红枣多糖对仔猪生长性能、抗氧化和免疫能力的影响

2023-11-03朱方超

猪业科学 2023年10期

朱方超

（泰州医药高新技术产业开发区（泰州市高港区）畜牧兽医站，江苏泰州 225326 ；扬州大学农学院，江苏扬州 225009）

植物提取物是动物饲料中重要的外源添加剂。随着农业农村部第194 号公告明令禁止抗生素在动物生产中使用，植物提取物的市场规模迅速扩大。植物提取物可以动物的生产性能和免疫力，在动物生产中正逐渐扩大应用范围。仔猪养殖是生猪养殖过程中的重要环节，仔猪断奶后容易产生断奶应激。断奶后仔猪缺少来自母体的免疫球蛋白的补充，免疫力降低，会引起食欲不振、腹泻等状况，对后续的生长产生严重影响。补充抗生素一直是维持仔猪生长安全的重要手段，抗生素的禁用使仔猪养殖面临巨大挑战，寻找抗生素替代品迫在眉睫。

红枣是鼠李科枣属植物，具有丰富的营养价值。红枣富含维生素和多种活性物质，在中医药典中是常见的一味中药。红枣主要在新疆地区种植，红枣产量逐渐递增，2019 年新疆地区的红枣产量已经高达270 万t，模型预测2023 年红枣产量将达到645 万t。由于红枣的储存不便和产量递增，红枣将面临供过于求。对红枣的进行开发利用是解决红枣囤积的关键。红枣作为一味中药，得益于丰富的维生素和各种活性物质，红枣具有了增强免疫力的功能。多糖是重要的一种植物次生代谢物，具有抗氧化、抗炎和增强免疫力的功能。在抗生素禁用的环境下，用多糖提高动物的机体免疫力是一个重要的研究方向。多项研究表明植物多糖可以提高动物的免疫力。红枣多糖提取方式简便，热水浸提即可获得红枣多糖，非常适用于经济不发达的地区。在红枣产量剧增的情况下，红枣开发刻不容缓，红枣多糖将会在动物生产中崭露头角。但目前关于红枣多糖在动物生产中的应用较少，缺乏足够的科学依据支撑红枣多糖的发展。本文以红枣多糖为试验材料，断奶仔猪作为试验动物，研究红枣多糖对断奶仔猪生长性能、抗氧化和免疫能力的影响，为红枣多糖的利用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

红枣多糖使用热水浸提法进行提取，料液比为1 ∶10，提取温度80℃，浸提3 h，利用淀粉富集多糖，之后浓缩干燥获得红枣多糖。硫酸苯酚法测定多糖含量为35%，其余为淀粉64%，1%为黄酮和皂苷等物质。

1.2 试验设计

选取体重相近的35 日龄的仔猪40 头，仔猪品种为“杜长大”。将这批仔猪随机分成4 组，每组10头。对照组饲喂基础日粮；低浓度组饲喂添加0.25%红枣多糖的基础日粮；中浓度组饲喂添加0.5%红枣多糖的基础日粮；高浓度组饲喂添加1%红枣多糖发基础日粮。基础日粮成分见表1。

表1 试验日粮组成

表2 结肠基因序列

1.3 试验饲养管理

试验在泗洪县朱立俊生猪养殖场进行。饲养场地提前消毒杀菌。仔猪先进行一周适应性饲养，正式饲养期五周，自由采食和饮水。

1.4 指标测定及方法

1.4.1 生长性能测定

试验仔猪在正式饲养试验期的第一天和最后一天进行空腹称重。每天对投入料和剩料进行称重统计。计算日平均采食量、平均日增重和料重比。

1.4.2 血清和肝脏指标测定

饲喂期最后一天，仔猪采血后颈部放血处死，随后进行解剖。血液静置2.5 h 后3 500 rpm/min 离心5 min，取上层血清于-20℃保存。肝脏和结肠样品液氮速冻后-80℃保存。

使用南京建成生物工程研究所有限公司的超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）试剂盒测定抗氧化指标，使用免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）试剂盒测定免疫球蛋白含量。

使用天根生化科技（北京）有限公司的动物组织RNA 提取试剂盒、反转录试剂盒和荧光定量PCR试剂盒测定结肠ZO-1、Occludin 和Claudins 的mRNA 相对表达量。

1.5 数据处理与分析

试验数据采用SPSS 软件进行单因素方差分析，以P＜0.05 为差异显著。试验结果用“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 红枣多糖对生长性能的影响

由表3 可知，高剂量组和中剂量组的末重、平均日增重和平均日采食量显著高于对照组和低剂量组（P＜0.05）。高剂量组和中剂量组的料重比显著低于对照组和低剂量组（P＜0.05）。

表3 红枣多糖对断奶仔猪生长性能的影响

2.2 红枣多糖对血清抗氧化能力的影响

表4结果显示中剂量组和高剂量组的SOD、GSH-Px 和CAT 活性显著高于对照组和低剂量组（P＜0.05）。低剂量组的GSH-Px 活性显著高于对照组（P＜0.05）。中剂量组和高剂量组的MDA 含量显著低于对照组和低剂量组（P＜0.05）。

表4 红枣多糖对仔猪血清抗氧化能力的影响

2.3 红枣多糖对肝脏抗氧化能力的影响

表5结果表明，高剂量组SOD和CAT 活性显著高于中低剂量组和对照组（P＜0.05）。中剂量组和高剂量组的GSH-Px 活性显著高于对照组（P＜0.05）。高剂量组的MDA 含量显著低于对照组和低剂量组（P＜0.05）。

表5 红枣多糖对仔猪肝脏抗氧化能力的影响

2.4 红枣多糖对血清免疫指标的影响

表6结果显示中剂量组和高剂量组的IgA 含量显著高于对照组（P＜0.05）。随剂量增加，IgG 和IgM 含量上升。高剂量组IgG 和IgM含量显著高于其余三组（P＜0.05）。TNF-α 含量随剂量升高而下降，对照组TNF-α 含量显著高于高剂量组（P＜0.05）。

表6 红枣多糖对仔猪血清免疫能力的影响 g/L

2.5 红枣多糖对结肠紧密连接蛋白的影响

图1结果显示随红枣多糖添加剂量升高，结肠紧密连接蛋白基因ZO-1、Occludin 和Claudin-3 的mRNA 相对表达量呈上升趋势。高剂量组的ZO-1 相对表达量显著高于中低剂量组和对照组（P＜0.05）。红枣多糖添加组Occludin 的mRNA 相对表达量显著高于对照组（P＜0.05）。中剂量组和高剂量组的Claudins-3 相对表达量显著高于对照组和低剂量组（P＜0.05）。

图1 红枣多糖对结肠紧密连接蛋白的影响

3 讨论

仔猪断奶后缺少来自母体的免疫球蛋白补充，对饲料还没有完全适应，常常会发生腹泻、采食量下降的状况，这种情况统称为断奶应激。严重时甚至会导致仔猪死亡，产生经济损失。因此断奶仔猪养殖是生猪养殖的重要阶段。多糖在动物中已经有多项相关研究。杜淑慧在21 日龄的仔猪日粮中添加0.2%和0.4%的黄芪多糖，显著降低了仔猪的平均日增重，降低了料重比。郑梦荷在犊牛日粮中添加枸杞多糖，犊牛的体重和日增重显著提升，犊牛对饲料的消化水平也显著提高。张生楠发现肉仔鸡的日粮中添加750、1 000 mg/kg 的黄花蒿多糖，肉仔鸡的平均日增重极显著提高，料重比显著降低。本研究中红枣多糖添加量为0.5%和1%时，仔猪的平均日增重和平均采食量显著升高，料重比显著降低。这是因为多糖具有保护幼龄肠道功能的作用，促进幼龄动物的肠道发育和对营养物质的吸收。红枣多糖还具有诱食剂的作用，促进了动物的采食。结论表明0.5%和1%的红枣多糖添加量能提高仔猪的生长性能。

仔猪断奶后产生的疾病通常是由于仔猪的免疫力下降和体内抗氧化能力降低引起的。提高仔猪的机体免疫力和体内抗氧化能力有助于仔猪抵抗疾病。多项研究表明植物多糖能够提高动物的抗氧化能力和免疫力。张建明在长江鲟幼鱼日粮中添加0.2 g/kg 黄芪多糖，发现幼鱼血清相关抗氧化指标得到显著改善，血清IgG、IgM、C3、C4、总蛋白（TP）含量及碱性磷酸酶（AKP）、溶菌酶（LZM）活性显著提高，黄芪多糖显著提高了长江鲟幼鱼的抗氧化能力和免疫力。吕尚揆的研究表明400 mg 葛根多糖提高了犊牛的抗氧化能力，犊牛血清中CD4、分泌型免疫球蛋白（sIgA）、IgA 和IgG 含量分别提高了2.47%、4.05%、8.91%和6.11%。本研究结果表明红枣多糖添加量为0.5%时，仔猪血清SOD、CAT、GSH-Px 活性显著升高，MDA 活性显著降低。红枣多糖添加量为1%时，仔猪血清和肝脏SOD、CAT、GSH-Px 活性均显著升高，MDA 活性显著降低。仔猪血清IgA、IgG、IgM 的含量随红枣多糖添加量增加。多糖在体外以剂量依赖式对1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）和羟基等自由基具有抗氧化活性，在仔猪体内也可以清除仔猪体内的自由基，提高仔猪的抗氧化能力。仔猪抗氧化能力的提升也有助于仔猪免疫器官的发育，从而达到提高免疫力的作用。结论表明红枣多糖具有提高仔猪抗氧化能力和免疫力的效果，红枣多糖添加量为1%时效果最好。

仔猪断奶后引起的腹泻与肠道屏障紧密相关。仔猪肠道发育不完善，幼龄时容易受到病菌入侵，导致肠道通透性增加，从而降低对营养物质的吸收，并引起腹泻等症状。杜淑慧研究表明仔猪采食黄芪多糖腹泻率显著降低。刘凯伟也发现黄芪多糖降低了羔羊的腹泻频率。本研究中并未发现仔猪腹泻的症状，但这可能是因为仔猪样本数较少导致的。本试验研究了仔猪肠道紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-3 的表达量，结果表明随红枣多糖添加量的提高，ZO-1、Occludin 和Claudin-3 的表达量上调，这表明仔猪的肠道通透性降低，仔猪的肠道屏障得到了保护，有助于避免腹泻的发生。因此红枣多糖与黄芪多糖具有相同的功效，具有保护肠道屏障的功能，红枣多糖添加了为1%时保护效果最好。