酸枣仁-五味子药对抗焦虑药效及网络药理学机制分析研究△

刘洁，王晓玫，杨雪，石晋丽*，张建民

1.首都儿科研究所附属儿童医院，北京 100020；2.北京中医药大学，北京 102488

焦虑症是以焦虑为主要特征的神经症，表现为持续性的紧张、惊恐不安，并伴有自主神经功能紊乱及运动性不安等症状[1]。焦虑症的终身患病率最高，影响到全球30%人口的寿命[2-3]，随着生活节奏的加快，学习工作压力的增大，焦虑症已成为当今社会危害人类身体健康的主要疾病[4-5]，对焦虑症的治疗成为国际研究的热点。目前，化学药[包括苯二氮类药物和5-羟色胺（5-HT）再摄取抑制剂]为临床常用治疗药物，其疗效显著，但同时也存在诸多不良反应[6]。

中医将焦虑症归属于情志病、心脑病范畴，与中医的郁证、心悸、不寐、脏躁、惊恐等有关[7]。当代医家对焦虑症的治疗主要以肝心为主，可涉及脾肾[7-9]。中医药治疗焦虑症具有独特优势，还能避免出现使用抗焦虑化学药产生的不良反应[10]。中药复方配伍是中医药文化的精髓，而药对配伍则是复方的核心[11]。酸枣仁（Ziziphi Spinosae Semen）为鼠李科植物酸枣Ziziphus jujubaMill.var.spinosa（Bunge）Hu ex H.F.Chou 的干燥成熟种子，性平，味甘、酸，归肝、胆、心经，有养心补肝、宁心安神、敛汗、生津功能；五味子（Schisandrae Chinensis Fructus）为木兰科植物五味子Schisandra chinensis（Turcz.）Baill.的干燥成熟果实，性温，味酸、甘，归肺、心、肾经，主要功效为收敛固涩、益气生津、补肾宁心[12]。两者均始载于《神农本草经》[13]，收载于《中华人民共和国药典》2020 年版[12]，具有养心安神、收敛固涩之功效，符合“七情和合”的组合原理，作为相须药对常用于治疗失眠、健忘、焦虑等[14]。本课题组前期研究确定了酸枣仁-五味子药对（S-W，2∶1）配伍后的抗焦虑作用[15]，并对其作用机制进行了初探[14]。但其配伍前与配伍后抗焦虑作用机制仍需深入研究。因此，本研究利用束缚应激（RS）模型大鼠对酸枣仁、五味子配伍前后药效学进行评价，对大鼠脑内神经递质、脑源性神经营养因子含量进行测定；并运用网络药理学技术，对S-W 配伍后治疗焦虑症的关键靶点和信号通路进行预测，以期为S-W 治疗焦虑症的临床应用提供理论和实验依据。

1 材料

1.1 实验动物

无特定病原体（SPF）级雄性SD 大鼠36只，体质量150～170 g，购自斯贝福（北京）生物技术有限公司，动物许可证号：SCXK（京）2019-0010。饲养于北京中医药大学SPF 级动物实验中心，环境温度（20～22）℃，相对湿度为40%～60%，明暗节律12 h/12 h。实验前给予大鼠不受限制的标准饲料和洁净饮用水。动物实验方案由北京中医药大学伦理委员会审定，符合国家实验动物伦理相关规定，审核批准号为BUCM-4-2021032201-1027。

1.2 样品

炒酸枣仁产地河北邢台，购自河北安国药材市场，批号为20191022，经北京中医药大学石晋丽教授鉴定为鼠李科植物酸枣Ziziphus jujubaMill.var.spinosa（Bunge）Hu ex H.F.Chou 的干燥成熟种子。醋五味子产地辽宁，购自河北安国药材市场，批号为20190601，经北京中医药大学石晋丽教授鉴定为木兰科植物五味子Schisandra chinensis（Turcz.）Baill.的干燥成熟果实。

1.3 试药

0.9 %氯化钠注射液（石家庄四药有限公司，批号：2009222009）；磷酸盐缓冲液（PBS，武汉市皮诺飞生物科技有限公司，批号：PN0001）；大鼠5-HT 酶联免疫吸附法（ELISA）试剂盒（批号：MM-0442R2，48T）、大鼠多巴胺（DA）ELISA 试剂盒（批号：MM-0355R2，48T）、大鼠去甲肾上腺素（NE）ELISA 试剂盒（批号：JL-13428，48T）、大鼠γ-氨基丁酸（GABA）ELISA 试剂盒（批号：MM-0441R2，48T）、大鼠谷氨酸（Glu）ELISA 试剂盒（批号：MM-0601R2，48T）、大鼠促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）ELISA 试剂盒（批号：MM-0520R2，48T）、大鼠皮质酮（CORT）ELISA试剂盒（批号：MM-0559R2，48T）、大鼠脑源性神经营养因子（BDNF）ELISA 试剂盒（批号：MM-0209R2，48T）均购自江苏宝莱生物科技有限公司；地西泮（DZP，北京益民药业有限公司，批号：20150305）。

1.4 仪器

RT-6100型酶标分析仪（深圳雷杜生命科学股份有限公司）；大鼠旷场实验装置为北京中医药大学自制；ZH-DSG 型大鼠高架十字迷宫实验装置（安徽省淮北正华生物仪器设备有限公司）。

2 方法

2.1 样品提取

取炒酸枣仁30 g，置于1000 mL圆底烧瓶中，加8倍量80%乙醇浸泡30 min，第1次回流提取1 h，趁热抽滤；第2 次加10 倍量水回流提取1 h，趁热抽滤，合并两次滤液，浓缩，烘干，即得酸枣仁提取物浸膏。取醋五味子30 g，同法制备五味子提取物浸膏。取炒酸枣仁20 g、醋五味子10 g，混合后同法制备酸枣仁-五味子提取物浸膏。

2.2 动物模型制备与给药

将36 只大鼠随机分为空白组、模型组、DZP组、酸枣仁组、五味子组、S-W 合煎液组，每组6只。应用孤养结合RS 方法建立RS 焦虑大鼠模型。除空白组大鼠外，各组大鼠孤养，每笼1 只，每天上午将每只大鼠束缚于大鼠固定器内30 min，不压迫大鼠，仅使其活动受限，并禁食水，束缚完成后释放回笼，允许自由摄食饮水，不予任何干预，持续7 d。酸枣仁组按1.0 g·kg-1灌胃给药，五味子组按0.5 g·kg-1灌胃给药，S-W 合煎液组按1.5 g·kg-1灌胃给药（以上均为生药量，给药体积按10 mL·kg-1），DZP组按1.0 mg·kg-1灌胃给药，空白组和模型组灌服等体积的水。除空白组外，其他各组在灌胃给药后进行束缚造模。第7 天，酸枣仁组、五味子组、S-W 合煎液组、模型组、空白组末次给药1 h，DZP末次给药0.5 h 后，进行旷场实验（OFT）和高架十字迷宫实验（EPM）[14]。

2.3 行为学实验

2.3.1 OFT OFT 为考察动物焦虑样行为的经典实验[16]。旷场操作环境为灯光较暗的安静场所。旷场大小：长100 cm，宽100 cm，高50 cm，被均分为25 个方格，中间的9 个方格为旷场的中央区，其余为边缘区。实验时先将大鼠放置在空旷的环境中适应5 min，然后将其置于旷场的中央区，记录大鼠在旷场5 min内的活动情况。检测指标为大鼠在旷场中进入中央区的次数和停留时间（s）。

2.3.2 EPM EPM 由2 个开臂（长50.8 cm，宽10.2 cm）与2 个闭臂（长50.8 cm，宽10.2 cm）组成，距地面50 cm。开始测试前将每只大鼠放入1 个45 cm×30 cm×15 cm塑料盒中，任其自由探究，5 min后迅速置于EPM 的中央平台处，使其头部正对其中1 个开放臂，采用红外线技术记录5 min 内大鼠的活动情况。观测指标为进入开臂次数/总入臂次数的百分比（OE%）及开臂内运动时间/（开臂+闭臂）总时间的百分比（OT%）。

2.4 神经递质水平及BDNF的检测

行为学实验后麻醉大鼠，腹主动脉取血，并立即处死大鼠，于冰上迅速分离出大脑双侧海马区、前额叶皮质，称质量，-80 ℃冰箱冻存。血液样本4 ℃、15 000 r·min-1离心20 min（离心半径为15 cm），取上清液按照ELISA试剂盒进行CRH和CORT的含量测定；脑组织样本进行低温匀浆，4 ℃、15 000 r·min-1离心20 min（离心半径为15 cm），取上清液按照ELISA 试剂盒进行5-HT、DA、NE、GABA、Glu 和BDNF的含量测定。

2.5 网络药理学预测S-W抗焦虑机制

2.5.1 酸枣仁、五味子主要成分及靶点的筛选 应用中药系统药理学数据库和分析平台（TCMSP）[17]筛选酸枣仁、五味子的化学成分，筛选条件为口服生物利用度（OB）≥30% 及药物动力学（ADME）[18]参数药物相似性（DL）≥0.18[19]，同时根据文献补充酸枣仁、五味子中的化学成分；将检索到的化学成分进行整合并去重，得到最终化学成分。在PubChem（https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）数据库中获取化合物对应的SMILES结构，录入 SwissTargetPrediction（http://www.Swisstargetprediction.ch/）网站，对酸枣仁、五味子化学成分的潜在靶点进行预测。

2.5.2 焦虑症相关靶点的收集 应用GeneCards（https://www.genecards.org/）、TTD（http://db.idrblab.net/）、DisGeNET（https://www.disgenet.org/）及OMIM（https://www.omim.org/）数据库以“anxiety”为检索词获取relevance score≥10 的靶点。汇总整理去重，得到焦虑症对应靶点。

2.5.3 药物与疾病共同靶点的筛选 利用R语言软件（https://www.r-project.org/）及VennDiagram 2.1.0对S-W 化学成分对应的靶点和焦虑症的相关靶点取交集，得到两者的共同靶点，即S-W 治疗焦虑症的潜在作用靶点。

2.5.4 蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络构建与分析 将S-W 治疗焦虑症的潜在作用靶点输入String（https://string-db.org/cgi/input.pl）数据库[20]构建PPI 网络，限定物种为人，设置最小蛋白间相互作用分值为0.7，通过NetworkAnalyzer 工具进行拓扑分析，根据网络中基因与邻接基因的数目，找出网络的核心基因。

2.5.5 基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析 通过DAVID 数据库（https://david.ncifcrf.gov/）对S-W 治疗焦虑症的潜在靶点进行GO 富集分析和KEGG 通路富集分析，利用SangerBox（http://sangerbox.com/）平台对排名前20的通路进行可视化分析。

2.5.6 药物-活性成分-疾病-靶点-通路网络的构建 运用Cystoscape 3.8.0 软件[21]，将药物-活性成分-疾病-靶点-通路的网络关系可视化，进一步了解酸枣仁和五味子两味中药的活性成分与治疗焦虑症潜在作用靶点的对应关系。

2.6 统计学分析

采用GraphPad Prism6.0 软件对实验数据进行分析，利用单因素方差进行多组间比较，Tukey 检验进行两组间比较。各组数据均采用（）表示，P<0.05表示差异有统计学意义。

3 结果

3.1 药效学评价

3.1.1 OFT 结果 OFT 结果表明，与空白组相比，RS 可造成大鼠焦虑，与模型组相比，酸枣仁组、五味子组对大鼠进入中央区次数和中央区停留时间差异均无统计学意义，未显示出抗焦虑药效；S-W 在1.5 g·kg-1剂量下可明显增加RS 大鼠在旷场中进入中央区的次数及停留时间（P<0.05），见表1。

表1 酸枣仁、五味子单药及配伍后在OFT中对RS模型大鼠的抗焦虑作用（,n=6）

表1 酸枣仁、五味子单药及配伍后在OFT中对RS模型大鼠的抗焦虑作用（,n=6）

注：与空白组比较，#P<0.05，##P<0.01；与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01；表2、表3同。

3.1.2 EPM 结果 EPM 结果表明，与空白组相比，RS可造成大鼠焦虑，与模型组相比，S-W（1.5 g·kg-1）和酸枣仁（1.0 g·kg-1）组均可显著增加RS模型大鼠进入开臂次数百分比（P<0.01），五味子（0.5 g·kg-1）可明显增加RS模型大鼠进入开臂次数的百分比（P<0.05），见表2。

表2 酸枣仁、五味子单药及配伍后在EPM中对RS模型大鼠的抗焦虑作用（,n=6）

表2 酸枣仁、五味子单药及配伍后在EPM中对RS模型大鼠的抗焦虑作用（,n=6）

3.1.3 S-W 对RS 模型大鼠血清及脑内神经递质的影响 酸枣仁、五味子单药及配伍给药对RS模型大鼠双侧海马中5-HT、DA、NE、BDNF 含量影响结果表明，与空白组相比，RS 模型大鼠双侧海马中5-HT 和NE 含量都显著升高（P<0.01），DA 和BDNF含量显著降低（P<0.01）。与模型组相比，DZP 可显著降低RS 模型大鼠海马区5-HT 含量（P<0.01）和NE 含量（P<0.05）。酸枣仁可显著降低RS 模型大鼠海马区5-HT 和NE 含量（P<0.01），显著升高DA和BDNF含量（P<0.01）。五味子可显著升高RS模型大鼠海马区DA 含量（P<0.01）。S-W 配伍可明显降低RS模型大鼠海马区5-HT含量（P<0.05），明显增加DA（P<0.05）和BDNF 含 量（P<0.01），见表3。

表3 酸枣仁、五味子单药及配伍后对RS模型大鼠各指标含量影响（,n=6）

表3 酸枣仁、五味子单药及配伍后对RS模型大鼠各指标含量影响（,n=6）

酸枣仁、五味子单药及配伍给药对RS模型大鼠前额叶皮质中GABA、Glu、Glu/GABA 含量影响结果表明，与空白组相比，RS 模型大鼠前额叶皮质中GABA 含量显著下降（P<0.01），Glu/GABA 水平显著升高（P<0.01）。与模型组相比，DZP 可显著升高RS 模型大鼠前额叶皮质GABA 含量（P<0.01），可明显降低Glu/GABA水平（P<0.05）。酸枣仁可明显升高RS 模型大鼠前额叶皮质中GABA 含量（P<0.05），明显降低RS 模型大鼠Glu/GABA 水平（P<0.05）。S-W 配伍对RS 模型大鼠前额叶皮质中GABA 和Glu 含量、Glu/GABA 水平无显著意义，见表3。

酸枣仁、五味子单药及配伍给药对RS模型大鼠血清中CRH、CORT 含量影响结果表明，与空白组相比，RS 模型大鼠血清中CRH 含量明显升高（P<0.05）、CORT 含量显著升高（P<0.01），提示RS 模型大鼠的HPA 轴功能亢进。DZP 可明显降低RS 模型大鼠血清CORT含量（P<0.05）。酸枣仁可明显降低RS模型大鼠血清CRH 含量（P<0.05），显著降低RS 模型大鼠血清CORT（P<0.01）。五味子对RS 模型大鼠血清CRH 和CORT 含量变化无显著意义。SW 配伍对RS 模型大鼠亢进的HPA 轴的作用差异无统计学意义，见表3。

3.2 网络药理学分析结果

3.2.1 S-W的活性成分及治疗焦虑症的潜在靶点 通过检索TCMSP数据库（OB≥30%，DL≥0.18），得到酸枣仁6 个化合物，五味子7 个化合物，共13 个化合物，见表4。利用SwissTargetPrediction 平台预测出酸枣仁潜在靶点423 个，五味子潜在靶点449 个。通过GeneCards、TTD、DisGeNET 及OMIM 数据库收集去重，得到与焦虑症相关的1318 个作用靶点。R 语言软件对S-W 化学成分和焦虑症的相关靶点进行分析，获得148个治疗焦虑症的潜在作用靶点。

表4 酸枣仁、五味子的主要活性成分信息

3.2.2 共同靶点的PPI 网络构建 利用STRING 平台构建S-W 治疗焦虑症潜在靶点的PPI 网络，得到PPI 网络图，见图1。图1 中S-W 与焦虑症潜在靶点的PPI 网络中有148 个节点，1068 条边，平均degree值为14.4。通过NetworkAnalyzer进行拓扑分析，根据degree排序，选取分值>平均分的基因作为关键靶点，S-W 中筛选出66个关键靶点，分析前20个关键靶点中degree>25 的靶点发现，Akt丝氨酸/苏氨酸激酶1（Akt1）、肿瘤坏死因子（TNF）、钠依赖型5-HT转运蛋白（SLC6A4）、钠依赖型多巴胺转运蛋白（SLC6A3）、表皮生长因子受体（EGFR）、雌激素受体1（ESR1）、热激蛋白家族（HSP90AA1）、细胞周期蛋白D1（CCND1）、多巴胺受体D2（DRD2）、雷帕霉素激酶的机制靶点（MTOR）等可能是S-W治疗焦虑症的关键靶点。

图1 酸枣仁-五味子与焦虑共同靶点的PPI网络图

3.2.3 GO 富集分析 应用DAVID 对S-W 化学成分和焦虑症相关的148个潜在靶点进行GO 的生物过程（biological process，BP）、细胞组分（cell component，CC）、分子功能（molecular function，MF）富集，引用String 数据库，将校正P值<0.05的项目进行筛选。

S-W-焦虑症相关靶点总共富集到1700 条生物过程，111 项细胞组成相关，162 项分子功能相关。对排名前10 的GO 条目进行可视化处理，结果见图2。BP 主要包括膜电位调节、G 蛋白偶联受体信号通路、血液循环调节过程等；CC 主要涉及突触前膜、突触后膜等；MF主要涉及神经递质受体活动、G 蛋白偶联受体活动和配体门控离子通道活性等。

图2 酸枣仁-五味子与焦虑症相关靶点基因GO富集

3.2.4 KEGG 富集分析 在KEGG 通路富集分析中，得到103条通路（P≤0.001），利用SangerBox分析平台对前20 条信号通路进行可视化处理，结果见图3。通过分析KEGG 信号富集通路，发现S-W 配伍后，主要涉及神经递质配体-受体相互作用通路、钙信号通路、环磷酸腺苷（cAMP）信号通路、血清素神经突触、环磷酸鸟苷酸-环磷酸鸟苷酸效应蛋白激酶G（cGMP-PKG）信号通路等。结果表明S-W化学成分主要分布于多条代谢通路，通过它们之间的相互协调作用，发挥调控体内神经递质水平[22]和激素水平[23]作用来治疗焦虑症。

图3 酸枣仁-五味子与焦虑症靶点基因KEGG信号通路富集分析

3.2.5 药物-活性成分-疾病-靶点-通路网络构建 根据KEGG 富集分析得到的结果，筛选出与治疗焦虑症最相关的通路，并将其与酸枣仁、五味子活性成分和治疗焦虑症的潜在靶点导入Cytoscape 3.8.0，构建酸枣仁-五味子-活性成分-疾病-靶点-通路互作网络图，见图4。

图4 酸枣仁-五味子-活性成分-疾病-靶点-通路互作网络

图4为酸枣仁-五味子-活性成分-疾病-靶点-通路的可视化网络图，该网络包含13 种化学成分、148个作用靶点及20条重要通路。利用NetworkAanlyzer插件对网络中的成分进行分析，根据degree 值排序得到S-W 治疗焦虑症的化学成分主要为酸枣仁碱、当药黄素、胡萝卜甾醇、五味子乙素、五味子丙素、戈米辛A 等，这些成分作用的靶点有AKT1、TNF、SLC6A4、SLC6A3、EGFR、ESR1、HSP90AA1、CCND1、DRD2 等；这些靶点主要集中在神经递质配体-受体相互作用通路、含血清素神经突触信号通路、cAMP 信号通路、cGMP-PKG 信号通路等信号通路中。S-W 中的每个化学成分都对应着多个靶点及通路，进一步证明S-W 是通过多组分、多靶点的协同作用来治疗焦虑症。

4 讨论

焦虑症是一种常见的精神障碍性疾病，可损害患者的记忆、智能和社会活动功能，对其日常生活有较大影响。酸枣仁和五味子配伍具有明显的镇静、催眠作用，可以有效地改善睡眠。本研究在RS焦虑大鼠模型基础上，通过OFT 和EPM 两经典行为学实验验证了S-W 配伍前后治疗焦虑症的药效。进一步探究了S-W 对大鼠脑内神经递质，血清中CRH、CORT 的影响，这一结论在网络药理学分析中得到了验证。网络药理学结果显示，S-W 配伍后，其治疗焦虑症的关键靶点涉及148 个；关键通路包括神经递质配体-受体相互作用通路、含血清素神经突触信号通路、cAMP 信号通路、cGMP-PKG 信号通路，也有与激素调节相关的通路，如雌激素信号通路、促性腺激素分泌通路、催乳激素信号通路等。表明S-W 配伍后治疗焦虑症是通过多成分、多靶点的相互调节作用实现的。

4.1 S-W配伍后治疗焦虑症的关键靶点分析

通过网络药理学分析发现，酸枣仁、五味子配伍后靶点主要集中于Akt1、TNF、SLC6A4、SLC6A3、DRD2 等。Akt/蛋白激酶B 信号作用通道调控细胞生长和增殖，参与的细胞过程包括细胞凋亡和葡萄糖代谢。Akt 的激活需要PI3K 的活化，PI3K-Akt 通路在改善焦虑抑郁中具有重要作用[24]。TNF-α是一种具有多种生物学活性的细胞因子，具有杀伤肿瘤细胞、介导炎性反应、参与免疫调节、抑制脂蛋白脂质活性等作用[25]。相关研究显示，TNF-α与焦虑症相关[26-27]，其可通过下丘脑-垂体-肾上腺轴系统促进肾上腺皮质激素释放激素的释放，从而引起神经内分泌紊乱，促进焦虑抑郁的发生[28]。SLC6A4 基因可编码5-HT 转运体，SLC6A3 可编码多巴胺转运蛋白，在应激反应中，5-HT2A受体表达升高会增进动物焦虑和抑郁样行为，当其下调后症状明显减轻[29-30]。多巴胺能突触参与脑内DA 的合成，DA在愉快感觉的产生、传递及愉快信息的存储过程中发挥着重要作用。相应膜受体激活是DA 发挥作用的关键，DA 受体可分成DRD1 和DRD2 两类。当DRD2 被激活后，细胞内cAMP 水平降低，DRD2的表达明显升高不但抑制cAMP的产生而且也影响DA生成，进而导致抑郁焦虑的发生[31]。

4.2 S-W配伍后治疗焦虑症的关键通路分析

网络药理学研究显示，S-W 配伍后治疗焦虑症的关键通路主要集中在神经递质配体-受体相互作用通路、含血清素神经突触信号通路、cAMP 信号通路等信号通路中。神经递质配体-受体相互作用通路是酸枣仁、五味子配伍后最重要的通路，该通路与相应的受体结合后可参与机体的生理节律、情绪、学习和记忆等生物功能的调节，如与Drd5 受体结合，可参与认知、情感以及运动的调节，缓解焦虑情绪和运动障碍[32]。含血清素神经突触信号通路（也叫5-HT 能突触通路）也是酸枣仁、五味子配伍后抗焦虑的主要通路。5-HT 广泛存在于与焦虑相关的脑区，特别是下丘脑隔区和杏仁核[33]。从背缝核发出止于杏仁核和额叶皮质的5-HT能神经通路，已被公认参与条件性恐惧，背侧中缝核能抑制焦虑特有的适应行为[33]。cAMP 信号通路又称PKA 系统，该通路在抗焦虑作用中有着重要的作用。其下游PI3K-Akt 通路，与中枢神经系统疾病[34]，尤其是焦虑抑郁关系密切[35]；该通路具有胰岛素受体底物（IRS1）、糖原合成酶激酶3（GSK3）等与代谢功能相关的下游蛋白，和一系列与翻译、细胞增殖、细胞凋亡、血管生成相关的下游蛋白，与学习记忆有着密切的联系，且与BDNF 双向调节，与CREB、原肌球蛋白受体激酶B（TrkB）等蛋白一起构成一个闭合回路，即PI3K-Akt-pCREB-BDNF-TrkB-PI3K回路[36]。由于BDNF 与CREB 之间的双向调控作用[37]，BDNF 在MAPK-ERK 和PI3K-Akt 通路中，都发挥着重要作用。本研究结果中，酸枣仁可显著升高RS 模型大鼠海马区BDNF 含量，S-W 配伍后也可显著升高RS 模型大鼠海马区BDNF 含量。结合网络药理学分析结果，表明大鼠海马区BDNF 也是S-W配伍前后发挥抗焦虑作用的重要靶标。

综上所述，本研究通过动物实验进行药效学观察，并通过网络药理学方法，筛选出了酸枣仁、五味子配伍后治疗焦虑症的主要化学成分，预测了关键靶点和信号通路。本研究为S-W 治疗焦虑症的临床应用及进一步药理机制研究提供了参考依据。