复合免疫增强成分对幼猫生长指标和免疫功能的影响

2023-12-20作者肖再利唐超赵世元祝惠黎华浩

广东饲料 2023年10期

◆作者：肖再利唐超赵世元祝惠黎华浩

◆单位：佛山市雷米高动物营养保健科技有限公司

近年来，养猫人数激增，根据《中国宠物行业白皮书》，2021年城镇猫数量为5806 万只，猫的整体年龄较低，2 岁以下猫咪占比56.9%，养宠时间在1 年以内的猫主人占比26.9%，说明在养猫人群中，幼猫的占比较大。然而幼猫的抵抗力较差。因此，猫咪自身免疫力的加强显得十分重要，通过宠物食品来帮助猫咪提高免疫力尚为一种可行方式。

目前，市场上能够提供激活免疫力的营养素较多，如维生素C、牛磺酸、β- 胡萝卜素、牛初乳、羊初乳和β- 葡聚糖等（王昱丁等，2018）。根据前人研究报道，在幼猫饲粮中添加0.1%的牛初乳粉，有助于增强机体免疫力（GORE 等，2021）；饲粮中添加0.03%和0.05%壳寡糖，成猫血清的免疫球蛋白A（Immunoglobulin A，IgA）水平显著上升（王莎等，2022）；在育成羔羊饲粮中添加10 g/kg 黄芪根粉，能改善平均日增重、抗氧化和免疫功能（HAO 等，2020），而黄芪多糖应用在蛋鸡饲粮上，具有提高禽流感疫苗抗体效果的趋势（王天元，2016）。此外，β- 葡聚糖也报道过具有增强动物免疫、促进动物生长的作用（贾淑庚等，2014）。然而，这些营养素以组合形式添加在幼猫饲粮中的研究尚未报道。因此，本试验目的是探究将黄芪、牛初乳粉、壳寡糖和β- 葡聚糖以适宜添加量组成的复合免疫增强成分对幼猫生长指标、血常规指标和免疫功能的影响，以期为复合免疫增强成分在猫粮上的应用提供科学参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验所使用的黄芪购自安徽某生物科技公司，牛初乳粉购自上海某生物科技有限公司，壳寡糖购自陕西某生物科技有限公司，β- 葡聚糖购自湖北某股份有限公司。

1.2 试验设计

试验选用24 只4～6 月龄、体重为1.7±0.4kg 的健康英短蓝猫幼猫，公母各半，随机分为3组，每组8 个重复，每个重复1只。对照组饲喂基础饲粮，试验组分为低浓度组（饲喂基础饲粮+0.30%黄芪+0.10%牛初乳粉+0.025%壳寡糖+0.025%β- 葡聚糖）和高浓度组（饲喂基础饲粮+0.60%黄芪+0.20%牛初乳粉+0.05%壳寡糖+0.05%β- 葡聚糖）复合免疫增强成分，配制基础饲粮参照NRC（2006）中幼猫营养需要和国标《GB/T 31217-2014 全价宠物食品猫粮》，基础饲粮组成及营养水平参见表1。预饲期7d，正式试验期14d。

表1 基础饲粮组成及营养水平（干物质基础）

1.3 饲养管理

本试验所有的猫饲养于同一猫舍，单笼饲养。试验前已做好驱虫和按照常规免疫程序注射三联疫苗。猫的饲喂时间分别为每天08:00 和16:00 各饲喂30g 饲粮，记录每餐的采食量和每天的粪便评分，粪便评分（fecal score,FS）标准参考表2。试验期间保持猫舍清洁，通风良好，保证猫咪自由饮水。每日粪便评分后，铲干净猫砂，日常做好环境的消毒清洁。动物试验在广东省云浮市雷米高犬猫科学试验中心进行。

表2 粪便评分标准

1.4 检测指标与方法

1.4.1 日采食量和粪便评分

日采食量（g/d）= 统计期内总采食量/ 天数

粪便评分= 统计期内总粪便评分/ 统计次数

1.4.2 血液指标检测

于试验前1 天和第14 天08:00 空腹采集猫左前肢静脉血1.5 mL，取0.5mL 入乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）抗凝管中，充分抗凝，用于血常规指标测定。使用BC-5000 Vet 迈瑞兽用全自动血常规分析仪，测定了红细胞、白细胞及血小板相关指标，具体包括：白细胞数目、中性粒细胞数目及百分比、淋巴细胞数目及百分比、单核细胞数目及百分比、嗜酸性粒细胞数目及百分比、嗜碱性粒细胞数目及百分比、红细胞数目、血红蛋白浓度（HGB）、红细胞压积、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、红细胞分布宽度变异系数、红细胞分布宽度标准差、血小板数目、平均血小板体积、血小板分布宽度和血小板压积。剩下1 mL置于管内，常温倾斜30min 后以3000 r/min 离心15min，收集血清于-20℃冰箱保存，用于测定血清免疫球蛋白 A（Immunoglobulin A，IgA）、免疫球蛋白G（Immunoglobulin G，IgG）和免疫球蛋白M（Immunoglobulin M，IgM）含量，采用猫酶联免疫反应试剂盒（购自江苏酶免生物科技有限公司）进行检测。

1.5 数据分析

用EXCEL 2019 进行数据统计，三组比较采用SPSS 25.0软件进行单因素方差分析，Duncan’s 方法进行多重比较，结果用“平均值±标准误”表示，P＜0.05 代表差异显著。两组比较采用独立样本t 检验，采用Graphpad Prism 8.0 软件进行图形绘制，*表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 复合免疫增强成分对幼猫生长指标的影响

由表3 可知，三组猫的试验前体重无差异（P＞0.05），饲粮中添加复合免疫增强成分对猫咪的试验后体重、日采食量及粪便评分均无显著影响（P＞0.05）。其中各组的粪便评分均在2～3 分，属正常粪便。

表3 复合免疫成分增强剂对猫咪生长指标的影响

2.2 复合免疫增强成分对幼猫血常规指标的影响

由表4 可知，饲粮中添加复合免疫增强成分对幼猫血液中的白细胞数目、中性粒细胞数目及百分比、淋巴细胞数目及百分比、单核细胞数目及百分比、嗜酸性粒细胞数目及百分比、嗜碱性粒细胞数目及百分比、红细胞数目、血红蛋白浓度、红细胞压积、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、红细胞分布宽度变异系数、红细胞分布宽度标准差、血小板数目、平均血小板体积、血小板分布宽度和血小板压积均无显著影响（P＞0.05），均在正常范围内。

表4 复合免疫增强成分对幼猫血常规指标的影响

表4 复合免疫增强成分对幼猫血常规指标的影响（续）

2.3 复合免疫增强成分对幼猫血清免疫指标的影响

由图1 可知，试验前后，试验各组幼猫的血清IgA 和IgG均无显著变化（P＞0.05）。而与试验前相比，试验后高浓度组显著提高了幼猫血清IgM 的水平（P＜0.05），试验前平均值6.59 mg/L，试验后平均值8.55 mg/L，提升幅度为29.74%，这表明饲喂含高浓度复合免疫增强成分的饲粮能显著提高猫咪的免疫力。

图1 复合免疫增强成分对幼猫血清免疫指标的影响

3 讨论

3.1 复合免疫增强成分对猫咪生长指标的影响

在宠物行业，1-12 月龄的猫为幼猫，12 月龄以上的猫为成猫。猫的一生中，幼猫由于离开原有的母体喂养，免疫力低下，容易生病，因此幼猫的免疫情况尤为重要（夏婷婷，2022）。而幼猫的生长情况，如体重、采食量和粪便情况恰恰是判断幼猫是否处于健康状况最直观的表现。本试验结果表明，三组幼猫在试验后体重无差异，说明幼猫在试验期间，体重的增幅无差异，均表现出良好的生长，幼猫粮中添加免疫增强成分在短期内对幼猫能达到同样的增重效果。另一结果显示，饲喂添加复合免疫增强成分的猫粮对猫咪采食量也无显著影响，表明在饲粮中添加以黄芪为主要的复合免疫增强成分不会影响猫粮的适口性，这与前人研究结果相似，HAO 等（2020）在育肥羔羊饲粮中添加5～30 g/kg 黄芪，发现试验饲粮的干物质摄入量与基础饲粮无差异。

猫咪的粪便情况反映粮食在猫咪体内的消化情况，也间接反映猫咪健康状况。本试验结果表示，与对照组相比，饲粮中添加复合免疫增强成分对猫咪的粪便评分无显著影响。其中，高浓度组猫咪的粪便情况与对照组更为接近，而低浓度组的粪便评分虽在数值上高于对照组，但在2-3 分，属于正常粪便。王莎等（2022）研究表明，饲粮中加入0.03%和0.05%壳寡糖能保持成年猫粪便正常, 对粪便初水分无显著影响，这与本试验结果一致。王忠等（2007）在饲粮中添加50 mg/kgβ-1,3/1,6- 葡聚糖饲喂断奶仔猪，显著提高日增重和降低腹泻发生率，这与本试验结果不相一致，可能是因为一方面断奶仔猪比本试验4 月龄幼猫的生长速度更快，另一方面28日龄断奶仔猪更易受到外界环境影响而造成腹泻。以上结果表明，当饲粮中添加复合免疫增强成分，粮食的消化效果较好，可以维持猫咪良好的粪便状况。

3.2 复合免疫增强成分对幼猫血常规指标的影响

机体血液中有着参加机体免疫功能的主要成分，如白细胞、嗜中性粒细胞和淋巴细胞，以及血浆中的抗体等相关免疫蛋白（张立春等，2018），其数量的变化通常代表着机体抵抗疾病能力高低和健康程度，而健康的机体内相关细胞和蛋白含量会处于相对恒定的范围（ABDEL等，2016）。本试验中各组幼猫血常规指标都处在正常范围，说明试验幼猫较为健康，而饲粮中添加复合免疫增强成分对血常规指标无显著影响，证明能够保持幼猫的机体健康。目前，关于饲粮中添加黄芪、牛初乳粉、壳寡糖和β- 葡聚糖对动物血常规指标影响的报道较少，王天元等（2016）在海兰褐蛋鸡饲粮中添加维生素C 和黄芪多糖，发现对平均红细胞血红蛋白含量及浓度、白细胞数目、红细胞体积、压积及数目、血红蛋白影响不显著，这与本试验结果相似。有报道表明，饲粮中添加200 mg/kgβ-1,3/1,6- 葡聚糖可极显著提高仔猪血清球蛋白水平,显著降低血清总胆固醇和低密度脂蛋白水平,对血清甘油三酯、高密度脂蛋白和葡萄糖的水平均无显著影响，同样也证明复合免疫增强成分对幼猫机体的安全性（王忠等，2007）。

3.3 复合免疫增强成分对幼猫血清免疫指标的影响

免疫系统主要由免疫器官、细胞和分子构成，免疫分子中的免疫球蛋白IgA、IgG 与IgM 的含量是反映免疫功能的重要指标，具有高特异性和高亲和性（王莎等，2022）。因此，免疫球蛋白的提高，对动物免疫机能的提升具有一定意义。据前人研究报道，本研究使用的黄芪（马学明，2022）、牛初乳（SATYARAJ 等，2013）、壳寡糖（张丽萍等，2016）和β- 葡聚糖（唐佩娟等，2014；杨天骄等，2008；刘影等，2003）均有提高动物机体免疫力的相关报道，但目前研究多集中在单独添加，以复合形式添加的报道较少。本研究结果表明，与试验前相比，复合免疫增强成分对幼猫血清的IgA 和IgG 无影响，能够显著提高IgM 的含量，这可能是由于本次添加的复合成分均具有提高免疫力的作用。

黄芪是一种可饲用天然植物，其中有多糖、甲苷、黄酮、生物碱等多种有效成分，在体内外均有较好的免疫调节作用。目前大多报道集中在黄芪多糖，舒迎霜等（2019）在犬粮中添加1%和2%黄芪多糖发现，显著提高犬血清中IgA、IgG、IgM 和γ 干扰素水平，促进犬小肠IgA mRNA 和分泌型IgA 蛋白表达，提高机体免疫力。赵桂秀等（2012）使用0.5 mL/（kg 体重）黄芪多糖给犬肌肉注射，发现不仅大幅度提高机体C3、C4 补体水平，还能显著提高机体IgG 和IgA 的含量。

免疫球蛋白是牛初乳中最主要的免疫因子，其中IgG 约占免疫球蛋白总含量的（杨红等，2022）。GORE 等（2021）和SATYARAJ 等（2013）分别在幼猫和犬的饲粮中添加0.1%喷雾干燥牛初乳，均发现加强了粪便IgA的表达以及更高的疫苗反应。

壳寡糖是由2-10 个氨基葡萄糖通过β-1,4- 糖苷键链接而成的低聚糖（胡志鹏，2003），王莎等（2022）在猫粮中添加0.03%和0.05%壳寡糖，显著提高成猫血清总蛋白和IgA 水平。LAN 等（2020）报道，饲粮中添加壳寡糖可以减轻热应激引起的肉鸡肠道氧化应激和炎症反应（降低十二指肠和空肠黏膜IL-1β含量）。

β葡聚糖普遍存在于细菌、真菌、酵母和植物细胞壁中。刘影等（2003）在饲粮中添加β-1,3/1,6- 葡聚糖，发现提高了肉仔鸡的体液免疫和细胞免疫，主要体现在提高法氏囊的重量和新城疫疫苗的抗体水平和免疫应答。同样地，研究显示，实验小鼠口服β- 葡聚糖4 周以后，增强了体液免疫活性，主要体现在B淋巴细胞数量、IgM 和IgG 的含量显著增加（VETVICKA 等，2007）。VOJTEK 等（2017）报道，幼犬口服可溶性葡聚糖4 mg·kg-1·d-1，比未口服幼犬更早达到抗狂犬病毒和抗犬细小病毒2型抗体的保护水平。王忠等（2007）在饲粮中添加50～200 mg/kgβ-1,3/ 1,6- 葡聚糖饲喂断奶仔猪，发现可极显著提高血清球蛋白的浓度，表明可增强机体免疫功能。

以上研究均表明，饲粮中添加黄芪、牛初乳、β- 葡聚糖和壳聚糖可以提高动物机体免疫能力。但在宠物猫上的研究还需要更为长期和更多的试验验证，作用机理也需进一步探索。