葛根不同炮制品降血糖效果研究

郭永梅 王芳 杨宇秀

2 型糖尿病是一种代谢功能障碍疾病，可导致患者体内碳水化合物、脂肪和蛋白质代谢异常[1]。2型糖尿病以空腹和餐后高血糖为主要特征[2]。持续的高血糖会导致多种慢性并发症，包括糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变、糖尿病心血管病和糖尿病性肝病等[3～5]。目前，临床上治疗2 型糖尿病大多使用合成药物，如二甲双胍、阿卡波糖、罗格列酮等，但这些药物存在着耐药性和一些副作用，如低血糖、胃肠不适、变态反应等[6]。因此寻找高效、副作用少、耐药性低的抗高血糖药物是目前临床的迫切需求。

葛根是传统中草药，主要化学成分包括葛根素、大豆苷元、大豆苷和染料木素等[7]。葛根及其成分具有降血糖、调节血脂、降血压、抗炎等作用[8]。葛根煎剂可用于治疗发热、皮疹、麻疹、腹泻、头痛、胸痛、背痛、痢疾、偏瘫中风等[9]。葛根治疗糖尿病的历史可以追溯到2 000 多年前；含有葛根的草药配方对2 型糖尿病患者的血糖控制有一定的作用。当与降糖药或胰岛素联用时，葛根配方可增强药物的降糖和降脂作用。葛根生品和葛根配方可能通过激活多种机制发挥并增强机体抗糖尿病能力，如降低胰岛素抵抗、增加胰岛素分泌等[8]。中药炮制是中药制作的重要环节，对药物的功效有重要影响。据记载，葛根有醋制、煨制等多种炮制方法[10]。研究表明，葛根经过不同方法的炮制后，其主要成分总黄酮和葛根素等会发生显著变化；其中总黄酮含量依次为醋制品＞炒制品＞米汤煨制品＞生品[11]；葛根素含量依次为醋制品＞米汤煨制品＞生品[12]，而这些成分的改变必将影响葛根的药效。目前对葛根炮制品的降血糖效果的报道较少。本研究探究了葛根不同炮制品对高血糖的调节作用，为今后临床治疗2型糖尿病提供有效的药物治疗方法。

1 材料与方法

1.1 材料葛根药材购自江西省樟树市，经鉴定为豆科植物野葛的干燥根。四氧嘧啶购自北京索莱宝科技有限公司。实验小鼠为C57 小鼠，购自斯莱克实验动物有限公司（湖南），饲养中给予充足的水与鼠粮，且环境温度维持在22℃～25℃，湿度维持在40%～60%，12h 明暗交换。在实验前先对小鼠进行适应性喂养1 周。

1.2 方法

1.2.1 葛根的不同炮制品制法

1.2.1.1 葛根米汤煨制品 将150g 大米加水至淹没过大米2cm，置于压力锅中，煮10min 后，静置放凉，过滤出米汤备用。取葛根药材500g 放入米汤中浸润。再将剩余米汤和已经浸润好的葛根药材放入电炒锅中，用适宜温度拌抄至米汤吸干，待葛根变硬，颜色加深至黄褐色后取出，放凉。

1.2.1.2 葛根醋制品 量取米醋150g，倒入已放有500g 葛根药材的带盖容器中，将葛根药材拌匀后闷润。待葛根将米醋吸干后，将其放入电炒锅，用适宜温度拌炒。待葛根变硬，颜色加深至褐色时，取出，放凉。

1.2.1.3 葛根炒制品 将葛根药材500g 放入电炒锅中，用适宜温度拌炒至黄色，略带焦斑，取出，放凉。

1.2.2 葛根炮制品提取液 分别取上述葛根炮制品和葛根生品500g，分别加入10 倍量纯化水，煎煮2次，每次2h，合并提取液并浓缩至500mL。

1.2.3 高血糖小鼠模型建立 选8～12 周雄鼠（体重18～25g）禁食12h 后，测定其体重和空腹血糖值；选择血糖和体重正常的小鼠禁食24h 后，腹腔注射四氧嘧啶溶液（180mg/kg），然后正常饲养7d，再禁食12h，检测其空腹血糖值。若血糖值大于11mmol/L，则高血糖小鼠模型建立成功。

1.2.4 动物分组与给药 89 只正常小鼠在高血糖造模后，61 只造模成功，选择其中54 只高血糖模型小鼠及54 只正常小鼠，称重后，各随机平均分为6 组，每组9 只。分别为：空白对照组（生理盐水，200mL/kg 灌胃，1 次/d）、阳性对照组（二甲双胍200mg/kg，1 次/d）、米汤煨制品组（葛根米汤煨制品提取液200mL/kg，1 次/d）、醋制品组（葛根醋制品提取液200mL/kg，1 次/d）、炒制品组（葛根炒制品提取液200mL/kg，1 次/d）及葛根生品组（葛根生品提取液200mL/kg，1 次/d）。各组小鼠分别给予相应的药物后，测定高血糖小鼠和正常小鼠的空腹血糖，再进行葡萄糖耐量试验。

1.2.5 血糖测定 各组小鼠分别在灌胃当天和第14天禁食不禁水12h 后，通过剪尾的方式取血，再用血糖分析仪检测其空腹血糖值。

1.2.6 葡萄糖耐量试验 高血糖小鼠按上述给药完成后，以6g/kg 规格灌胃葡萄糖水溶液，在0min、30min 和120min 分别测定血糖值，计算血糖曲线下面积（AUC）。

2 结果

2.1 葛根不同炮制品对正常小鼠血糖的影响在给予葛根不同炮制品后，正常小鼠各组体重与空白对照组体重增加量差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。正常小鼠各组在分别给予生理盐水、二甲双胍、葛根米汤煨制品、葛根醋制品、葛根炒制品和葛根生品14d 后，空腹血糖在各组间差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表1 各组正常小鼠给药前后体重比较（±s，g）

表1 各组正常小鼠给药前后体重比较（±s，g）

表2 葛根炮制品对各组正常小鼠空腹血糖的影响（±s，mmol/L）

表2 葛根炮制品对各组正常小鼠空腹血糖的影响（±s，mmol/L）

2.2 葛根不同炮制品对高血糖小鼠空腹血糖的影响高血糖模型小鼠分别给予相应药物14d 后，各组小鼠体重增量与空白对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。给药后阳性对照组、米汤煨制品组、醋制品组、炒制品组和生品组小鼠的空腹血糖值较给药前显著降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；且醋制品组和炒制品组的空腹血糖降低值显著高于生品组（P＜0.05）。见表4。

表3 各组高血糖小鼠给药前后体重比较（±s，g）

表3 各组高血糖小鼠给药前后体重比较（±s，g）

表4 葛根炮制品对各组高血糖小鼠空腹血糖的影响（±s，mmol/L）

表4 葛根炮制品对各组高血糖小鼠空腹血糖的影响（±s，mmol/L）

注：与空白对照组相比，aP＜0.05、bP＜0.0001；与生品组相比，cP＜0.05、dP＜0.01、eP＜0.001、fP＜0.0001

2.3 葛根不同炮制品对高血糖小鼠葡萄糖耐量的影响葛根不同炮制品组及生品组小鼠的空腹血糖AUC 显著低于空白对照组（P＜0.05），且葛根醋制品组血糖AUC 显著低于生品组（P＜0.05）。见表5。

表5 葛根炮制品对各组高血糖小鼠葡萄糖耐量的影响（±s，mmol/L）

表5 葛根炮制品对各组高血糖小鼠葡萄糖耐量的影响（±s，mmol/L）

注：与空白对照组相比，aP＜0.05、bP＜0.001、cP＜0.0001；与生品组相比，dP＜0.01、eP＜0.0001

3 讨论

中医药在我国医疗体系中具有重要作用。虽然在我国中医药拥有悠久的历史，但中医药项目的研发仍处于相对落后阶段。中药是中医治疗的关键媒介，中药炮制直接关系中药的治疗效果。研究表明中药炮制不仅可以降低毒性，同时可提高药效[13]。本研究我们探究了葛根不同炮制品降血糖效果，以期为中医药治疗疾病开辟一条新途径。

葛根是治疗糖尿病和高脂血症最常见的中药材之一。本实验结果发现葛根对高血糖小鼠有明显的降血糖作用；且葛根醋制品和葛根炒制品的降血糖效果有显著提高。中药经炒、酒、米汤、醋或水浸等炮制后，其理化性质会产生不同程度的变化，如：有的成分被溶解出来、有的成分被分解或转化成新的成分、有的成分其浸出量有所增减[14]。一般来说，炒制可使药物的有效成分更容易溶出，醋制或其他辅料炮制后可改变或加强药性[15]。研究表明，葛根经醋炮制后，其葛根素成分含量提高[16]，这可能是其增加降血糖作用的原因之一。此外，也有报道称葛根米汤煨制品和炒制品可增进葛根有效成分的溶出[17]，这些有效成分的增加可能促进其降血糖作用。目前仍不清楚葛根中哪一类或几类成分是其降血糖作用的关键。或许在葛根炮制后根据其成分改变差异可得出其降血糖的最关键因素。葛根也是一种食品，安全无毒，若其降血糖作用得到很好的应用，将对人类治疗糖尿病提供很大帮助。

目前对于葛根降血糖的机制报道较多。葛根主要是通过调节胰岛素分泌和敏感性、葡萄糖代谢以及脂肪酸和胆固醇的合成和分解来维持代谢稳态。其还调控糖尿病和高脂血症并发症和危险因素的介导蛋白的表达，以缓解病情进展，改善预后。研究进一步发现葛根抗糖尿病、降血脂的主要活性成分是大豆黄酮、葛根素等异黄酮，以及β-谷甾醇[18]。葛根素是葛根中含量最多的次生代谢产物，是葛根中特有的异黄酮。葛根素具有舒张血管、保护心脏、抗氧化、抗炎等多种药理作用，并能减弱胰岛素抵抗，已被广泛用于治疗心脑血管疾病、糖尿病及糖尿病并发症[17]。β-谷甾醇是葛根的另一种关键活性成分。体内研究表明，在高脂饮食和链脲霉素诱导的糖尿病大鼠中，服用β-谷甾醇可显著提高胰岛素、血红蛋白、过氧化物酶体增殖物激活受体c（PPAR-c）和葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）蛋白水平，缓解胰岛素抵抗，降低血浆葡萄糖水平[19]。

目前，对于葛根的使用情况还有待进一步研究。本研究可为葛根在降血糖的应用方面提供参考。