湖南牡丹根腐病病原菌的分离鉴定及其拮抗菌的筛选

毛咪 吕长平 帅佳琪 石杨 秧拯民

摘 要：【目的】引发牡丹根腐病的镰刀菌属真菌种类繁多，且病害症状类似，难以判断。为了探明引发湖南地区牡丹根腐病主要病原菌的种类，并为牡丹根腐病的诊断与生物防治提供理论依据。【方法】从湖南农业大学园林花卉基地采集患病牡丹植株，采用组织分离法分离纯化病原菌，采用柯赫氏法则检验病菌分离物的致病性；分别以形态学、分子生物学方法对致病菌进行鉴定；采用平板对峙法对14 株前期从健康牡丹根茎部分离获得的内生细菌菌株进行抑菌性筛选。【结果】在对分离所获12 株病原真菌分离物的致病性的检测中发现，其中的5 株在PDA 平板上的侧根变黑腐烂且其周围菌丝生长旺盛，其致病性均强；将此5 株致病菌置于PDA 平板上培养7 d 后观察发现，其菌落呈圆形，颜色呈灰白色，气生菌丝较密集且呈革质胶状；致病菌菌丝中含有大量的大、小型分生孢子，大型分生孢子呈镰刀形，具有3 ～ 5 个隔膜，小型分生孢子呈卵形或肾形，具有0 ～ 1 个隔膜；厚垣孢子呈球形且多为间生状。结合运用分子生物学方法，基于ITS 序列分析，构建了5 株致病菌的系统发育树，5 株分离物全部被鉴定为茄病镰刀菌Fusarium solani。平板对峙培养结果表明，14 株内生细菌菌株中有9 株能拮抗茄病镰刀菌，其中编号为MRX2-1 的细菌菌株其拮抗效果最佳，达到了52.78%；基于16S rRNA 基因序列对此株菌株的进一步分析结果表明，编号为MRX2-1 的拮抗菌与Bacillus amyloliquefaciens（HM107808.1）聚于同一分支中，其相似度高达99% 以上。【结论】初步鉴定结果表明，湖南地区牡丹根腐病的主要病原菌为茄病镰刀菌，最佳拮抗菌为解淀粉芽孢杆菌。

关键词：牡丹根腐病；茄病镰刀菌；内生拮抗细菌；鉴定與筛选；湖南地区

中图分类号：S685.11 文献标志码：A 文章编号：1003—8981（2023）02—0290—09