四川遂宁地区呼吸道主要分离菌分布和耐药性监测

黎 昆,杨 雪,李 龙,王明霞,刘红萍,支 岚,高 灿,王 洁

遂宁市中心医院检验科,四川遂宁 629000

社区获得性呼吸道感染(CARTI)是导致重大疾病和死亡的最常见感染之一,引起CARTI最常见的病原体是流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和卡他莫拉菌,有研究表明,全国范围内肺炎链球菌的青霉素耐药性、流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌的产β内酰胺酶比例呈逐年上升趋势,影响临床初始抗菌药物的经验治疗[1-3]。本研究回顾性分析了2018-2020年本院呼吸道分离常见的3种病原菌,即流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和卡他莫拉菌体外药敏试验结果,以期为临床经验用药提供参考依据,现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集2018年1月1日至2020年12月31日本院临床送检呼吸道标本分离获得的流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、卡他莫拉菌(剔除重复菌株)773株。其中肺炎链球菌355株,流感嗜血杆菌357株,卡他莫拉菌61株。本研究经本院伦理委员会审核批准。

1.2仪器与试剂 流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌的药敏培养基均使用HTM琼脂,肺炎链球菌的药敏培养基使用含有5%脱纤维羊血的MH琼脂[4],上述培养基均购自广州迪景微生物科技有限公司。K-B法药敏试验纸片和青霉素E试验(E-test)条均购自温州市康泰生物科技有限公司。嗜血杆菌和布兰汉球菌药敏试剂盒(比色法ATB HAEMO)购自法国生物梅里埃公司。

1.3方法 参照2020年美国临床和实验室标准化协会(CLSI)[4]推荐的药敏试验方法进行检测,卡他莫拉菌药敏折点判读参考CLSI-M45,质控菌株为肺炎链球菌ATCC49619和流感嗜血杆菌ATCC49247。采用头孢硝噻吩纸片(购自重庆庞通医疗器械有限公司)检测流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌的β内酰胺酶。采用E-test条测定不敏感肺炎链球菌最低抑菌浓度[4]。年龄组分类标准[5]:未成年人为<18岁,成年人为≥18岁。

1.4统计学处理 采用WHONET5.6软件进行数据处理及统计分析。计数资料以例数或百分率表示,组间比较采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和卡他莫拉菌来源分布情况 流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、卡他莫拉菌门诊分离株分别占同种总分离菌株的84.9%、67.6%、85.2%;住院分离株分别占同种总分离菌株的15.1%、32.4%、14.8%。见表1。

2.2流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和卡他莫拉菌人口学分布情况 女性流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌检出率分别为58.5%、57.4%,男性流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌检出率分别为41.5%、42.6%,差异均无统计学意义(P>0.05);女性肺炎链球菌检出率(64.8%)高于男性的35.2%,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。未成年人流感嗜血杆菌和肺炎链球菌检出率均高于成年人,卡他莫拉菌检出率低于成年人,差异均有统计学意义(P<0.05)。

表2 流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和卡他莫拉菌的人口学分布情况[n(%)]

2.3流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和卡他莫拉菌季节分布情况 流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌春季分布比例分别为25.5%和31.1%、冬季为63.6%和37.7%,均高于夏季的5.6%和4.9%、秋季的5.3%和26.2%,差异均有统计学意义(P<0.05)。肺炎链球菌秋季分布比例为27.0%、冬季分布比例为37.7%,均高于春季的23.1%和夏季的12.1%,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和卡他莫拉菌季节分布情况[n(%)]

2.4未成年人和成年人对3种细菌的耐药率及敏感率比较 355株肺炎链球菌中未成年人分离出208株,成年人分离出147株;青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)检测出16株,青霉素中介肺炎链球菌(PISP)检测出13株,青霉素敏感肺炎链球菌(PSSP)检测出326株。肺炎链球菌对红霉素、克林霉素、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑均具有较高的耐药性,未分离出对万古霉素和利奈唑胺具有耐药性的肺炎链球菌。见表4。357株流感嗜血杆菌中未成年人分离出319株,成年人分离出38株。流感嗜血杆菌对氯霉素、四环素耐药率均低于10%,未分离出对头孢噻肟、美罗培南、左氧氟沙星具有耐药性的流感嗜血杆菌。见表5。61株卡他莫拉菌中未成年人分离出23株,成年人分离出38株,且卡他莫拉菌对所测抗菌药物均保持较高敏感性。见表6。

表4 分离自未成年人和成年人肺炎链球菌对抗菌药物的耐药率及敏感率比较(%)

表5 分离自未成年人和成年人流感嗜血杆菌对抗菌药物的耐药率及敏感率比较(%)

表6 分离自未成年人和成年人卡他莫拉菌对抗菌药物的耐药率及敏感率比较(%)

2.5流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌的β内酰胺酶检出情况 357株流感嗜血杆菌中未成年人、成年人分别检测出β内酰胺酶阳性株171、18株,阳性率分别为53.6%(171/319)、47.4%(18/38)。61株卡他莫拉菌中未成年人、成年人分别检测出β内酰胺酶阳性株17株、30株,阳性率分别为73.9%(17/23)、78.9%(30/38)。

3 讨 论

本研究结果显示,2018年1月1日至2020年12月31日本院分离的流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和卡他莫拉菌大部分来自门诊患者,提示本院呼吸道感染患者以社区感染为主。

流感嗜血杆菌是一种革兰阴性细菌,可导致各种气道黏膜感染和侵袭性疾病,如细菌性脑膜炎[6]。有研究表明,流感嗜血杆菌可通过黏附侵入呼吸道上皮细胞,从而长期定植于呼吸道内[7]。本研究结果显示,未成年人流感嗜血杆菌和肺炎链球菌检出率高于成年人,卡他莫拉菌检出率低于成年人,差异均有统计学意义(P<0.05),与刘策等[8]、吕志勇等[9]研究结果一致。幼儿鼻腔内无鼻毛,鼻黏膜弱而富于血管,易受感染,且气管和支气管的管腔狭窄,黏液分泌少,纤毛运动差,肺弹力组织发育差,易引起致病菌的蔓延[10]。老年人免疫系统功能下降,且患有基础性疾病,因此这两类易感人群需要重点关注。本研究中,流感嗜血杆菌季节分布比例分别为春季25.5%、冬季63.6%,均高于夏季的5.6%、秋季的5.3%,差异均有统计学意义(P<0.05)。与蒋小丽等[11]报道的四川简阳地区流感嗜血杆菌分布以春季、冬季检出为主相符。β内酰胺类抗生素目前常用于流感嗜血杆菌的临床治疗,在多个国家,这些经验性药物已被发现具有耐药性[12]。本研究结果显示,未成年人流感嗜血杆菌对氨苄西林的耐药率为53.6%,与中国细菌耐药监测网(CHINET)报告的59.7%相似,而成年人的50.0%低于CHINET报告的70.2%[13]。流感嗜血杆菌氨苄西林耐药率在一些地区为5%～67.9%[14]。其对氨苄西林的耐药性主要通过两种机制产生。一种涉及在流感嗜血杆菌中产生β内酰胺酶水解β内酰胺抗生素获得β内酰胺酶基因的菌株,另一种机制涉及β内酰胺酶阴性的氨苄西林耐药菌株,是ftsI基因突变引起青霉素结合蛋白3(PBP3)改变,导致β内酰胺酶抗生素对PBP3的亲和力降低,获得β内酰胺酶基因的菌株[15]。本研究中,流感嗜血杆菌对氨苄西林的耐药率与其β内酰胺酶阳性率相近,提示本地区流感嗜血杆菌对氨苄西林的耐药作用机制为β内酰胺酶水解抗菌药物作用。同时成年人和未成年人流感嗜血杆菌对甲氧苄啶-磺胺甲噁唑的耐药率分别为57.5%和74.2%,与其他研究结果的64.9%相似[16],提示磺胺类药物不适合作为治疗感染流感嗜血杆菌的经验用药。成年人株对头孢呋辛耐药率为36.8%,而未成年人株耐药率为36.1%,因此在选择第2代头孢菌素时要根据药敏试验结果,有针对性地进行治疗。未检出对头孢噻肟、美罗培南、左氧氟沙星的耐药菌株,提示本地区经验用药仍可选用第3代头孢菌素。

本研究结果显示,355株肺炎链球菌中未成年人检出208株,高于成年人的147株,这与既往流行病学调查数据一致[17]。β内酰胺类抗生素是治疗肺炎链球菌疾病的一线选择,但来自不同地区和国家的肺炎链球菌的β内酰胺类抗生素的耐药率存在较大差异[18]。本研究结果显示,PRSP占4.5%,肺炎链球菌对红霉素、克林霉素、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑均具有较高的耐药性,未分离出对万古霉素和利奈唑胺具有耐药性的肺炎链球菌。提示本地区治疗肺炎链球菌引起的感染时可以首选青霉素,不宜选用红霉素与甲氧苄啶-磺胺甲噁唑。同时女性检出率(64.8%)高于成年男性的35.2%,差异有统计学意义(P<0.05)。提示本地区女性较男性易感肺炎链球菌。但对男、女性肺炎链球菌疾病发病率差异尚有待于进一步研究。

本研究中,61株卡他莫拉菌对阿莫西林/克拉维酸敏感率为100%,提示本地区临床治疗卡他莫拉菌感染可首选阿莫西林/克拉维酸。61株卡他莫拉菌中未成年人、成年人分别检测出β内酰胺酶阳性株17、30株,阳性率分别为73.9%、78.9%。低于龚萍等[19]报道的86.8%。提示卡他莫拉菌产β内酰胺酶存在地区差异。

综上所述,目前尚不能将氨苄西林作为本地区流感嗜血杆菌感染的首选药物,青霉素仍对肺炎链球菌非脑脊液分离株保持较高的敏感性,治疗卡他莫拉菌可将阿莫西林/克拉维酸作为首选药物。在经验性抗感染治疗时需要考虑本地区病原菌的特殊性,要继续做好细菌耐药性的监测工作,有助于科学管理和合理应用临床抗菌药物,减少耐药菌的产生。