新加香薷饮抗炎和解热作用研究

李小让 叶世芸 鉴志刚 罗文艳 李向东

【摘 要】

目的：研究新加香薷饮的抗炎、解热作用。方法：用角叉菜胶致SD大鼠炎症模型、干酵母致SD大鼠发热模型。观察新加香薷饮对大鼠足肿胀度、解热作用及其对血清中TNF-α、IL-6及下丘脑组织5-HT、NE含量。结果：抗炎作用，与空白组相比，模型组大鼠右后足跖肿胀明显增加；与模型组比较，新加香薷饮8.05 g/kg组对大鼠足跖肿胀程度有明显的减轻（P＜0.05）。解热作用，与空白组相比，模型组大鼠血清中TNF-α、IL-6及下丘脑组织中5-HT含量均明显升高（P＜0.05），下丘脑组织中NE含量明显降低（P＜0.05）；与模型组相比，阳性组、新加香薷饮8.05 g/kg组、新加香薷饮4.05 g/kg组大鼠血清中TNF-α含量均明显降低（P＜0.05），阳性组及新加香薷饮8.05 g/kg组血清中IL-6含量均明显降低（P＜0.05），新加香薷饮8.05 g/kg组大鼠下丘脑中5-HT含量及阳性组大鼠下丘脑中NE含量明显降低（P＜0.05），其余各组无明显变化。结论：新加香薷饮有良好的抗炎、解热作用，其机制可能是通过抑制炎症因子TNF-α、IL-6的合成与释放，下调下丘脑组织中5-HT含量和上调下丘脑组织中NE含量，进而使单胺类神经递质保持平衡，降低体温及产热量，起到解热效果。

【关键词】 新加香薷饮；抗炎作用；解热作用

【中圖分类号】R285.5   【文献标志码】 A    【文章编号】1007-8517（2023）07-0024-05

Study on the Anti-Inflammatory and Antipyretic Effects of Xinjia Elsholtzia Drink

LI Xiaorang1 YE Shiyun1* JIAN Zhigang1 LUO Wenyan1 LI Xiangdong2

1.Guizhou University of Traditional Chinese Medicine， Guiyang 550002，China;2.Guizhou Dexuantang Hukang Pharmaceutical Co.， Ltd.， Guiyang 550008，China

Abstract：

Objective To study the anti-inflammatory and antipyretic effects of Xinjia Elsholtzia drink.Methods A model of inflammation in SD rats caused by carrageenan gum and a model of fever in SD rats caused by dried yeast were used.The effects of Xinjia Elsholtzia drink on the degree of foot swelling，antipyretic effect and its effect on TNF-α and IL-6 in serum and 5-HT and NE content in hypothalamus tissue of rats were observed.Results The anti-inflammatory effect， compared with the blank group， the swelling of right hind foot and plantar of rats in the model group increased significantly；compared with the model group， the swelling of foot and plantar of rats in the Xinjia Elsholtzia 8.05 g/kg group was significantly reduced （P<0.05）;the antipyretic effect， compared with the blank group， the TNF-α and IL-6 in serum and 5-HT content in hypothalamus tissue of rats in the model group were significantly increased （P<0.05）. The content of NE in hypothalamic tissue was significantly lower （P<0.05）；Compared with the model group， the TNF-α content in the serum of rats in the positive group， Xinjia Elsholtzia 8.05 g/kg group and Xinjia Elsholtzia 4.05 g/kg group was significantly lower （P<0.05）. In the group of rats with 8.05 g/kg of Xinjia Elsholtzia， the content of 5-HT in the hypothalamus and the content of NE in the hypothalamus of rats in the positive group were significantly reduced （P<0.05）.Conclusion Xinjia Elsholtzia has good anti-inflammatory and antipyretic effects. The mechanism may be through inhibiting the synthesis and release of inflammatory factors TNF-α and IL-6，down-regulating 5-HT content in hypothalamic tissues and up-regulating NE content in hypothalamic tissues，thus keeping monoamine neurotransmitters in balance，lowering body temperature and heat production，and providing antipyretic effects.

Keywords：Xinjia Elsholtzia Drink; Anti-inflammatory Effect; Antipyretic Effect

新加香薷饮最早收录于清代医家吴鞠通所著《温病条辩》［1］，由香薷、鲜扁豆花、金银花、连翘、厚朴五味药组成。其中香薷为君药，金银花、扁豆花、连翘共为臣药，厚朴为使药，该方具有祛湿解表，清热化湿之功效。现代药理作用阐明香薷所含的挥发油具有消炎、解热作用［2］；金银花、连翘能解热抗炎［3-4］；厚朴能抗菌消炎［5］；扁豆花能滋养，解毒。故新加香薷饮具有清热的功效，但其解热作用机制尚不清楚。因此本实验主要通过角叉菜胶致大鼠炎症模型的建立，观察新加香薷饮抗炎作用；在干酵母致大鼠发热模型基础上，观察新加香薷饮对酵母致热大鼠的解热作用，对血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）及脑组织中5-羟色胺（5-HT）和去甲肾上腺素（NE）等介质的含量变化影响，以验证新加香薷饮解热作用并进一步探讨其作用机制，为丰富临床治疗发热症的方法提供更多的选择依据。

1 材料与方法

1.1 仪器与材料

1.1.1 仪器 HX-YS0301液體加热器（中山市龙瑞电器有限公司）；SHZ-Ⅲ循环水真空泵（上海亚荣生化仪器厂）；RE-2000B旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；台式高速冷冻离心机（ThermoST16R）；HRQ-A2兽用电子体温计（郑州豪润奇电子科技有限公司）；DHG-9240A电热恒温鼓风干燥箱（上海跃进医疗器械厂）；HB-RO/60超纯水仪（美国Millipore公司）；HLD-3003电子天平（d=0.001g；杭州友恒称重设备有限公司）；NanoDrop One/One C微量紫外-可见光分光光度计（美国Thermo公司）；BPH-9042精密恒温培养箱（上海一恒科学仪器有限公司）；111-101游标卡尺（东莞三量量具有限公司）。

1.1.2 试验药物 角叉菜胶（批号：NO705M021，Solarbio）；干酵母（安琪酵母股份有限公司）；醋酸地塞米松片（批号：210316，浙江仙琚制药股份有限公司）；阿司匹林肠溶片（批号：BJ58754，拜耳医药保健有限公司）；医用酒精（江西百医卫仕医药科技有限公司）；生理盐水（贵州科伦药业有限公司）；Rat TNF-α Elisa KIT（批号：RX302058R，睿信生物）；Rat IL-6 Elisa KIT（批号：RX302856R，睿信生物）；Rat 5-HT Elisa KIT（批号：RXJ303050R，睿信生物）；Rat NE Elisa KIT（批号：RXJ302393R，睿信生物）。

1.1.3 实验动物 SPF级SD大鼠100只，雄性，体质量为180～200 g，合格证号：SCXK（湘）2019-0014，购买于长沙市天勤生物技术有限公司，饲养于贵州中医药大学动物实验中心SPF级动物房。关于实验动物伦理学问题，已经由贵州中医药大学实验动物伦理委员会讨论批准，批准号：20210075。

1.2 方法

1.2.1 供试品的制备 精密称定香薷、连翘、厚朴各7.46 g，金银花、扁豆花各11.19 g，于陶瓷炉中加1000 mL水浸泡60 min，共煎煮三次，每次72 min，合并煎煮液100目滤布过滤后，精密量取水煎液15 mL、甲醇35 mL，混合后超声30 min，放凉后过滤，取续滤液过0.22 μm微孔滤膜，减压浓缩至浓度分别为0.40 g/mL、0.81 g/mL、1.61 g/mL的低、中、高浓度的浓缩液，即得新加香薷饮供试品溶液。

1.2.2 分组及角叉菜胶致大鼠炎症模型的建立 选取42只雄性大鼠随机分为6组：新加香薷饮8.05 g/kg组、新加香薷饮4.05 g/kg组、新加香薷饮2.00 g/kg组，模型组，空白组，阳性（醋酸地塞米松1.2 mg/kg）组，每组7只。

炎症模型建立的具体方法如下：实验前分别测量每只大鼠右足跖厚度3次，后计算其平均值作为正常足跖厚度。根据等效剂量系数折算法计算给药量，新加香薷饮各组给予相应的剂量灌胃，阳性组给予相应剂量的醋酸地塞灌胃，模型组及空白组给予生理盐水灌胃，每天1次，连续7 d，末次给药半小时后分别于大鼠右后足皮下注射1%角叉菜胶0.1 mL。在给药后0 h、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h、6 h用游标卡尺测量各组大鼠的右后足跖厚度（mm），计算各组大鼠致炎前后右后足跖厚度变化值，以足肿胀率表示药物的抗炎效果。

足肿胀率=造模后足趾厚度-正常足趾厚度正常足趾厚度×100%

1.2.3 酵母致大鼠发热模型的建立 动物处理用数显体温计测量大鼠直肠温度，每天两次，取其均值作为初始体温，连续3 d。排除温度变化>0.5℃的大鼠。

分组及模型建立：选取合适的大鼠36只，随机分为6组：新加香薷饮8.05 g/kg组、新加香薷饮4.05 g/kg组、新加香薷饮2.00 g/kg组，模型组，空白组，阳性（阿司匹林肠溶片）组，每组6只。

发热模型建立的方法如下：新加香薷饮各组给予相应的剂量灌胃，阳性组给予相应剂量的阿司匹林肠溶片灌胃，模型组及空白组给予生理盐水灌胃，给药后各组均在背部皮下均注射20%酵母注射液（10 mL/kg），空白组给予生理盐水注射，分别于造模后4 h和6 h测量大鼠体温。

1.2.4 样本采集 大鼠最后一次测量体温后，使用3%戊巴比妥（1 mL/kg）腹腔注射麻醉，腹主动脉取血低温离心10 min（3000 r/min），取上层血清，取血后，快速剥取大鼠下丘脑，均保存于-80 ℃冰箱备用。

1.2.5 指标检测 取大鼠脑组织及血清，加适量生理盐水混匀备用（脑组织与生理盐水比例为1∶20），以酶联免疫吸附法（ELISA）检测脑组织中5-HT、NE含量及血清中TNF-α、IL-6含量。

1.2.6 数据处理 采用SPSS26.0软件分析，每组数据以表示，数据先进行正态性和方差齐性检验，符合正态分布且方差齐性较好，多组样本量比较采用单因素方差分析（ANOVA），组间的两两比较采用LSD-t检验；不符合正態分布且方差不齐时，采用非参数检验进行比较。以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 新加香薷饮对角叉菜胶致大鼠足肿胀模型的作用 由图1可知，各组大鼠足趾肿胀率在1 h、2 h大致呈上升趋势，3 h、4 h、5h、6 h大致呈下降趋势。与空白组相比，模型组大鼠右后足跖肿胀明显，造模2 h左右肿胀度达到顶点；与模型组比较，在1 h时新加香薷饮8.05 g/kg、2.00 g/kg组对大鼠足跖肿胀程度有明显的减轻（P＜0.05），在2 h时新加香薷饮各组均对大鼠足跖肿胀程度有明显的减轻（P＜0.05），在3 h时新加香薷饮8.05 g/kg组对大鼠足跖肿胀程度有明显的减轻（P＜0.05），随着时间的流逝，其药效也随着减弱，在4 h时新加香薷饮8.05 g/kg、2.00 g/kg组对大鼠足跖肿胀程度有明显的减轻（P＜0.05），在5 h、6 h时，与模型组相比，新加香薷饮各剂量均无显著差异。结果如表1所示。

2.2 新加香薷饮对酵母致热大鼠体温的影响 与空白组相比，模型组大鼠在造模后4 h、6 h时体温明显升高；与模型组相比，在造模后4 h、6 h时新加香薷饮8.05 g/kg组大鼠体温均明显下降（P＜0.05），其他剂量组无明显差异。结果如表2所示。

2.3 新加香薷饮对发热模型大鼠炎症因子及神经递质含量的影响 与空白组比较，模型组大鼠血清中TNF-α、IL-6及下丘脑组织中5-HT含量均明显升高（P＜0.05），下丘脑组织中NE含量明显降低（P＜0.05）；与模型组比较，新加香薷饮8.05 g/kg组、新加香薷饮4.05 g/kg组大鼠血清中TNF-α含量均明显降低（P＜0.05），新加香薷饮8.05 g/kg组血清中IL-6含量明显降低（P＜0.05），下丘脑中5-HT含量明显降低（P＜0.05）。其余各组无明显变化。结果见表3所示。

3 讨论

新加香薷饮可祛暑解表，清热化湿，临床常用于夏季发热、中暑等症状［6-7］，方中香薷、金银花及连翘［8-10］均有解热效果，5味中药多具有抗炎镇痛、抗病毒、免疫调节等作用，并且有研究［11］表明新加香薷饮具有治疗新型冠状病毒肺炎的潜力。

目前，实验室中常采用的动物发热模型是酵母菌致热手段，由于酵母菌全菌体及菌体内存在荚膜多糖和蛋白质等致热物质，在皮下注射后可导致注射部位局部的溃烂，而机体内发生较严重的炎症反应后产生高热症状［12］。研究［13］表明，酵母菌致热后动物症状表现与里热证相似，因此清热类中药的动物解热效果常选择用这种模型开展研究。抗炎试验中，新加香薷饮8.05 g/kg能明显降低足跖厚度，具有一定的抗炎效果，在解热试验中，新加香薷饮8.05 g/kg在造模后4 h、6 h时均可明显降低模型组大鼠体温，因此证明新加香薷饮可以缓解由酵母菌致热引起的发热症状。

机体炎症常伴随着发热现象的产生，因为当机体遭受外源性致热原刺激会产生大量内源性致热源，如TNF-α、IL-6、IL-1等炎症因子，其中TNF-α可直接影响下丘脑体温调节中枢，还可以刺激巨噬细胞生成IL-1，继而IL-1促进单核-巨噬细胞释放PGE2（发热的正调节介质），从而影响下丘脑体温调节中枢。因此，内源性致热源因子可直接或间接作用于体温调节的神经递质［14-16］，从而使体温升高，出现发热症状。现有的体温调节的单胺学说［17］则指出，中枢单胺类神经递质可以介入体温的调节过程，其中5-HT可导致体温升高，NE可导致体温下降，5-HT、NE、DA的动态平衡是保持体温恒定的关键因素。有学者［18］发现，5-HT参与了调控酵母致大鼠发热过程中。本研究考察造模后大鼠下丘脑中神经递质5-HT及NE含量的变化，观察新加香薷饮对酵母致大鼠发热模型的解热效果。结果显示，模型组大鼠与空白组大鼠相比，下丘脑中5-HT含量明显升高，NE含量明显降低，新加香薷饮干预后，新加香薷饮8.05 g/kg组大鼠与模型组大鼠相比，下丘脑组织中5-HT含量明显降低，NE含量升高，提示新加香薷饮可能是通过对脑中枢中5-HT、NE等单胺类神经递质含量的调节达到相对平衡而发挥解热效果。

综上所述，新加香薷饮具有一定的抗炎作用，其机制可能是抑制炎症因子TNF-α、IL-6的合成与释放，并可能通过下调下丘脑中神经递质5-HT含量，上调NE含量，保持5-HT及NE含量的相对平衡，从而降低体温，发挥解热作用。

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（收稿日期：2022-08-06 编辑：刘 斌）