52%砜嘧·碘甲钠盐·噻酮·环丙磺酰胺WG 的高效液相色谱分析

祝丹，李娟，周洁，殷毓，吴志洪

(江苏省农用激素工程技术研究中心有限公司，江苏 常州 213022)

砜嘧磺隆(rimsulfuron)是由美国杜邦公司开发的广谱、高效、低毒磺酰脲除草剂，为乙酰乳酸合成酶(ALS)抑制剂[1]，可有效防除玉米田中大多数一年生杂草，如田蓟、铁荸荠、香附子、野燕麦、马唐等，芽前施药效果好；防除多年生杂草在芽后早期、2～5 叶期施药效果最好[2]。碘甲磺隆钠盐(iodosulfuron-methyl-sidium)和噻酮磺隆(thiencarbazonemethyl)是由德国拜耳作物科学有限公司开发的磺酰脲类除草剂，环丙磺酰胺(cyprosulfamide)是由其开发的新型除草剂安全剂。碘甲磺隆钠盐主要用于防除阔叶杂草如猪殃殃和母菊等，以及部分禾本科杂草如风草等[3-4]；噻酮磺隆主要用于防除阔叶杂草，在玉米田可与其他除草剂和安全剂混用[5-6]；环丙磺酰胺适用于玉米、水稻等谷类，允许在任何土壤中使用，能促进根系的生长和保护植物健康[7]。

江苏省农用激素工程技术研究中心有限公司将上述几种成分配制成新型的复配除草剂，在推荐使用剂量下，对玉米田一年生和多年生禾本科杂草及阔叶杂草有良好的防除效果；该制剂中加入安全剂环丙磺酰胺，作为玉米田除草剂的专用解毒剂，显著提高了玉米降解除草剂速度，防护效果显著[8]。目前，仅有砜嘧磺隆等部分单剂成分的分析方法报道[9-10]，未见任何复配剂型检测方法的报道。基于此，本文采用高效液相色谱法开展了52%砜嘧磺隆·碘甲磺隆钠盐·噻酮磺隆·环丙磺酰胺水分散粒剂的分析方法研究，旨在为该产品生产和质量控制提供技术支撑。

1 材料与方法

1.1 仪器

Agilent 1260 HPLC 型高效液相色谱仪配紫外检测器(美国安捷伦科技有限公司)；TGL-16C 高速离心机(上海安亭科学仪器厂)；SK5200HP 超声振荡器(上海科导超声仪器有限公司)；MS205DU/A电子天平(梅特勒-托利多贸易有限公司)。

1.2 药剂和试剂

甲醇(99.9%)、乙腈(99.9%)(TEDIA)，色谱级；超纯水(自制)；磷酸(85%，上海麦克林生化科技股份有限公司)，色谱级；砜嘧磺隆标准品(≥99.1%) 、 噻酮磺隆标准品( ≥99.0%)(Chem service)；碘甲磺隆钠盐标准品(≥91.8%)、环丙磺酰胺标准品(≥99.5%)(Dr. Ehrenstorfer)；52%砜嘧·碘甲钠盐·噻酮·环丙磺酰胺WG(江苏省农用激素工程技术研究中心有限公司)。

1.3 色谱条件

Eclipse plus C18不锈钢柱色谱柱为150 mm×4.6 mm(i.d.)，内装粒径3.5 μm 填充物；流动相：甲醇(A)-乙腈(B)-0.1%磷酸水(C)(表1)；流速：1.0 mL/min；柱温：25 ℃；检测波长：250 nm；进样体积：5 μL。在上述色谱条件下，噻酮磺隆、环丙磺酰胺、砜嘧磺隆和碘甲磺隆钠盐的保留时间约为12.9、14.4、19.5、27.1 min。图1 为52%砜嘧磺隆·碘甲磺隆钠盐·噻酮磺隆·环丙磺酰胺WG 典型色谱图。

图1 52%砜嘧磺隆·碘甲磺隆钠盐·噻酮磺隆·环丙磺酰胺WG 样品的高效液相色谱图

表1 梯度洗脱程序

1.4 测定步骤

1.4.1 标准溶液的配制

分别称取碘甲磺隆钠盐标样0.016 g、噻酮磺隆标样0.129 g、砜嘧磺隆标样0.125 g、环丙磺酰胺标样0.250 g(均精确至0.000 2 g)于100 mL 容量瓶中，加流动相超声溶解并稀释至刻度，过滤摇匀备用。

1.4.2 试样标准溶液的配制

准确称取试样1.000 g (精确至0.000 2 g)，于100 mL 容量瓶中，加流动相超声溶解并稀释至刻度，过滤摇匀备用。

1.4.3 样品测定

在上述色谱条件下，待基线稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值，直至相邻2针峰面积变化小于0.5%时，按标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

1.4.4 计算

将测得的2 针试样溶液及试样前后2 针标样溶液中砜嘧磺隆、碘甲磺隆钠盐、噻酮磺隆和环丙磺酰胺的峰面积进行平均，试样中砜嘧磺隆、碘甲磺隆钠盐、噻酮磺隆和环丙磺酰胺的质量分数X(%)按式(1)计算：

式中：A1为标样溶液中碘甲磺隆钠盐(或噻酮磺隆/砜嘧磺隆/环丙磺酰胺)峰面积的平均值；A2为试样溶液中碘甲磺隆钠盐(或噻酮磺隆/砜嘧磺隆/环丙磺酰胺)峰面积的平均值；m1为碘甲磺隆钠盐(或噻酮磺隆/砜嘧磺隆/环丙磺酰胺)标样的质量(g)；m2为试样的质量(g)；P为标准品中碘甲磺隆钠盐(或噻酮磺隆/砜嘧磺隆/环丙磺酰胺)的质量分数(%)。

2 结果与讨论

2.1 检测波长的选择

分别对砜嘧磺隆、碘甲磺隆钠盐、噻酮磺隆和环丙磺酰胺进行紫外全波长扫描，得到最大吸收波长分别在254、228 nm。综合考虑各有效成分及安全剂的质量比，选择250 nm 作为检测波长，此时各成分有较强的吸收，流动相无吸收且助剂紫外吸收较弱。

2.2 流动相的选择

在对52%砜嘧磺隆·碘甲磺隆钠盐·噻酮磺隆·环丙磺酰胺WG 各成分检测分析中，通过不断调整流动相中甲醇、乙腈和0.1%磷酸水的配制比例，观察峰型变化和保留时间，依次进行筛选，结果发现当流动相为表1 中梯度洗脱程序时，分离效果最佳，色谱峰峰形尖锐，出峰时间合理，满足分析要求。

2.3 线性相关性测定

分别配制不同质量浓度的标准品溶液，按照1.3 节色谱测定条件进行测定。以质量浓度为横坐标、以峰面积为纵坐标绘制曲线，结果发现待测各成分的质量浓度与其响应值之间呈现出良好的线性关系，即，砜嘧磺隆质量浓度在89.91～164.30 mg/L之间，回归方程为y=5.469 4x-7.612 3，相关系数为0.999 5；碘甲磺隆钠盐质量浓度在15.23～35.30 mg/L之间，回归方程为y=8.816 3x-3.779 3，相关系数为0.999 6；噻酮磺隆质量浓度在88.42～159.64 mg/L 之间，回归方程为y=5.897 9x+68.193，相关系数为0.999 5；环丙磺酰胺质量浓度在158.62～317.53 mg/L之间，回归方程为y=4.2405x-135.16，相关系数为0.999 7。

2.4 准确度的测定

在已知含量的52%砜嘧磺隆·碘甲磺隆钠盐·噻酮磺隆·环丙磺酰胺WG 中，分别加入一定量的砜嘧磺隆、碘甲磺隆钠盐、噻酮磺隆和环丙磺酰胺标样，按1.3 节色谱测定条件进行测定，计算平均回收率，结果见表2。可见，平均回收率为99.52%～99.91%，说明测量结果与真实值之间一致程度高，准确度较高。

表2 准确度测定

2.5 精密度的测定

将各样品在1.3节色谱测定条件下平行测定5次，结果见表3。砜嘧磺隆、碘甲磺隆钠盐、噻酮磺隆和环丙磺酰胺的标准偏差分别为0.04、0.01、0.04和0.03，变异系数分别为0.32%、0.69%、0.28%和0.12%。多次重复测定同一量时各测定值之间彼此相符合的程度较高、随机误差较小。

表3 精密度测定

3 结论

本文建立了可以同时检测52%砜嘧磺隆·碘甲磺隆钠盐·噻酮磺隆·环丙磺酰胺WG 中有效成分砜嘧磺隆、碘甲磺隆钠盐、噻酮磺隆及安全剂环丙磺酰胺的高效液相色谱分析方法，具有线性关系良好、准确度和精密度高且简单快速、准确、分离效果好等优点，可用于该复配剂型的快速准确质量控制检测。