不同因素对样品测定氢氧化钾蛋白质溶解度结果影响研究*

杨 超 胡 茜 兰雪萍 姜 涛 冯永建 姜友军

(中储粮质检中心有限公司 610091)

豆粕作为豆类去除油脂后的产物，具有非常丰富的营养物质，其粗蛋白质含量约为45%左右，还含有赖氨酸、色氨酸和蛋氨酸等物质。菜籽粕作为菜籽去除油脂后的产物，其粗蛋白质的含量一般在35%～42%，还含有多种必需氨基酸，另外菜籽粕还含有7%～8%的矿物质。因此，豆粕是非常好的食用豆粕和动物饲料原料，菜籽粕是非常好的动物饲料原料。

豆粕在加热过程中，抗胰蛋白酶等抗营养因子失去活性，同时赖氨酸也在发生美拉德反应，降低蛋白质的消化率。氢氧化钾蛋白质溶解度是代表豆粕加热程度是否过生或者过熟的指标，不同豆粕制品，其氢氧化钾蛋白质溶解度不同。本文研究凯氏定氮仪测定氢氧化钾蛋白质溶解度时样品细度、提取温度、提取转速、离心转速对结果的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

4份豆粕样品，编号分别为A、B、C、D；3份菜籽粕样品，编号分别为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。

1.2 主要仪器设备

锤片式旋风磨、FOSS全自动凯氏定氮仪、磁力搅拌器、离心机。

1.3 试验方法

粗蛋白测定参考GB/T 6432-2018；氢氧化钾蛋白质溶解度测定参考GB/T 19541-2017。

2 结果与讨论

2.1 样品细度对氢氧化钾蛋白质溶解度的影响

为研究不同样品细度对氢氧化钾蛋白溶解度的影响，在提取温度26℃～30℃、提取转速700 r/min、离心转速2700 r/min的情况下，观察样品细度对检测结果的影响，结果如表1所示。

表1 不同样品细度对测定结果的影响

如表1所示，当细度不符合国标要求时，测定结果明显低于细度符合国标要求时的测定结果。这是由于细度不符合国标要求时，样品粒度较大，在同等条件下提取不利于氢氧化钾蛋白质的析出，导致结果偏低。因此在后续试验中必须严格控制样品细度，确保符合国家标准的要求。

2.2 提取温度对氢氧化钾蛋白质溶解度的影响

国家标准《饲料原料豆粕》(GB/T 19541-2017)中规定氢氧化钾蛋白质溶解度的提取温度为25℃±5℃，其最高温度和最低温度有较大的差距，为考察提取温度对氢氧化钾蛋白质溶解度是否具有影响，在国标GB/T 19541-2017规定的其他条件不变的情况下，观察以下几个温度对豆粕和菜籽粕中氢氧化钾蛋白质溶解度检测结果的影响，结果如表2所示。

表2 不同提取温度对豆粕和菜籽粕测定结果的影响

从表2可以看出，氢氧化钾蛋白质溶解度随着提取温度的升高检测结果升高，当升高到一定程度时几乎保持不变。

结合国标GB/T 19541-2017的要求，根据以上试验结果来看，试验时控制提取温度在26℃～30℃是比较适宜的。在该温度范围内，氢氧化钾蛋白质已经全被提取出来，此时的测定结果是比较准确的，因此后续试验提取温度应控制在此范围内。

2.3 提取转速对氢氧化钾蛋白质溶解度的影响

国家标准《饲料原料豆粕》(GB/T 19541-2017)中规定提取转速为700 r/min，为研究提取转速对氢氧化钾蛋白质溶解度的影响，在提取温度为26℃～30℃、其他条件不变的情况下，观察以下几个提取转速对检测结果的影响，结果如表3所示。

表3 不同提取转速对测定结果的影响

从表3可以看出，在提取温度26℃～30℃、其他条件不改变的情况下，提取转速从600 r/min升高到1000 r/min时，氢氧化钾蛋白质溶解度几乎保持不变，由此可以看出提取转速对检测结果几乎没有影响，因此700 r/min是一个合适的提取转速，后续试验将采用此提取转速。

2.4 离心转速对氢氧化钾蛋白质溶解度的影响

国家标准《饲料原料豆粕》(GB/T 19541-2017)中规定离心转速为2700 r/min，为研究离心转速对氢氧化钾蛋白质溶解度的影响，在提取温度26℃～30℃、提取转速700 r/min的情况下，观察以下几个离心转速对检测结果的影响，结果如表4所示。

表4 不同离心转速对测定结果的影响

从表4可以看出，在提取温度为26℃～30℃、提取转速700 r/min情况下，离心转速从1500 r/min提升到3700 r/min时，氢氧化钾蛋白质溶解度几乎保持不变，由此可以看出离心转速对检测结果几乎没有影响，因此2700 r/min是一个合适的离心转速，后续试验将采用此离心转速。

3 结论

3.1 通过以上试验可以看出，在测定氢氧化钾蛋白质溶解度时，本实验室最佳实验条件为提取温度26℃～30℃、提取转速700 r/min、离心转速2700 r/min。

3.2 从以上试验过程来看，提取转速和离心转速对氢氧化钾蛋白质溶解度测定结果影响较小，几乎可以忽略不计；但是提取温度对氢氧化钾蛋白质溶解度测定影响较大，在实验过程中应当特别注意对提取温度的控制。

3.3 当样品细度不达标时，由于样品颗粒较大，会导致在同等条件下氢氧化钾蛋白质溶解度溶解不充分，使测定结果偏低，因此在检测氢氧化钾蛋白质溶解度时应特别注意检查样品细度是否符合要求。