CTA检查联合血清GRP78检测对心肌缺血性冠心病的诊断价值＊

李小玲 黄文荣 李开成

1.海南西部中心医院放射科 (海南 儋州 571700)

2.上海交通大学医学院附属第九人民医院放射科 (上海 200011)

心肌缺血性冠心病又叫做缺血性心肌病，是一种由冠心病引起的严重心肌功能失常[1]。该病起病隐匿，大多数患者在进行就诊时已经发生严重心功能障碍和心脏扩大，严重威胁患者生命安全[2]。冠状动脉造影是诊断冠心病的“金标准”，但它属于有创操作，且费用昂贵，因此在临床应用存在局限性[3-4]。随着影像学技术的进步以及医学水平的提高，CT血管造影(computed tomographic angiography，CTA)、心脏磁共振(CMR)、超声心电图等已成为诊断和治疗心肌缺血性冠心病的常用方法。其中CTA凭借准确性高、创伤性小等优点得到广泛应用[5]，若联合血清标志物将有助于提高对疾病的诊断准确性。葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78，GRP78)是一种免疫球蛋白重链结合蛋白，参与内质网应激[6]。研究表明GRP78在癌症、炎症和免疫疾病以及动脉粥样硬化等各种疾病的发展中发挥重要作用[7]。近年研究已发现GRP78表达升高与心肌缺血性冠心病的发生密切相关[8]。本研究旨在分析血清GRP78水平联合CTA检测对心肌缺血性冠心病的诊断价值，为提高心肌缺血性冠心病的早期诊断率和生存率提供参考依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象选取2020年1月-2021年12月在本院进行治疗的115例心肌缺血性冠心病患者作为观察组，其中男63例，女52例，年龄48～76岁，平均(62.61±5.24)岁。同时选取来本院进行健康体检的志愿者100例作为对照组，男55例，女45例，年龄47～79岁，平均(62.36±5.35)岁，两组年龄、性别等一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

纳入标准：经实验室、临床表现、影像学检查等确诊为心肌缺血性冠心病[9]；均存在心律失常、胸闷、胸痛、气短等典型心肌缺血性冠心病的症状；均接受冠状动脉造影及CTA检查；对照组既往无心肌缺血性冠心病史。排除标准：有冠状动脉搭桥手术史；造影剂过敏及肝肾功能严重不全者；有急性心肌梗死、心肌炎、风湿性心脏病、扩张型心脏病等患者；合并自身免疫性疾病患者；有严重心律失常的患者；精神异常或无法自控者；排除临床资料不完整者。本研究样品采集均获得受试者及家属知情且同意，符合《世界医学协会赫尔辛基宣言》。

1.2 方法

1.2.1 血清标本采集 观察组于入院后次日、对照组于体检当天采集5mL空腹静脉血，采用3000r/min进行4℃低温离心处理10min后，收集上层血清，于-80℃保存备用。

1.2.2 酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清GRP78水平 使用ELISA试剂盒(上海雅吉生物科技有限公司)检测血清GRP78水平，检测步骤严格按照产品说明书进行。检测步骤：于室温下，将ELISA试剂、微孔反应板静置约30 min，随后将待检血清样本加入微孔反应板，37℃孵育30 min，PBS冲洗5次，加入TMB试剂显色，37℃避光显色15min后，加入终止液终止反应，采用MA-96A型酶标仪(深圳迈瑞生物医疗有限公司)读取光密度(OD)值，根据标准曲线计算出GRP78水平。

1.2.3 CTA检查 采用64层螺旋CT扫描仪进行CTA检查。所有患者的CTA扫描取仰卧位，双脚朝向机架，扫描前需先进行碘过敏试验。扫描参数如下：管电流350 mA/s、管电压120 kV，层厚3 mm，层矩1.5 mm。增强扫描前静脉注射60～80mL碘造影剂，注射速度5mL/s，扫描结束后进行后期电脑三维重建，应用专用软件对结果进行分析。结果由一名经验丰富的心脏病专家和一名放射科医生进行分析。

1.3 统计学分析采用SPSS 22.0进行统计学分析，计量资料符合正态分布均以()表示，进行t检验；计数资料采用例(n)表示，进行卡方(χ2)检验；利用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清中GRP78表达水平对心肌缺血性冠心病的诊断价值。一致性采用Kappa分析。P＜0.05，代表差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清中GRP78水平比较心肌缺血性冠心病患者血清中GRP78表达水平高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 两组血清中GRP78表达水平比较

2.2 GRP78对心肌缺血性冠心病的诊断价值以心肌缺血性冠心病患者血清中GRP78表达水平绘制ROC曲线，结果显示，血清GRP78诊断心肌缺血性冠心病发生的曲线下面积为0.830(95%CI：0.773～0.878)，截断值为＞0.931，对应的敏感度为79.13%，特异度为85.00%%。见图1。

图1 血清GRP78诊断心肌缺血性冠心病发生的ROC曲线

2.3 GRP78、CTA单一诊断及联合诊断心肌缺血性冠心病的结果比较115例心肌缺血性冠心病患者均经冠状动脉造影确诊。115例患者在接受CTA扫描检查诊断后，确诊为心肌缺血性冠心病患者共计95例，根据GRP78检出心肌缺血性冠心病患者91例。其中CTA联合GRP78检查的阳性例数最高，单项检查中CTA检查的阳性例数最高。见表2。

表2 GRP78、CTA单一诊断及联合诊断心肌缺血性冠心病的结果比较

2.4 GRP78、CTA单一诊断及联合诊断心肌缺血性冠心病的诊断效能CTA联合GRP78检测诊断心肌缺血性冠心病的准确率为89.30%，敏感度为94.78%，特异性为83.00%，高于CTA检测和GRP78检测，Kappa值=0.783，一致性较好。各检查方式诊断效能见表3。

表3 GRP78、CTA单一诊断及联合诊断心肌缺血性冠心病的诊断效能

3 讨论

心肌缺血性冠心病主要是由心肌硬化或者是心肌纤维化引起的心肌供血长期不足。临床特点是心脏逐渐扩大，发生心律失常和心力衰竭，严重者甚至会发生猝死[10]。近年来，随着人们生活习惯及饮食结构的变化，发病率逐年增加且趋于年轻化[11]。目前，CTA也是诊断心肌缺血性冠心病的常用影像学检查手段。为了提高其临床诊断的准确性，往往会联合其他指标共同检测[12]。在本研究中，115例患者在接受CTA扫描检查诊断后，确诊为心肌缺血性冠心病患者共计95例，准确率为75.81%，敏感度为82.61%，特异度为68.00%，结果显示CTA扫描诊断心肌缺血性冠心病患者比较容易出现假阳性或假阴性，可能受患者心率、心脏搏动、对比剂、血管壁钙化等多种因素影响[13]，临床可以与血清学指标检测联合应用，能有效提高疾病诊断准确率和质量。

GRP78也称为BiP和SPA5，主要定位于内质网(ER)，有越来越多的研究表明GRP78在异常病理条件及正常生理条件下的心脏中发挥重要作用[14]。研究显示冠状动脉阻塞、粥样硬化等导致的心肌组织缺血可以引发内质网应激，恰当的内质网应激可以保护心肌细胞，而长期且较严重的内质网应激会促进心肌细胞的凋亡并加重组织损伤[15]。GRP78作为内质网重要的分子伴侣，其高表达可破坏内质网的稳定，导致内质网应激[16]，因此推测GRP78在心肌缺血性冠心病中发挥重要作用。已有研究表明GRP78在心力衰竭的大鼠模型中表达增加，参与心力衰竭的发生[17]。刘晨等[18]研究也表明GRP78在心肌梗死患者血清中异常高表达，其表达与患者心功能密切相关。在本研究中，心肌缺血性冠心病患者血清中GRP78表达水平升高，表明GRP78与心肌缺血性冠心病的发生、发展过程密切相关，可能是因为GRP78是内质网应激的标志蛋白，一旦机体处于内质网应激状态，GRP78过度表达进一步促进心肌细胞凋亡[19]；ROC曲线结果显示，血清GRP78水平可在一定程度作为诊断心肌缺血性冠心病发生的潜在标志物，特异度和准确率均高于CTA检测，敏感度低于CTA检测，但依然存在假阳性和假阴性。进一步研究显示，CTA联合GRP78检测诊断心肌缺血性冠心病的准确率为89.30%，敏感度为94.78%，特异性为83.00%，高于CTA单独检测或GRP78单独检测(75.81%/81.86%、82.61%/79.13%、68.00%/85.00%)，Kappa值=0.783，一致性较好。结果表明，二者联合检测对心肌缺血性冠心病的诊断具有准确率高、敏感度高，特异度高等优点，可以提高心肌缺血性冠心病的检出率，为早期诊断治疗心肌缺血性冠心病提供重要参考依据。

综上所述，采用CTA扫描联合血清GRP78检测对临床心肌缺血性冠心病患者的早期诊断和治疗具有重要价值。但本研究上仍存在不足之处，纳入样本量较少，实验设计较为简单，有待进一步的深入探讨，为临床诊断心肌缺血性冠心病的发生提供更可靠的依据。