四川省某生猪核心育种场2023年主要疫病的监测与分析

聂海波，邓 飞，李 丽，邱明双，陈依婷，陈弟诗*

（1.四川省南充市顺庆区芦溪畜牧兽医中心站，四川 南充 637000；1.四川省动物疫病预防控制中心，四川 成都 610041；3.四川农业大学，四川 成都 611130）

由于长期受种源疫病影响，四川省种猪利用率相对较低，各类新发、突发疫病仍然是制约生猪种业发展和养殖健康的头号问题。要从源头上阻断疫病在生猪产业链中的传播，就必须从种源疫病净化工作抓起。目前，我国要求开展非洲猪瘟（ASF）无疫区、无疫小区建设和主要动物疫病PRRSV、CSFV、PRV 的净化工作。为了解四川省生猪核心育种场的疫病净化工作实施情况，监测种猪疫病防控及免疫情况，增强疫情预警能力，本研究对某生猪核心育种场2023年不同群体种猪的90 份扁桃体和270 份血清进行了ASFV、PRRSV、CSFV、PRV 病原核酸、野毒及免疫抗体的检测，为该场及全省种猪疫病防控和净化提供参考。

1 材料与方法

1.1 样品来源 采集不同阶段猪群扁桃体样品共90 份，来源于不少于3 栋猪舍的猪只，其中种公猪20头，经产母猪45头（1～2胎15头，3～4胎15 头，5 胎次及以上15 头），后备猪25 头（不同体重）；采集血清样本270 份（血清包含扁桃体样本生猪对应的血清），其中种公猪70 份，后备种猪100 份，经产母猪100 份。扁桃体和血清样本于-20 ℃冷冻保存。各猪群均按常规程序免疫猪瘟疫苗和伪狂犬基因缺失疫苗，未免疫蓝耳病疫苗。

1.2 试剂 病毒DNA/RNA 提取试剂盒（磁珠法），购自西安天隆公司。病原核酸检测试剂：非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒，购自国生研公司；猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒双重荧光RT-PCR 检测试剂盒，购自世纪元亨公司。血清ELISA 检测试剂：非洲猪瘟阻断ELISA抗体检测试剂盒，购自青岛立见公司；猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA 检测试剂盒，购自ID.vet 公司；PRV-gE 和CSFV 抗体ELISA 检测试剂盒，购自美国IDEXX公司；PRV-gB抗体ELISA检测试剂盒，购自Biostoneah公司。

1.3 检测方法 90 份扁桃体样品经过组织破碎仪破碎后，使用全自动核酸提取仪和上述试剂盒提取病毒核酸，然后用上述实时荧光PCR（RT-PCR）检测试剂盒检测ASFV、CSFV 和PRRSV 病原核酸；270 份血清样本使用上述各ELISA 检测试剂盒进行ASFV、PRRSV、CSFV、PRV-gE、PRV-gB抗体检测。严格按照试剂盒使用说明进行病原核酸和抗体检测，并进行结果判定。

2 结果与分析

2.1 病原核酸检测 采用相应试剂盒对该场不同猪群的90 份扁桃体样本进行ASFV、PRRSV 和CSFV 病原核酸检测，结果显示ASFV、PRRSV 和CSFV三种病原核酸均为阴性（图1、图2）。

图2 CSFV和PRRSV双重荧光RT-PCR检测

2.2 抗体检测

2.2.1 ASFV 抗体 结果得出该场不同猪群270份血清样品的ASFV抗体均为阴性。

2.2.2 CSFV抗体 结果显示：该场不同猪群270份血清样品中，CSFV 抗体阳性样品有227 份，平均抗体阳性率为84.07%，种公猪、后备种猪、1～2胎次母猪、3～4 胎次母猪、5 胎次及以上母猪的CSFV 抗体阳性率分别为62.86%、95%、81.40%、91.30%、94.12%，离散度（CV）在16%～30%之间。不同猪群抗体平均阳性率从高到低依次为后备种猪＞5胎次及以上母猪＞3～4胎次母猪＞1～2胎次母猪＞种公猪（表1、图3）。可见该场CSFV免疫较好，抗体水平均达到农业农村部规定的70%合格线要求，但种公猪群体的抗体阳性率偏低、离散度较高，说明种公猪群的免疫整齐度较差，群体个体差异较大，CSFV免疫有待优化。

表1 不同阶段猪群CSFV抗体检测结果统计

图3 不同阶段猪群CSFV抗体水平

2.2.3 PRV-gE和PRV-gB抗体 结果显示：该场不同猪群270份血清样品中，PRV-gE（野毒）抗体均为阴性，种公猪、后备种猪、1～2胎次母猪、3～4胎次母猪、5胎次及以上母猪的PRV-gE抗体离散度分别为5.90%、8.29%、6.86%、6.55%、6.83%（表3），均较低；PRV-gB抗体阳性样品有253份，样品平均阳性率达93.70%，种公猪、后备种猪、1～2 胎次母猪、3～4 胎次母猪、5 胎次及以上母猪的PRV-gB 抗体阳性率分别为87.14%、93%、97.67%、100%、100%，离散度分别为19.78%、18.13%、9.35%、9.28%、9.46%（表2、图4）。可见该场各养殖阶段均无PRV 野毒感染，PRV 群体免疫抗体水平总体较好，整齐度高；不同胎次生产母猪的PRV-gB 免疫水平和整齐度也非常理想。

表2 不同阶段猪群PRV-gB抗体检测结果统计

表3 不同阶段猪群不同疫病抗体的离散度统计

图4 不同阶段猪群PRV-gB抗体水平

2.2.4 PRRSV 抗体 结果显示：该场不同猪群270 份血清样品的PRRSV 抗体均为阴性，种公猪、后备种猪、1～2 胎次母猪、3～4 胎次母猪、5胎次及以上母猪的离散度分别为14.78%、7.18%、5.50%、5.34%、5.48%（表3），都较低。该场未免疫过PRRSV疫苗，病原核酸和抗体检测也全为阴性，说明该场猪群未感染过猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒。

3 讨论与结论

3.1 讨论 自非洲猪瘟疫情发生以来，全国各地核心育种场都加大了生物安全防控手段和措施，农业农村部要求以种畜禽场为核心，以垂直传播性疫病和重大疫病为重点，深入开展疫病净化工作，推进畜禽种业振兴和畜牧业高质量发展。全国各地也积极推进生猪相关疫病净化工作，四川省兽医主管部门也非常重视，动物疫控系统以育种场为起点，指导核心育种场主动开展净化。从本次监测情况看，净化取得了切实成效，但CSFV、PRRSV、PRV 等疫病仍然是引起猪场繁殖障碍类、呼吸道类以及免疫抑制类疾病的核心病原，种猪场和规模化场仍存在感染。据2015～2019 年PRV 流行病学调查结果，5 年间均未发现PRV野毒感染，且gB抗体总阳性率为97.95%，免疫水平较好［1］。2019～2020年对四川省5个片区17个规模猪场进行PRV血清流行病学调查，结果得出PRV-gB 抗体总阳性率为84.51%，表明规模猪场PRV 总体免疫效果较好，但PRV-gE 抗体总阳性率为15.63%，哺乳仔猪、育肥猪和经产母猪群的野毒感染情况较严重［2］。

2011～2019 年对山东省16 个地市717 个规模猪场的22 465份血清样品进行CSFV抗体检测和分析，得出种猪场的场群免疫合格率达73.84%，个体合格率达77.54%，种猪场的免疫效果均优于商品代猪场［3］。对江苏四个地区22 家规模化猪场的妊娠母猪（497份样品）和保育仔猪（1 060份样品）血清进行检测，结果显示妊娠母猪CSFV 和PRRSV 的平均抗体阳性率分别为83.70%和85.11%，从整个猪群来看，该地区使用的疫苗及免疫手段均能发挥较好的免疫保护作用［4］。2018～2021年上海嘉定区2个规模猪场的CSF、PRRS、PR 免疫抗体平均合格率分别为84.7%、95.6%、95.9%，均超过了70%的国家合格线标准，表明CSF、PRRS和PR的免疫抗体水平良好，PR净化效果明显［5］。2015～2019年对湖南省5 个原种猪场的血清及扁桃体样品进行检测，结果显示：CSFV、PRRSV、HP-PRRSV、PRV 病原阳性率分别为0、2.1%、1.3%、9.5%；CSFV、PRRSV、PRV-gB 免疫抗体合格率分别为96.9%、99.7%、98.7%，表明这5 个原种猪场的CSFV、PRRSV、PRV抗体保护水平良好，但部分原种猪场仍存在不同程度的PRRSV、PRV 感染［6］。2015～2017年对国内2 012 个猪场的PRRSV 抗体进行监测，结果发现平均抗体阳性率逐年升高，由2015 年的75.6%逐步升至2017年的81.3%［7］。2021 年从湖北省7 个规模猪场疑似PRRSV 感染猪群以及所有种公猪群的3 324 份样品中检出PRRSV 阳性样品323 份，阳性率为9.72%［8］。因此，对CSFV、PRRSV、PRV等疾病的种源净化还需要加大多方面投入和力度。

3.2 结论 本次采样监测的生猪核心育种场已持续多年开展主要疫病净化工作，从病原核酸检测结果来看，公猪、妊娠母猪、后备猪、保育猪和仔猪阶段猪群均未发现ASF、CSF、PRRS、PR带毒情况；抗体检测结果显示ASF 和PRRS 抗体均呈阴性，表明该场从未感染过ASFV 和PRRSV。各阶段猪群的CSFV 和PRV-gB 免疫抗体平均阳性率达84.07%和93.70%，均超过了70%的国家合格线标准，表明该核心育种场的疫病综合防治措施到位，实施的净化方案可行，净化效果良好，无ASFV、PRRSV、CSFV感染，保持PRV和PRRSV阴性场。从不同阶段猪群的检测结果来看，该场3～4胎次母猪的CSFV、PRRSV、PRV三种主要疫病的抗体水平相对较高，离散度相对最低，表明该阶段猪群相对比较稳定；但公猪CSFV 和PRV抗体阳性率、平均阻断率均相对最低，各抗体离散度均最高，抗体整齐度较差，可根据实际情况合理优化和调整种公猪的免疫措施。该场作为核心育种场，需继续坚持定期的免疫监测，结合养殖情况和净化效果，做好生物安全等综合措施。

基于目前全国动物疫病形势，如ASFV 毒株多样性，PRRSV 不断变异，引种带来新的病毒如猪圆环病毒3、4 型（PCV3、4 型）、猪塞内卡病毒（SVA）、猪盖塔病毒（GETV）等，使阴性猪场感染压力不断增大。通过核心育种场疫病净化，有助于动物防疫工作者和养殖场找差距、补短板、堵漏洞、强弱项，从源头上减轻非洲猪瘟等重大动物疫病的防控压力，降低和阻断其他疾病传播风险，不断提高疫病风险防控水平，保障四川省生猪产业高质量发展。