羊常见寄生虫病诊断试验及相应有效防控措施

李 艳

羊常见寄生虫病包含类型较多而且比较复杂，这不仅对羊的生长发育和生产性能产生不良影响，还会严重危害人体健康。因此，加强对羊常见寄生虫病的防治具有重要意义。不过在实际工作中，由于各种原因导致一些地区或养殖场的羊群感染了寄生虫病而没有得到及时有效的诊治，给养羊业造成了不小的经济损失。本文以青海省海北州门源回族自治县为例，对羊常见寄生虫病展开诊断，并提出相应的治疗措施。

一、材料与方法

1、试验材料

①调查对象

为了更好地了解当前的养殖状况，我们在2018 年1 月到2019 年12 月期间，对一年内没有接受过驱虫治疗的30 只羊，以及其他60 只羊，分别进行了编号标记。此外，我们还在每月的10 日到15 日期间，通过直肠釆粪和静脉采血的方法，对虫卵的数量进行了动态监测，并对其进行了血清抗体检测。

②试验器材

这些工具包括：玻璃容器、滤纸、滴管、离心机、恒温培养箱、显微镜、烧杯、培养皿、小木棍、铜筛或多层纱布、虫卵计数仪、解剖刀、搪瓷盘、镊子、手术剪、平皿和挑虫针。

2、调查方法

①粪便检查

在每个月的早晨，我们会收集羊的新鲜粪便，并将其标记在纸上，然后运送到实验室。我们会使用沉淀法、饱和盐水漂浮法、毛蚴孵化法和贝尔曼氏法来评估它们的健康状况，并根据这些结果来决定评估标准。

将10g 的粪便样本放入一个容器，加入适量的水，搅拌均匀，将容器的水加到10～20 倍，在室温下静置20min，然后将上层的清液倾掉，重复这一步骤，直到上层的清液变得透明，最后将一定数量的沉淀物滴在显微镜下，以检测比重超过水的虫卵。

将10g 的粪便样本放入烧杯中，加入10～20 倍的饱和盐水，混合均匀，然后把混合液过滤到漂浮瓶中，使其略微超出瓶口，然后把载玻片放在瓶口，确保没有任何气泡，在室温下静置20min，最后快速把载玻片拿起来，翻转，以此来检测比重超过饱和盐水的虫卵。

从粪便样本中取出10g，放入烧杯中，按照上述沉淀方式，将其混合，然后倒入孵化瓶，再用30℃的温水加到瓶颈处，放置在25～28℃的环境中，让其受到充足的光照，每隔1h、3h、5h，对孵化过程的结果进行观察，为了更好地观察，应当使用黑色背景，并朝着光源，检查1cm 水域内是否存在快速直线移动的小白点（如针尖大小、菱形、乳白色或半透明）。通过这种方法，我们可以发现许多寄生虫，如血吸虫和毛蚴。使用乳胶管将漏斗和试管相连，在漏斗内放置粪筛，然后将其悬挂在架子上，再倒入40℃的温水，直到达到中心，然后把被检测的粪样放置1～3 小时，使得大多数的幼虫能够移动到试管的底部，最后把试管的上层液体抽走，取出管底的沉淀物，进行显微镜检查，最终从粪便中分离出幼虫。

②体外检查法

采用综合的临床表现、触觉感受以及局部显微镜检查，我们可以有效地检测出羊只身上的寄生虫，如螨、蝇蛆等。

③剖检法

对待剖羊只进行详细的编号，并对它们的全身进行蠕虫学剖检，以确定每个器官内的虫体和数量，然后将样本浸泡在75%的酒精溶液中，对吸虫和绦虫进行染色，对其他的则采用正确的方式处理，最终对检测结果进行统计。

④血清学检测

每月，我们都会使用Dot-ELISA 三联诊断试剂盒（羊肝片吸虫、东毕吸虫和捻转血矛线虫）对每只羊进行血清学检测，以确保它们的健康状况。

二、结果与分析

羊的寄生虫种类繁多，包括体内寄生虫、体外寄生虫以及绦虫34 种，其中以牦牛莫尼茨绦虫、仰口裂头蚴、班氏丝虫三种为常见种类，而且还可能出现其他种类的寄生虫，如捻转血矛线虫、细颈囊尾蚴等。羊的健康受到了寄生虫的严重威胁，它们会侵入人体的肠道，造成腹泻和消化不良，并且会影响它们的摄食量和饲料的使用效率。此外，它们还会侵入人体的肌肉组织，造成贫血、消瘦甚至死亡。寄生虫病在当地羊的饲养管理水平相对落后，加上当地农牧民群众缺乏科学知识和技术指导，使得寄生虫病在当地羊的传播蔓延更加迅速，从而导致肝炎、肝硬化等症状的发生。因此，加强对该地区羊寄生虫病的监测和预防工作至关重要，以确保羊群健康。

三、羊寄生虫病的诊断

1、寄生虫的PCR 检测

PCR 检测可以准确地识别寄生虫的种类和感染程度，操作简单方便，具有极高的实际应用价值。然而，它也存在一些局限性，比如无法直接从粪便中提取虫卵，应通过离心处理才能获得更加纯净的虫体。核酸等温扩增技术（ITS）具有极高的灵敏度和快速性，它不仅可以取代传统的PCR，而且还可以用于定性分析虫卵，从而提供更加准确的结果。例如，通过利用hda、remax 和pcr 三种不同的等温扩增技术，如利用解旋酶、限制性内切酶和聚合酶链式反应，能够有效地检测出虫卵的存在。通过使用特定的酶，可以在特定的温度条件下对待测样品中的基因组进行分析，并使用合适的引物和探针对其进行扩增，以实现研究目标。

另外，高通量测序技术的快速发展也为寄生虫的快速和高效检测提供了新思路。目前，已经有多种方法被应用到寄生虫的快速检测上。其中包括：第一，通过使用特定的核酸提取试剂盒，可以从样本中提取出基因组DNA。第二，通过巢式扩增技术来获得这些DNA。第三，通过实时荧光定量扩增技术来获得这些DNA。第四，通过多重扩增技术来获得这些DNA。虽然这些方法各有其优势和不足，但它们都可以满足寄生虫检测的需求。随着科学技术的发展，多通量测序（Multiplex Sequencing）已成为一种先进的分子生物学技术，它的优势在于灵敏度极高、特异性极强、操作简单易行，使其成为一种理想的病原体检测手段。基于MLVA 技术，可以有效地利用16S、gyrB、rpoE 和ITS 序列作为扩增位点，结合合理的引物配置和精确的反应条件，提升了它们的特异性和灵敏度。

2、体液游离寄生虫DNA 在诊断中的应用

DNA 分子在人体内可以通过血液、尿液或其他方式被检测到，这些分子包括血型抗原、抗凝血因子、补体系统和免疫球蛋白。此外，人类和动物的身体也可以检测到一些寄生虫的核酸，但这些数量非常有限。由于其高度的保守性，DNA 基因在诊断寄生虫感染方面发挥着重要的作用，目前已经发现了多种不同种类的寄生虫，包括弓形虫、隐孢子虫、蛔虫、鞭毛虫、阿米巴原虫等，这些基因都可以用来进行检测。“虫源性”（parasitic）DNA是指从昆虫的身上分泌出来的“虫源性”DNA，它们是昆虫的身体内部的组成部分，经过昆虫的消化和吸收，最终形成的“内源性”（endogenous）DNA 是昆虫的身体内部的组成部分。这项先进的技术能够迅速、精准地识别出宿主体内的寄生虫，并且能够根据患者的血液、血清、尿液等样本，准确评估宿主的感染情况，为临床提供更加精准的治疗建议。这种先进的技术拥有极强的特异性和灵敏性，可以准确地检测各种寄生虫，如疟原虫、弓形虫、蛔虫，并且已经被广泛地应用于临床实践和流行病学研究。

四、羊寄生虫病治疗方法

1、体内寄生虫病

在治疗体内寄生虫时，首先需要确定病原体的种类，然后根据病原体的特性选择合适的驱虫药物。常见的驱虫药物包括ABZ、LEM、IPM 和PYD，其中阿苯达唑的效果最佳。例如，鼻蝇蛆病可能会在鼻腔内繁殖，因此可以使用阿苯达唑来控制它。如果它在口腔中繁殖，则需要使用左旋咪唑或阿苯达唑。如果它在肺部繁殖，则需要使用吡喹酮来控制它。当羊患上严重疾病时，它们可能会出现打喷嚏、咳嗽和流眼泪等症状。在这种情况下，注射伊维菌素和地塞米松是一种缓解方法。为了有效地治疗这种疾病，建议采取两种不同的方法：肌肉注射和静脉滴注。建议将注射点放置在羊的后臀部，最佳的注射时机是傍晚或清晨，每次注射的剂量建议控制在0.5mL，并且要持续注射3d。静脉滴注是一种有效的治疗方式，它需要将药剂注射到血管内，通常在一次注射的1～2mg 的剂量内，持续滴注4 小时。此外，还有其他的治疗方法，如使用口服药物，如敌百虫，按照0.6%的浓度进行配制，每天两次，连续使用7 天。

2、体外寄生虫病

与体内寄生虫病相比，体外寄生虫病更加普遍，它们的种类多样，从螨、虱子、蜱虫等，都能够侵入人体，给人们带来极大的威胁。虽然体外寄生虫的治疗效果可以被直接观测，但它们的病因仍有待进一步研究，只有经过实验室检测，才能够准确地诊断出病因，从而采取有针对性的治疗措施。体外寄生虫的种类众多，每个物种都有自己独特的特征，这就决定了它们的治疗方式各不相同。比如，羊蜱属于节肢动物门蛛形纲蜱目，而羊螨属于蛛形纲蜱科，这两者之间的区别就显得尤为明显。这两种寄生虫都能够导致羊只出现瘙痒症状，如果不能及时发现，可能引发更为严重的后果。由于这种寄生虫的传播速度极快，一旦发现，就会导致整个养殖场的羊群受到严重的危害，甚至危及人类的健康。因此，为了防止病毒的蔓延，最佳的治疗方法就是采用灭虫丁粉药物，它既可以有效地消灭寄生虫，又不会给周边的环境带来任何污染。根据羊的体重，药物的使用量应恰当，一般建议10mg/kg，并且至少要持续喷洒3 次，以获得最佳疗效。

五、羊寄生虫病预防措施

1、早期驱除病虫害

首先，对羊体内寄生虫进行预防性驱虫，这是一种比较经济实惠而又行之有效的方法。其主要包括以下几个方面：为了保护羊的健康，建议在春秋两季分别对它们进行驱虫。此外，在春末夏初季节，还建议给它们投放阿苯达唑、吡喹酮等驱虫药。另外，定期清理圈舍内的粪便，并将其统一发酵，然后放入农田中，以减少粪便中的虫卵数量。其次，为了保证放牧的安全，建议不要去那些容易受蜱叮咬的地方。同时，也需要密切关注羊的健康情况，如果出现问题，立即采取适当的措施来解决。最好将驱虫工作集中在下半年，这样能够更好地达到预期的效果。再次，为了防止寄生虫疾病的发生，应加强对动物的饲养管理，并且要改善它们的环境条件，以便在根本上阻止它们的繁殖。最后，还需要重视药物使用问题，严格按照说明书规定剂量用药，切不可盲目加大用量或增加服药次数。

2、水源管理

羊的大多数寄生虫都是通过外部环境感染的，因此做好水源管理工作至关重要。首先，为了确保饮用水的安全性，应确保它是干净、卫生的，没有任何杂质或污染物。此外，还需要定期更换水槽中的水，以防止细菌、病毒等微生物的滋生，从而避免寄生虫病的发生。为了确保饮用水的安全性，相关人员应定期进行检测。特别是在夏季高温季节，应特别注意饮用水的温度，以防止寄生虫卵的死亡。同时，也要注意饮用水是否被粪便所污染，如果有，会使得幼虫发育速度加快，进而引起疾病暴发。最后，为了保护水质，相关人员应定期更换水源，以防止寄生虫对水质造成影响，降低发病率。此外，还应定期对水源进行消毒处理，以杀灭水中可能存在的病原体，减少疾病传播途径。具体来说，可以使用漂白粉或生石灰水浸泡水源，然后将其倒入池塘内，这样既可以杀死水中的寄生虫，又不会给人们带来危害，一举两得。

3、治理粪污

粪便污染严重，它们包括寄生虫、细菌、病毒、真菌等，这些污染物可能会对动物的健康造成严重的危害。因此，养殖户应采取措施，加强对动物粪便的管控，防止它们滋生出传染性疾病。首先，为了保证养殖业的健康发展，养殖户应在每天早晨喂食前清理粪便，并将剩余的饲料残渣进行发酵处理。这样不仅可以消除饲料中可能携带的寄生虫，还能提高饲料的利用率。其次，为了保证动物的健康，养殖户应定期清理和消毒圈内的环境。这包括及时处理粪便和垃圾，避免蚊蝇繁衍。在一些特殊的区域，比如角落，可以使用杀虫剂来控制它们的活动，或者使用苍蝇拍来驱散它们。最后，如果环境允许，养殖户应尽量选择一种有效、安全的除臭剂，因为这种产品可以有效防止气体污染，避免引发呼吸道疾病。此外，还可以采取一些有效的化学处理措施，比如利用氧化反应来消灭害虫卵和幼虫，从而达到有效控制害虫的目的。

4、抗性基因筛查

研究寄生虫耐药性基因的热点已经变得越来越明显，目前已经有多种方法可以用来检测和鉴定虫体是否携带耐药基因，其中包括PCR 技术、DNA 测序法以及蛋白质印迹法等，这些技术可以有效地帮助更好地防控寄生虫。然而，这些方法存在一些缺陷，例如成本高昂、耗时较长、操作繁琐等。相比之下，基于核酸扩增的Sanger 双脱氧末端终止法则克服了这些缺陷，具有简单快捷、灵敏度高等优点，可以用于多种寄生虫的检测。Pfcrt 基因在恶性疟原虫的分离株中表现出稳定的表达，并且可以作为一种有效的标记，用来区分感染者和未感染者。在带科绦虫六钩蚴宿主细胞染色体上，pfcrt 基因的表达可以通过三种方式实现：一是由5 段非编码区组成的保守区域，另一个是由10 个核苷酸碱基构成的开放阅读框，第三个是由48 个核苷酸碱基构成的开放阅读框，这些基因的表达可以帮助更好地了解疟原虫的特征和功能。“CON”（Contig）、“RELATIVED”（Repeat）和“FUNGUM(Fragment)”是三个开放阅读框，它们涵盖了多种寄生虫的基因组信息，包括线粒体基因组、转录组学等，为Sub-I 提供了丰富的资料。通过对寄生虫特征及其与宿主间的关系的全面研究，可以制定出更加科学合理的防控措施，以有效地防治寄生虫病害。研究表明，尽管宿主的免疫系统可以抵御某些寄生虫的侵害，但是这种抵抗能力会因地域、气候等因素而发生变化。为了更好地了解这种变化，研究了三种常见的寄生虫（肝片吸虫、细颈囊尾蚴及捻转血矛线虫），并进行了比较，以探究它们的差异。通过对比分析，发现在不同的季节，绵羊体内三种寄生虫的感染率会发生显著的变化，这将为当地绵羊寄生虫病的防治提供重要的科学支持。

综上所述，羊寄生虫病的防治一直是畜牧业发展中亟待解决的难题之一。只有充分认识到寄生虫病的危害性，才能采取有效的综合防治措施，保障羊群健康生长。