白细胞介素-27、腺苷脱氢酶、基因检测、结核杆菌培养对结核性胸腔积液的诊断意义研究

姜玮 沈峰 王晓宝

(1.安康市疾病预防控制中心质量控制科,陕西 安康 725000;2.安康市中心医院检验科,陕西 安康 725000;3.宝鸡市中医医院病理科,陕西 宝鸡 721000)

结核性胸腔积液(TPE)是结核杆菌和其自溶以及代谢产物到达胸膜腔内所致,TPE内包含多类细胞和可溶性炎症介质[1]。确定胸腔积液是结核性或者非结核性,对临床评估患者病情和开展治疗有着重要意义[2]。因此,需要采取简便、迅速、准确且无创的诊断指标。当前有关TPE的诊断方式较多,包含白细胞介素-27(IL-27)、腺苷脱氢酶(ADA)、基因检测和MTB培养等,其中MTB培养用于TPE诊断历史悠久,且准确度较高[3];IL-27能将辅助性T细胞能力激活,经促炎、抗炎等作用机制调节免疫疾病发生和发展,目前已被用于TPE诊断中,有着较高诊断效能[4];ADA属于临床公认的TPE诊断有效指标,该项指标水平较低能将TPE的可能性排除[5];Genexpert MTB/MIF是一类新型分子生物学检测技术,有着迅速、准确以及敏感等优点[6]。本文探讨IL-27、ADA、基因检测以及MTB培养对TPE的诊断意义,旨在为临床鉴别诊断TPE提供参考依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2021年03月至2022年12月本院收治的TPE患者总共90例为TPE组,另选取同时间段内本院收治的非TPE患者总共98例为非TPE组,TPE组中男52例,女38例;年龄24～80岁,平均年龄(53.68±10.25)岁;胸腔积液体积300～398 cm3,平均体积(350.26±28.45)cm3。非TPE组中男58例,女40例;年龄25～78岁,平均年龄(54.10±10.12)岁;胸腔积液体积302～395 cm3,平均体积(349.254±30.25)cm3。纳入标准:TPE组均开展胸部X线或者影像学检查发现存在液性暗区,后开展胸水生物化学和常规、细菌检测以及胸膜活检证实,抗结核药物治疗有效;非TPE组均是恶性胸腔积液,经过支气管镜检查、痰液、胸水脱落细胞、淋巴结穿刺和肺穿刺病理检查等确诊;年龄在18岁以上;依从性良好。排除标准:凝血功能异常者;存在支气管胸膜瘘者;存在精神病或者残疾者;存在其他特殊感染者;存在重度肝肾功能疾病者;近3个月开展过胸部手术、胸部侵入检查或者胸部创伤史者;风湿免疫病等引起的胸腔积液者。两组一般资料相比无显著差异(P>0.05)。本研究得到院内伦理委员会通过,患者知情同意。

1.2方法

1.2.1IL-27及ADA检测 所有患者均在住院后的24h通过胸腔穿刺抽取10 mL胸水,以3 000 r/min速度开展15 min离心处理,后选择上清液待测,放在-80°C的冰箱内保存。通过酶联免疫吸附方法对IL-27含量开展检测,通过酶显色法对ADA含量开展检测,操作者严格依据试剂盒内说明书开展操作,试剂盒是武汉博士德生物工程公司生产。IL-27>500 ng/L当作评定TPE的标准,ADA>45U/L当作评定TPE的标准。

1.2.2基因检测 所有患者通过胸腔穿刺抽取5 mL胸水,放到50 mL离心管中,以2:1比例添加样品试剂,扭紧盖子后剧烈晃动10～20次,放于室温下开展15 min培养处理,通过无菌移液管将液化样品吸入直至管内最低标记位置,再缓慢加进处理过的样品至检测盒加样孔中,避免出现气泡,扭紧盖子,放入样品反应盒至美国Cepheid公司生产的GeneXpert MTB/MIF全自动一体化半巢式定量PCR设备中,自动循环2 h得到最终结果。

1.2.3MTB培养 所有患者选取3 mL的沉淀物,添加4%的等量氢氧化钠开展15 min处理,对MTB开展分离培养,选择美国BD公司生产Bactec MGIT960全自动分枝杆菌培养及药敏系统开展培养,严格依据仪器说明书中内容进行操作,后仪器能自动判读出结果。

1.3观察指标 观察两组胸水IL-27、ADA水平和Genexpert MTB/MIF、MTB培养阳性率差异,并比较IL-27、ADA、Genexpert MTB/MIF、MTB培养单项或者联合检测对TPE的检出率。联合检测评定标准为任意一项检查结果显示为阳性[7]。阳性率=阳性例数/总例数×100%。检出率=检出例数/总例数×100%。

2 结 果

2.1两组胸水内的IL-27、ADA水平和Genexpert MTB/MIF、MTB培养阳性率相比 TPE组胸水内的IL-27、ADA水平和Genexpert MTB/MIF、MTB培养阳性率均高于非TPE组(P<0.05)。见表1。

表1 两组胸水内的IL-27、ADA水平和Genexpert MTB/MIF、MTB培养阳性率相比

2.2IL-27、ADA、Genexpert MTB/MIF、MTB培养单项或者联合检测对TPE的检出率相比 联合IL-27、ADA、Genexpert MTB/MIF、MTB培养对TPE的检出率高于单项检测(P<0.05)。见表2。

3 讨 论

早期诊断MTP对采取有效治疗措施改善患者预后至关重要,但前提是需要和其他类型胸腔积液做好鉴别。临床使用较多的检测技术包含抗酸染色以及MTB培养等,但存在敏感度、特异度不高和假阳性率高等问题[8]。

IL-27属于近些年来出现的一类新型异源二聚体细胞因子,有着细胞免疫刺激以及调节作用,在各类免疫疾病中发挥重要作用[9]。本文结果显示,TPE组的胸水IL-27水平高于非TPE组(P<0.05)。分析原因是MTB感染和T淋巴细胞相关,可生成固有的免疫应答,MTB对巨噬细胞产生刺激作用,能使其分泌出较多IL-27,改变机体中MTB的生存现状。ADA是和免疫系统存在密切联系的一类核酸代谢酶,伴随淋巴细胞激活以及分化,这项指标能产生相应变化[10]。TPE组的胸水ADA水平高于非TPE组(P<0.05)。这是因为TPE发生后,胸腔积液内的淋巴细胞显著增加,进而使得ADA含量上升。MTB培养属于TPE诊断中的一类常见方法,但存在培养时间长、检出率和敏感度不高等缺陷[11]。Genexpert MTB/MIF属于近些年来被逐渐用于临床的TPE基因检测技术,有着操作便捷以及迅速等优点,且敏感度较MTB培养高[12]。TPE组胸水内的Genexpert MTB/MIF、MTB培养阳性率均高于非TPE组(P<0.05),这和席素雅[13]等研究中结果一致,反映出两项检查方法在筛查TPE中均有一定价值。此外,联合IL-27、ADA、Genexpert MTB/MIF、MTB培养对TPE的检出率高于单项检测(P<0.05),说明联合几项检测方式能提升对TPE的检出率。原因可能是IL-27、ADA、Genexpert MTB/MIF、MTB培养几项检测方式联用,能优势互补,起到协同诊断效果,进而有助于提升对TPE的诊断效果。

综上,IL-27、ADA、基因检测以及MTB培养能协助临床鉴别诊断TPE,且联合几项检测方法能提升对TPE的检出率,值得推广应用到临床。