中兽药显微鉴别技术的关键点分析

【摘要】中兽药是我国传统兽医药的重要组成部分，是中医防治疾病的重要物质基础。为了确保中兽药用药安全，结合中兽药的特性，采用显微鉴别技术对中兽药的真伪优劣进行鉴别。该技术的使用不仅可以提高中兽药质控和监管水平，还能为中兽药的标准化生产提供保障。本文针对中兽药显微鉴别操作过程中的关键环节进行了深入分析，并提出相应的改进措施，旨在进一步提高中兽药显微鉴别的准确性和可靠性。

【关键词】中兽药；显微鉴别；关键点

【DOI编码】10.3969/j.issn.1674-4977.2024.04.042

Analysis of Microscopic Identification Technology for Traditional Chinese Veterinary Medicine in Key Points

GAO Hongqian

（Liaoning Inspection ，ExaminationCertification

〔Liaoning Institute forAgro-product Veterinary Drugs and Feed Control〕， Shenyang 110036， China）

Abstract： Traditional Chinese veterinary medicine is an important component of Chinese veterinary medicine and an important material basis for traditional Chinese medicine to prevent and treat diseases. In order to ensure the safety of traditional Chinese veterinary medicine， combined with the characteristics of traditional Chinese veterinary medicine， microscopic identification technology is used to identify the authenticity， quality， and advantages of traditional Chinese veterinary medicine. The use of this technology can not only improve the quality control and supervision level of traditional Chinese veterinary medicine， but also provide guarantees for the standardized production of traditional Chinese veterinary medicine. This article conducts in-depth analysis of the key aspects of the microscopic identification process of traditional Chinese veterinary medicine and proposes corresponding improvement measures to further improve the accuracy and reliability of microscopic identification of traditional Chinese veterinary medicine.

Keywords： traditional Chinese veterinary medicine； microscopic identification technology； key points

显微鉴别技术是研究和控制中兽药真伪优劣的重要手段之一。药材经过捣碎或是磨成粉末后，原有的外部形态特征基本消失了，用肉眼很难鉴别药材或是成方制剂的真伪情况。因此，显微鉴别技术有着重要的实际应用价值。它不但可以检测出成方制剂（特别是散剂）中所含的君臣佐使各味药的组分，而且可以通过相关的标准检测出处方中未列出药的组分或是缺少某味药的组分，如掺伪、改变处方等。这就可以在一定程度上弥补理化鉴别和薄层色谱鉴别的不足。显微鉴别技术以其快速、简便、准确和直观的特点，在中兽药的真伪和优劣鉴别中发挥着重要作用。通过显微镜和常规检验试剂，结合检验员的专业知识和经验，可以观察到植物、动物等在生物学上的稳定特征，而这些特征又具有专属性，可排除交叉影响，不容易发生混淆。因此，显微鉴别技术为中兽药的质量分析和检测提供了有力的支持，确保了中兽药的安全性和有效性。但在显微鉴别技术操作的过程中，有一些关键点需要注意，如显微镜的使用、装片的制作、观察过程、微粉剂的观察、显微镜下看到的图片与书上的图片不同，以及检验员的要求等。这些都会对检测结果产生不利的影响，从而降低了检测结果的准确性。接下来本文就显微鉴别技术在操作过程中的关键点进行具体分析。

1显微鉴别的概念和理论基础

中药显微鉴别是指用显微镜对药材（饮片）、粉末、解离组织或表面制片及含药材粉末制剂中药材的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的方法。中药粉末显微鉴别是其中的重要内容之一，在粉末药材及成方制剂的质量微观检测工作中被广泛应用[1]。植物、动物和微生物的内部组织结构和细胞，及其内含物的显微形态特征，在特定条件下会展现出一定的稳定性和专属性，这就构成了中药显微鉴定的理论基础[2-3]。

2关键点及分析

2.1显微镜的使用

在使用显微镜做显微鉴别时，把制作好的装片夹到载物台上后，旋转粗准焦螺旋并从侧面观察载物台上升的过程，使载物台逐渐上升，当装片与物镜的距离在0.5 cm左右时，就可以从目镜中开始观察。切勿在上升的过程中只用目镜观察，以免在上升的过程中物镜的镜头和装片的载玻片接触，对镜头造成损坏。如果在调节粗准焦螺旋时，物镜镜头和载物台的距离小于工作的安全距离，就说明此次调节失败，需要重新操作，切勿因为心急而盲目调节粗准焦螺旋。

2.2制作装片

制作装片是显微鉴别技术非常重要的一个环节。首先要考虑取样量问题。因为载玻片和盖玻片的面积大小基本一样，所以要在有限的面积内尽可能多地取样品，但又不能因为取样太多而导致各个组分的显微特征相互叠加，轮廓不清晰，给观察增加难度，不利于做出准确的判断，而取样太少不仅费时费力，还会造成观察到的组分残缺。因此，要把握好取样量。其次要考虑透化问题。在载玻片上取完样品后，滴加水合氯醛溶液并搅拌均匀，用镊子夹住载玻片在酒精灯上加热。随着温度的升高，载玻片上的液体先是产生小气泡，处于微沸的状态，这时要把盖玻片从火焰上移开，载玻片上的余热可使水合氯醛溶液沸腾，等到气泡停止产生时再放到酒精灯上，切勿持续加热，以免造成载玻片的糊化。之后，再滴加几滴水合氯醛溶液，重复上述操作，除去细胞中的淀粉和油脂等即完成透化过程。这时如果载玻片处于湿润状态，就可以进行下一步操作。最后需要考虑气泡问题。在加盖盖玻片时极易产生气泡，为避免产生气泡，可将盖玻片一侧轻轻与载玻片上的溶液接触，然后慢慢将整个盖玻片慢慢地置于载玻片上，使液体充盈整个盖玻片，如还有气泡，可重复上述操作。加盖玻片的整个过程一定要抓住3个要点：轻、缓、不可操之过急。若有液体未充满盖玻片，可从一侧缝隙中加入液体。如液体过多，溢出了盖玻片之外，可用滤纸吸拭溢出的液体。还有一点需要注意的是：在冬季室温较低的情况下，透化后应立即观察，以免水合氯醛结晶析出影响观察，不能得出准确的结论。

在装片的制作过程中还有一种情况，就是所取样品的颗粒过大，使载玻片和盖玻片之间留有一定的空隙，这样通过显微镜观察时，不但看到装片上的液体在不停流动，无法对样品的显微特征进行观察，而且观察到的图像也不清晰。所以最好选取细小的颗粒来装片观看，或是制作完装片后，用镊子将较大的颗粒去除，直到达到观察的要求即可。

2.3观察过程

观察时要采用从左到右或是从上到下的路径，呈“Z”字形扫描，切勿观察时杂乱无章，这样会造成一个区域重复观察或是有的区域没有被观察到，造成漏看的情况。

在做显微观察时，经常会遇到在一个处方里有两个组分的显微特征相似度很高，这时不仅要看显微特征属于植物的哪一个部分，还要通过颜色和大小来进行区分。例如：《中华人民共和国兽药典》2020版二部中荆防败毒散的显微鉴别，处方中防风和柴胡的显微特征很相像。防风是油管含金黄色分泌物，直径17～60μm（见图1），柴胡是油管含淡黄色或黄棕色条状分泌物，直径8～25μm（见图2）。

两个组分首先可以在颜色上加以区分，防风是淡黄色，柴胡是黄棕色，颜色要比防风深一些。但如果柴胡油管的颜色也是淡黄色，与防风很难分辨时，这时就可以用目镜量尺来测量油管的直径，直径较大者则认为是防风，以此来作为区分防风和柴胡显微特征的另一个依据。

2.4微粉剂的观察

微粉剂是指饮片粉碎成粒径为微米级，并均匀混合制成的干燥粉末状内服制剂[4]。微粉剂收录在《中华人民共和国兽药典》2020版二部，之前版本的药典没有关于微粉剂的相关内容。近年来，市场上微粉剂的产品逐渐增多，但缺少相关标准，给中兽药的质量把控带来难度，所以2020版药典增加了微粉剂的收录。中药主要来源于植物，因而在进行微粉剂的显微鉴别观察时，重点是观察植物不同药用部位的细胞和组织情况。与散剂不同，微粉剂的颗粒粒径是微米级的，其植物细胞壁都已完全被破坏，导致在显微镜下很难观察到相对完整的结构状态，大部分都是以碎片的形式存在的。这就对检验员提出了更高的要求，他们不仅要在显微镜下找到完整的显微特征，还需结合专业知识和经验，通过破碎的组织或碎片来推断其所属的药材组分。

2.5显微镜下看到的图片与书上的图片不同

做过显微鉴别的人都会发现，当在显微镜下观察某组分时，其显微特征与书籍中附带的直观图片并不总是完全一致。书籍通常在显微特征的文字描述基础上提供图片，帮助读者更快地理解所描述的特征。然而，这种方法存在一个缺陷：在实际使用显微镜寻找特定组分时，若仅依赖书籍中的图片，可能会发现很难找到与之完全一致的特征。因此，建议在理解了显微特征的文字描述之后，参考徐国钧老师编著的《中药材粉末显微检定》一书。该书中，每一味药材的显微特征都以手绘线条形式展现，这有助于理解其基本形态。在掌握了某组分的特征并了解其大概轮廓之后，进而比对彩色照片，便能够精准捕捉显微特征。通过这种方法，在显微观察过程中，可以快速且准确地定位到特定的组分。长此以往，检验员对每味药材的特征都会有深刻的印象，形成一本自己的图谱集。只有准确把握每个组分的显微特征，才能在复杂的药方中轻松识别出具有显微鉴别意义的特征。

2.6对检验员的要求

中兽药显微鉴别是一项高度依赖操作者技术水平的鉴别工作。具备扎实的中药理论知识，还应拥有丰富的操作实践经验，否则就会在检测的过程中出现漏看一些显微特征、错看某一组分等情况，进而降低检测结果的准确性。特别是在进行中兽药成方制剂的显微鉴别时，如果处方中包含的药材品种繁多，这无疑会增加显微观察的难度。若是对某一组分的显微特征不太确定，建议选取这味药材的对照药材制作装片，并进行观察，以准确掌握这一组分的显微特征，然后再重新对成方制剂的装片进行观察。通过这样的实践过程，检验员可以在日常工作中积累宝贵的显微鉴别经验，从而显著提升检验结果的准确性和可靠性。

3结束语

中兽药显微鉴别技术虽然有很多优势，但在实际应用中还是存在一定的局限性。例如，非原粉入药是提取物及其制剂入药的，很难通过显微鉴别技术来判定其质量。随着科技的不断进步，目前可以将先进的数码显微摄影采集设备与显微镜相连，使得在显微镜下看到的图像能实时显示在电脑的屏幕上。这一技术的应用极大地提高了显微鉴别工作的效率和准确性。另外，中药材DNA条形码分子鉴别法的研究也初见成效[5]。相信随着技术的不断普及，显微鉴别技术会在药材物种检定中发挥更重要的作用。总之，不断提升和完善中兽药显微鉴别技术对于确保中兽药的安全使用和质量控制具有重要意义，并产生积极而深远的影响。

【参考文献】

[1]高光，杨劲松.中药显微鉴别和薄层色谱彩色图集[M].北京：中国农业出版社，2009：3.

[2]张南平，肖新月，刘宝玲.中成药质量标准中显微鉴别项存在的问题及讨论[J].中国药品标准，2000（2）：10-13.

[3]黄海欣，王定.中药材粉末显微特征的专属性和稳定性研究[J].基层中药杂志，2000（4）：3-5.

[4]张仲秋，冯忠武.中华人民共和国兽药典：2020版二部[M].北京：中国农业出版社，2020：附录16.

[5]张伟，李波，罗国安.中国药典分析检测技术指南[M].北京：中国医药科技出版社，2017：842.

【作者简介】

高红倩，女，1984年出生，学士，研究方向为畜牧、中兽药。

（编辑：于淼）