广西田东县某肉鸡场大肠杆菌病的诊治

杜海，黄宝学，梁发旺，陆春礼

（1.广西田东县平马镇水产畜牧兽医站，广西 田东 531500；2.广西田东县动物疫病预防控制中心，广西 田东 531500；3.广西田东县印茶镇水产畜牧兽医站，广西 田东 531500；4.广西百色市动物疫病预防控制中心，广西 百色 533000）

鸡大肠杆菌病是由禽致病性大肠埃希菌(Avi—an pathogenic Escherichia coli，APEC)引起的一种急性或慢性传染病，主要通过水平传播和垂直传播，发病率和死亡率较高。临床症状有多种表现形式，主要包括大肠埃希菌败血病、卵黄性腹膜炎、输卵管炎、全眼球炎及肉芽肿等[1]。近年来，随着百色市参煌养殖有限公司、广西富凤农牧集团等养殖公司在田东县推行的“公司+农户”养殖模式以及养鸡行业科技水平的提高，田东县养鸡业得到了长足发展，2022 年末，全县鸡饲养量达2 300 多万羽，比上年同期增长了5.1%。由于饲养密度增大、饲养环境等外界因素的改变及影响，带来细菌性疾病的单一或混合感染，呈现多样化和复杂化，增加了防治难度。其中，影响较为严重的是大肠杆菌病。致病性大肠杆菌具有区域流行性特点，其致病性在不同地区也存在较大差异，因此加强本地区肉鸡大肠杆菌病的诊断与防治研究具有重要意义。近期，田东县某肉鸡场发生了大肠杆菌病，为有效快速控制疫情和了解本地区肉鸡大肠杆菌的病原学特性及耐药性，采用临床诊断、细菌分离培养、药敏试验、生化试验等方法进行了诊断和用药治疗，收到了良好效果。

1 发病情况

田东县平马镇某肉鸡场养殖面积约为380 m2，2022 年5 月2 日，购进2 日龄灵山土鸡6 500 羽，65 日龄前，鸡的采食与饮水量、精神、运动、粪便均正常，并已按本场免疫程序免疫了鸡新城疫-传染性气管炎二联活疫苗、鸡传染性法氏囊病活疫苗、鸡痘活疫苗、重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗等。7 月15 日部分鸡群受雨淋出现异常症状，开始出现零星死亡，鸡个体重0.9～1.1 kg，鸡群每天饲喂料量约455 kg。 发病第二天，鸡场使用阿莫西林、柴胡、盐酸多西环素等药物进行治疗4 d，但疗效不明显，发病7 d 内死亡305 羽，死亡率4.8%。

2 临床症状

患病鸡机体严重脱水，消瘦，鸡毛暗淡无光泽，精神沉郁，拉灰白色或水样粪便，肛门和周边的羽毛污秽，被白色粪便严重污染；鸡群采食量减少1/3。有的病鸡翅下垂，呆立一角，在圈舍当中不愿意走动；有的病鸡眼结膜潮红，眼前房有浆液性的渗出物，眼睑肿胀，严重时上下眼睑粘连；有的病鸡呼吸困难，咳嗽，伸脖呼吸，鼻分泌物增多；有的病死鸡腹部膨大，呈淡绿色。

3 剖检病变

剖检病死鸡6 只：肝周炎（5/6），肝肿大，肝脏表面被白色物质不完全包裹，用镊子撕开此膜后肝呈土黄色； 心包炎（4/6），心脏表面有纤维素性物质附着，心包增厚不透明、积有淡黄色液体；腹气囊浑浊增厚，有干酷样物附着；腹腔内积有淡黄色样的纤维素性渗出物或干酪样物如同蛋黄，有恶臭味；有的肠壁粘连，肠黏膜充血、出血，肠腔黏膜脱落，菲薄透明，肠内有淡黄色泡沫状分泌物（4/6）。

4 实验室诊断

4.1 细菌分离培养

无菌操作取6 只病死鸡的肝脏分别接种于普通营养琼脂、麦康凯培养基，置37℃温箱中培养48 h 后观察。有5 株分离菌珠在普通营养琼脂培养基上呈现的是浅灰色、圆形、中等大小、微凸、半透明菌落； 而在麦康凯琼脂培养基上呈现的则是半透明、光滑湿润、边缘整齐、中间稍隆起的红色菌落。在麦康凯培养基上挑取红色单个菌落，分别接种到普通肉汤培养基，37 ℃纯化培养 24 h，放 4 ℃冰箱中，备用。

4.2 涂片镜检

以接种棒挑取纯化培养的菌落进行革兰氏染色，镜检发现有大量红色、短小杆状、两端钝圆、散在或成对的革兰氏阴性杆菌。

4.3 生化试验

把纯化培养后的5 株分离菌接种到 V-P、MR、H2S 等10 种微量生化鉴定管中，均发现靛基质试验和 M-R 试验均为阳性， 枸橼酸盐酸试验和 V-P 试验均为阴性，H2S 反应呈阴性，与糖反应产酸产气等（表1），生化结果符合大肠杆菌的生化特性。

表1 分离菌生化试验鉴定结果

4.4 药敏试验

采用Kirby-Bauer 纸片扩散法，用9 种药物进行药物敏感性试验：将纯化细菌接种于普通营养琼脂培养基，然后将各药敏纸片贴于培养基表面，37℃培养18 h，对抑菌圈大小进行测量比较。抑菌圈小于10 mm 为低度敏感，处于11～15 mm 为中度敏感，大于15 mm 为高度敏感。结果表明，该细菌对头孢噻呋钠、硫酸安普霉素和恩诺沙星高度敏感，对硫酸粘菌素和阿莫西林中度敏感；对氨苄青霉素、磺胺间甲氧嘧啶、氟苯尼考、链霉素低度敏感（耐药）。药敏结果详见表2。

表2 分离菌药敏试验结果

经临床检查、病理剖检和实验室诊断，初步判定该鸡场发生大肠杆菌病。

5 防治措施

5.1 做好消毒灭源

为防止病原菌扩散污染，对病死鸡进行集中深埋，做好鸡场内外环境清洁消毒工作，清除鸡舍内粪便并集中推放消毒。用1:1 000 倍戊二醛溶液和40%的二氯异氰脲酸钠粉按1:500 倍稀释用水配成溶液，隔天交替使用对鸡舍和周边场地每天消毒1 次，连用7 d。

5.2 使用药物治疗

结合药敏试验结果，在治疗的第1 天，按每羽均重1 kg 计算全场鸡体重为6 500 kg，然后按每公斤体重头孢噻呋钠10 mg、10% 恩诺杀星注射液0.05 mL 计算出头孢噻呋钠的用量65 g、10% 恩诺杀星注射液325 mL，与0.9% 生理盐水1 625 mL 混合，每只鸡0.3 mL 进行肌肉注射；第2～3d 天，按发病前鸡群每天需饲料量约455 kg计算，每天使用10%硫酸粘菌素粉900 g、10%恩诺沙星900 g 进行拌料饲喂；同时，为减少各种应激反应和增强雏鸡免疫抵抗力，按发病前鸡群每天饮水量910 kg 计算，每天在饮水中加入电解多维粉200 g、10%黄芪多糖粉200 g。经以上治疗，鸡群病情得到有效控制。

6 讨论

6.1 大肠杆菌致病的血清型众多，不同血清型菌株之间因缺乏交叉免疫保护性，给疫苗研制带来了一定困难，现阶段还是依靠抗菌药物作为防治鸡大肠杆菌病的主要手段[1]。抗生素的使用为防治大肠杆菌病带来了很大的帮助，但是在养鸡生产中，部分饲养人员盲目使用抗生素，鸡群没病的时候也用药来预防疾病发生，有病的时候就加大治疗剂量来使用，造成越来越多细菌耐药株产生，进而使有些抗生素失去了效力，导致了大肠杆菌病越来越难防治。本病例采用 Kirby-Bauer 纸片扩散法选择9 种抗菌药物进行药敏试验，结果表明，分离菌对氨苄青霉素、磺胺间甲氧嘧啶、氟苯尼考、链霉素产生耐药，申子平等[2]研究表明晋东南地区鸡源大肠杆菌对罗红霉素、链霉素等9 种药物产生不同程度耐药性，表明大肠杆菌耐药现象在生产上比较常见。当前，养鸡场在养鸡生产中，若发现鸡群有大肠杆菌病典型症状、疫情有蔓延态势时，应尽可能采集病料送检，进行细菌分离鉴定和药敏试验，以筛选敏感药物进行治疗。

6.2 应用益生菌制剂来防治大肠杆菌病是绿色养殖的迫切需要。在肉鸡饲料中添加益生菌制剂，不仅能改善鸡只消化道中的菌群平衡，增强机体免疫力，而且能提高肉料比和生产速度、缩短饲养周期及减少有害气体的产生，因此可减少鸡疾病的发生和提高养鸡经济效益。目前，益生菌添加剂由于其具有绿色环保特性在养殖生产中应用越来越广泛，国内外学者都很重视研究生产和应用。张娟等[3]研究表明，芽孢杆菌通过拌料进入肠道后，能够几乎全部复活，在鸡消化系统内能产生各种酶和维生素B 等，促进鸡肠道内有益菌的生长繁殖，抑制病原菌群繁殖生长，刺激肠道内免疫功能，增强机体免疫力，提高料肉比，可获得较好的经济效益。

6.3 大肠杆菌为条件性致病菌，广泛存在于饲料、饮用水、料槽等养殖场内外环境及正常动物的肠道中，当环境因素改变、饲养管理不当、继发和混合感染其他疾病等因素引起机体抵抗力下降时，大肠杆菌的致病性就表现出来，引发感染[4]。通过现场调查了解，本次发病的重要诱因是部分鸡受淋雨与饲养密度过大，这提示生产上一方面要加强饲养管理，供给全价营养饲料，定期清理鸡舍内粪便，保持良好通风换气以及合适的饲养密度和温湿度，减少各种应激发生等；另一方面要根据本场的科学免疫程序，做好鸡新城疫、高致病性禽流感、传染性支气炎、鸡痘、鸡传染性法氏囊病等疫苗免疫，提高鸡群免疫密度和抗体水平，减少病毒性疾病继发或混合感染大肠杆菌病的风险。

6.4 鸡大肠杆菌病由于侵害的部位不一样，临床表现也不一样[5]，呈现咳嗽、伸脖呼吸、腹泻、跗关节或趾关节肿大造成鸡跛行、单或双眼睑肿胀、头颈震颤与角弓反张、严重消瘦脱水等单一或多种症状，临床上与禽出血性败血症、鸡沙门氏菌病、滑液囊支原体病等症状相似，基层兽医工作者应当做好疾病的鉴别诊断。禽出血性败血症主要发生在成年鸡，剖检病变可见肝有灰白色的坏死灶和心内外膜有出血点；鸡沙门氏菌病包括鸡白痢、鸡伤寒和鸡副伤寒，鸡白痢剖检见肝有“雪花”样坏死灶，鸡伤寒和鸡副伤寒剖检可见肝呈铜绿色或古铜色，无心包炎、肝周炎；鸡滑液囊支原体病常发生于4～12 周龄的肉雏鸡，成年鸡多为慢性或隐性感染，临床多数表现为附关节、趾关节、翼关节或爪垫肿胀继而出现跛行。