子宫内膜癌患者VEGF、HE4、miR-93表达特征及检测价值研究

张春瑜, 黄 倩, 周 琦

(新疆医科大学附属肿瘤医院妇外四科, 乌鲁木齐 830011)

子宫内膜癌为女性生殖系统多发恶性肿瘤,其发病率占妇恶性科肿瘤疾病的20%～30%,早期治疗可得到良好效果,但多数患者疾病初期缺乏特异性临床表现,确诊时往往已进展至中晚期,预后欠佳,早期对子宫内膜癌进行准确的诊断评估已成为研究热点[1-2]。血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、人附睾蛋白4(Human epididymal protein 4,HE-4)、微小核糖核酸(Micrornas-93,miR-93)均与恶性肿瘤的发展有密切关联系,其参与了肿瘤细胞的转移、浸润及侵袭等过程[3-5]。本研究探究子宫内膜癌患者VEGF、HE4、miR-93的表达特征及检测价值,现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料回顾性选取2021年3月-2022年6月新疆医科大学附属肿瘤医院妇外四科收治的53例子宫内膜癌患者临床资料为研究组,研究组患者年龄43～69岁,平均年龄(56.04±10.94)岁;根据分化程度进行病理分级:G1级11例,G2级28例,G3级14例;根据国际妇产科协会(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期:Ⅰ+Ⅱ期24例,Ⅲ+Ⅳ期29例;肌层浸润:≥1/2肌层31例,<1/2肌层22例;淋巴结转移17例,无淋巴结转移36例;绝经32例,未绝经21例。另选取同期收治的53例子宫肌瘤患者的临床资料设为对照组。对照组患者年龄41～69岁,平均年龄(55.32±11.28)岁;绝经34例,未绝经19例。两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经新疆医科大学附属肿瘤医医学伦理委员会审批,所有患者均签署知情同意书。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准 (1)研究组符合《子宫内膜癌诊断与治疗指南(2021年版)》[6]中子宫内膜癌诊断标准,对照组符合《子宫肌瘤的诊治中国专家共识》[7]中子宫肌瘤诊断标准,并经病理检查确诊;(2)知情同意本研究。

1.2.2 排除标准 (1)存在其他良恶性肿瘤者;(2)存在感染性疾病者;(3)存在生殖系统其他疾病者;(4)预计生存期<3个月者;(5)存在血液系统疾病者;(6)存在盆腔、输卵管、卵巢等肿瘤史者。

1.3 方法对照组与研究组患者均于入院后第2天晨起时抽取空腹静脉血5 mL,负压吸入无添加干燥试管,3 500 r/min离心15 min,取上清液,置于-80℃环境中储存待检。

1.4 指标测定

1.4.1 血清miR-93、VEGF与HE4水平的测定 采用美国ABI7500荧光定量PCR仪经荧光定量聚合酶链反应法测定血清miR-93水平;采用电化学发光分析仪(罗氏Cobas 601型)以电化学发光法测定血清VEGF与HE4水平;所有操作均严格遵循试剂盒说明书执行。

1.4.2 疾病状况的分类 (1)病理分级:通过病理学分为高、中、低分化级别(G1、G2、G3),低分化级别代表着癌细胞的恶性程度更高。(2)疾病分期:仅发生在宫体为Ⅰ期;病情进一步发展,侵犯子宫颈为Ⅱ期;病情进一步扩散,可以转移到附件、卵巢等部位为Ⅲ期;病灶发生远处转移为Ⅳ期。(3)肌层浸润:通过盆腔磁共振检查明确肌层浸润程度,根据病灶浸润情况分为≥1/2肌层与<1/2肌层。(4)淋巴结转移情况:经磁共振检查明确是否发生淋巴结转移。

1.4.3 预后情况 对所有患者进行随访管理,将病死、复发计入预后不良,其余计入预后良好。

1.4.4 观察指标 (1)测定研究组与对照组miR-93、VEGF与HE4水平。(2)测定研究组不同疾病状况(病理分级、疾病分期、肌层浸润、淋巴结转移情况)患者miR-93、VEGF与HE4水平。(3)分析miR-93、VEGF与HE4水平与子宫内膜癌疾病状况关联性。(4)记录研究组预后情况,将病死、复发计入预后不良,其余计入预后良好,比较不同预后者miR-93、VEGF与HE4水平。

2 结果

2.1 研究组与对照组血清miR-93、VEGF与HE4水平的比较与对照组比较,研究组miR-93、VEGF与HE4水平增高,差异有统计学意义(P<0.05),见表1。

表1 研究组与对照组血清指标水平比较

2.2 研究组不同疾病状况患者血清miR-93、VEGF与HE4水平的比较研究组不同病理分级、疾病分期、肌层浸润、淋巴结转移情况患者血清miR-93、VEGF与HE4水平差异有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 研究组不同疾病状况患者血清指标水平比较

2.3 研究组血清miR-93、VEGF、HE4水平与疾病状况关联性分析经Pearson检验表明,患者血清miR-93、VEGF、HE4水平与子宫内膜癌病理分级、疾病分期、肌层浸润程度、淋巴结转移情况呈显著正相关关系(P<0.05),见表3。

表3 研究组血清miR-93、VEGF、HE4水平与疾病状况关联性分析

2.4 研究组不同预后情况患者血清指标的比较研究组12个月随访期间病死6例(3例因肿瘤病灶大范围转移及扩散病死;3例因营养不良过度虚弱无法下床,长时间卧床致使脏器功能衰竭病死)、疾病复发13例,预后不良19例(6例病死、13例疾病复发)、预后良好34例(患者存活,且疾病无复发)。预后良好者血清miR-93、VEGF、HE4水平低于预后不良者,差异有统计学意义(P<0.05),见表4。

表4 研究组不同预后情况患者血清指标的比较

2.5 研究组血清miR-93、VEGF、HE4水平对子宫内膜癌预后预测价值分析绘制ROC曲线表明血清miR-93、VEGF、HE4水平联合检测对预测子宫内膜癌预后的AUC为0.952,大于miR-93、VEGF与HE4单独预测的0.848、0.813、0.811,且预测敏感度与特异度(84.20%、71.80%)高于miR-93(67.90%、61.20%)、VEGF(63.20%、59.00%)及HE4(58.60%、64.10%),见表5、图1。

图1 研究组血清miR-93、VEGF、HE4水平对子宫内膜癌预后预测的ROC曲线图

表5 研究组血清miR-93、VEGF、HE4水平对子宫内膜癌预后预测价值分析

3 讨论

子宫内膜癌病灶转移、浸润与血管新生关系密切,而VEGF具备促血管生成作用,可刺激微血管生成,促进肿瘤发病、浸润转移[8]。Berger等[9]研究指出,VEGF受体2的表达一般仅局限于血管内皮细胞,临床认为其是血管生成的驱动因素,且是调节内皮细胞迁移、增殖的重要信号。孙燕红等[10]研究结果表明,子宫内膜癌患者VEGF水平高于体检健康女性,且Ⅲ+Ⅳ期、低分化程度及淋巴结转移者VEGF水平更高。本研究结果也显示,研究组血VEGF水平高于对照组,且不同疾病状况患者VEGF水平具有明显差异,两者间存在显著相关性,与上述学者研究结果具有一致性,表明VEGF水平与子宫内膜癌的发病与进展相关,提示临床可以通过检测VEGF 水平对子宫内膜癌进行诊断及状况评估。VEGF可促进细胞有丝分裂,加速血管内皮细胞分化、增殖,调节血管生成,但子宫内膜癌病灶扩散、生成可造成血管新生,故患者VEGF水平异常增高;同时,VEGF过表达可通过增加血管通透性,致使肿瘤细胞传播,并使大量养分输送至肿瘤病灶,且VEGF能募集循环系统内皮前体细胞,促进肿瘤血管形成。

HE4为酸性蛋白家族重要成员,多分布于子宫内膜上皮、女性输卵管、输精管上皮、曲细精管、附睾,其是常用血清肿瘤标志物,且为妇科生殖系统恶性肿瘤重要标志物[11]。本研究结果显示,研究组HE4水平高于对照组,与张琴芬等[12]、何素丽等[13]研究结果一致,表明子宫内膜癌患者HE4呈高表达状态。子宫内膜病变包括子宫内膜不典型增生、复合增生、单纯增生、子宫内膜癌,研究指出,子宫内膜病变过程为进展性、持续性过程,自单纯增生发展为不典型增生、子宫内膜癌,故推测HE4在子宫内膜癌发病中具有重要作用。进一步探究发现,随着病理分级与疾病分期增高、肌层浸润程度增加和淋巴结转移,HE4水平呈增高趋势,两者间具有正相关关系,提示临床实际可通过监测HE4水平评估子宫内膜癌疾病状况,指导临床进行针对性治疗。

miRNA为19～24个核苷酸构成的一种单链非编码RNA分子,于多种恶性肿瘤中均呈异常表达,可参与肿瘤细胞的分化、增殖、凋亡等过程,miR-93为重要的miRNA类型,杨正勤等[14]研究结果显示,子宫内膜癌患者miR-93表达水平异常增高,且和淋巴结转移、肌层浸润深度、分化程度、疾病分期关系密切,其对淋巴结转移具有较高预测价值。周赞华等[15]研究也证实,子宫内膜癌患者miR-93水平异常增高,其参与了疾病病灶转移、肌层浸润、细胞侵袭,故推测其在子宫内膜癌发病与进展中具有重要作用。本研究中,研究组miR-93水平高于对照组,且不同病理分级、疾病分期、肌层浸润程度、淋巴结转移情况者miR-93水平增高幅度不同,两者具有显著相关性,进一步证实子宫内膜癌患者miR-93表达水平异常增高,其在肿瘤发病与进展中具有重要作用。

本研究还对不同预后子宫内膜癌患者VEGF、HE4、miR-93水平进行比较研究,结果显示,预后不良者miR-93、VEGF与HE4水平高于预后良好者,且ROC曲线分析提示上述指标均对子宫内膜癌预后预测具有一定的应用价值,且联合检测的AUC显著大于各指标单独检测,提示临床可根据上述指标水平对子宫内膜癌进行全面、综合评估,准确预测疾病预后,指导临床及时制定或调整干预方案,从而保证患者良好转归。

综上所述,子宫内膜癌患者VEGF、HE4、miR-93均呈高表达状态,其增高幅度与疾病疾病状况存在密切相关性,对子宫内膜癌的预后预测具有较高的价值,临床可联合检测VEGF、HE4、miR-93对疾病进行病情评估和预后预测。