且其检测结果也被证实比该公司XE系列产品更优越。SysmexXN-1000还贴心的设置了低值白细胞通道，因该通道模式中WBC计数是全血计数的3倍之多，因此再次通道模式下散点图中会有许多散点，这种模式检测低值白细胞时结果会更准确，也更方便检验人员对低值白细胞标本进行化验，会降低人工镜检的压力，提高临床诊断效率。战伟等研究指出[6-8]，全自动血细胞分析仪不仅可以对全血多种细胞进行计数统计，还可以通过设置低值血小板、白细胞通道等对低值结果进行反复重复复查，还可以对异常结果进行报警提醒，同传统人工计数及涂片复查对比，不仅更简单、快捷，还大幅度提高了PLT及WBC低值结果的检测准确度，显著优于过去的阻抗及光学检测分析仪。不过不管自动化还是人工智能发展如何完美，仍不能完全取代人工镜检在临床检验中的重要性，人工是智能不能替代的，需要将人工与自动化相结合，互为补充，这样才能更合理的对疾病和诊断进行判断[9]。

仪器的本底计数是整个检验结果的关键，一旦出现误差，会直接导致结果失真。本研究中仪器空白计数结果极低，白细胞及红细胞的检验数值均为0，完全能够满足临床检验需求。本研究结果也证实，当全自动血细胞分析仪出现报警提醒时，与人工镜检相比，中性粒细胞、单核细胞计数两组有显著差异；淋巴细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞、幼稚粒细胞等方面对比则没有明显差异。分析原因考虑白细胞出现报警提醒样本，多取样与恶性肿瘤正处于化疗或血液病患者，这类患者血清中存在较多的中毒颗粒，因此原始细胞、异常淋巴细胞等含量也相对较高，这时经溶血素处理后染色质疏松程度、胞浆颗粒、细胞体积与单核细胞有很高的相似度，自动分析仪可能会将这些细胞误判为单核细胞。最终从结果数值看，全自动血细胞分析仪得到的单核细胞计数要高于人工镜检法，中性粒细胞结果则与人工镜检对比明显偏低，镜检结果出现假阳性率31.11%。对于上述问题，最好的解决措施是将大量血液检测样本用仪器法筛除阴性标本，对阳性标本再进行人工镜下一一筛查。

SysmexXN-1000血细胞分析仪可以对血细胞进行精准的分类和计数，尽管其原理包含许多计数模块，但仍存在一定局限性，可能出现分类错误，比如将中心粒细胞误判呈单核细胞或嗜酸性细胞，异型淋巴细胞误判为单核细胞等。因血常规的结果最终是服务临床，帮助医生判断患者病情，因此结果真伪具有重要临床意义，所以，当临床检查时，发现阳性样本，应主动进行人工镜检以复查，必要时可再次采集标本。细胞形态是血常规检查的重要组成部分，将仪器与手工显微镜相结合是获取最真实结果的手段，也能够减少误诊和漏诊。

综上所述，Sysmex XN系列血细胞分析仪白细胞出现报警提示可以有效筛选阳性标本，但同时对阳性标本需要进行人工镜检复核，以避免假阳性结果。