电针对营养性肥胖小鼠脂肪因子及脂肪酸合成酶的影响∗

司原成，任晨晨，张二伟，康朝霞，莫曦雅，冯 麟，孙燕子，赵超超，李青青，陈 波

贵州中医药大学，贵州 贵阳 550025

单纯性肥胖症是一种慢性疾病，严重影响人们生活质量的提升，是多种疾病的高发危险因素，其致病机制研究的热点亦倾向于脂肪及肝脏组织的脂质代谢异常方面［1-2］。脂质代谢异常是肥胖症发生的显著表现之一，其血清血脂［总胆固醇（cholesterol，CHO）、甘油三酯（triglycerides，TG）］及调控脂质代谢的细胞因子［瘦素（leptin，LP）、脂联素（adiponectin，ADPN）］和脂肪酸合成酶都是在脂质代谢中担当重要的角色［3-4］。

中医认为，肥胖症多因痰、虚、瘀夹杂所致，临床上通常治以健脾、益气、化痰、散瘀［5］。电针疗法是中医特色疗法之一，具有良好的可控性和操作性［6］。本研究拟探讨电针在改善肥胖症脂质代谢异常方面的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实 验 动 物50 只SPF 级C57BL/6 小 鼠，8 周龄，雌雄各半，体质量（18.15±2.36）g，购买于斯贝福（北京）生物技术有限公司［许可证号：SCXK（京）2016-0002］。饲养条件：饲养于贵州中医药大学基础医学院实验中心动物房内，温度23～25 ℃，湿度40%～60%，昼夜各半，7∶00—19∶00 开灯，19∶00—7∶00 关灯。实验符合贵州中医药大学动物伦理委员会实验动物福利和伦理相关规定（伦理编号：20210022）。

1.2 试剂及仪器小鼠血清CHO 试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号：20181110）；小鼠血清TG 试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号：20181110）；小鼠血清LP 试剂盒（依科赛生物科技有限公司，批号：20181114）；小鼠血清ADPN 试剂盒（武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司，批号：20181110）；小鼠FAS 试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号：20181113）。ELX808IU-P 型全自动酶标仪（美国宝特公司）；Multiskan X1R型高速台式冷冻离心机（美国ThermoScientic公司）；DY-89型电动玻璃匀浆机（浙江新芝生物有限公司）。

1.3 实验方法

1.3.1 模型建立 50 只C57BL/6 小鼠，适应性喂养1 周后，分层次随机选出6 只为正常组，余下44只饲以高脂饮食［北京华阜康生物科技股份有限公司，许可证号：SCXK（京）2016-0002］，8 周后，筛选出体质量大于正常组均值的20%的实验鼠，且Lee's 指数显著高于正常组的，定义为肥胖鼠，共得到18只肥胖鼠。

1.3.2 分组及干预 将18只肥胖鼠按照随机数字表平均分成模型组、电针14天组、电针28天组，每组6 只。干预方法：穴位选择参照2016版《实验针灸学》［7］，电针组腧穴选取天枢、关元、足三里、三阴交干预，施以针刺补法，行搓针手法，得气后，接通G6805-Ⅲ型电针仪治疗，频率30 Hz，强度以局部微微震颤为度。正常组与模型组以相同方式固定10 min，不予电针干预。

1.3.3 标本采集 每周固定时间测量实验鼠的体质量、体长等指标。样本分别在治疗14、28 天等时间节点进行，股动脉取血，完成相关生化检测。脱颈椎处死后，通过电动玻璃匀浆机将脂肪、肝脏等组织匀浆，离心，取上清液400 μL 于EP 管中，置于-80 ℃冷冻冰箱中保存，以便进行（fatty acid synthetase，FAS）检测。

1.4 观察指标

1.4.1 一般状态 观察各组实验小鼠的毛色反应、大小便及精神状态是否正常。

1.4.2 体质量及Lee's 指数 每周固定时间由专人测量每组实验鼠体质量及体长（从鼻尖到肛门的长度）2 遍，取平均值，计算大鼠的Lee's 指数［Lee's指数

1.4.3 实验室指标 采用酶联免疫吸附测定法（Elisa）检测CHO、TG、LP、ADPN、FAS 水平，按照试剂盒的说明书逐步操作，检测实验小鼠相关指标含量变化。

1.5 统计学方法使用SPSS 19.0 统计软件进行分析，计量数据以±s 表示，单因素方差分析，组间配对S-N-K 检验。P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 小鼠形态学一般指标C57BL/6 小鼠，适应性喂养1 周后，毛色润滑，精神状态良好，大小便未见异常。饲养8 周以后，正常组无明显变化，各组肥胖鼠，毛发出油，毛发略有成簇现象。经过干预治疗后，电针14天组及电针28天组实验鼠均出现明显好转。

2.2 小鼠体质量及Lee's 指数治疗前模型组、电针14 天组及电针28 天组的体质量及Lee's 指数均显著高于正常组（P＜0.01），表明各组肥胖鼠复制造模成功。经电针干预治疗后，与模型组相比，电针14 天组与电针28 天组体质量及Lee's 指数均显著下降（P＜0.01），其中电针28 天组较电针14天组更为明显（P＜0.05）。见表1。

表1 各组小鼠体质量、体长及Lee's指数比较（±s）

表1 各组小鼠体质量、体长及Lee's指数比较（±s）

注：与正常组比较，**表示P＜0.01；与模型组比较，△表示P＜0.05，△△表示P＜0.01；与电针14天组比较，▲表示P＜0.05

组别正常组模型组电针14天组电针28天组鼠数体质量（g）治疗前22.62±3.22 31.10±2.21**30.10±1.49**31.32±0.83**治疗后19.88±0.75 24.33±1.61**24.87±1.29 22.12±0.86△▲体长（cm）治疗前9.80±0.24 9.78±0.16 9.93±0.10 10.03±0.15治疗后9.55±0.12 9.42±0.58 9.83±0.26 9.43±0.36治疗后2.84±0.06 3.18±0.18**2.97±0.10△2.88±0.14△6 6 6 6 Lee's指数治疗前2.89±0.19 3.21±0.08**3.13±0.08 3.14±0.02

2.3 小鼠血清血脂水平、血清脂肪细胞因子及脂肪和肝脏组织中FAS 的含量与正常组比较，模型组小鼠的血脂水平（CHO、TG）、血清脂肪细胞因子（LP、ADPN）、脂肪和肝脏组织中FAS 的含量均显著升高；经电针干预治疗后，与模型组相比较，电针14 天组与电针28 天组上述指标均显著下降（P＜0.01），其中电针28 天组较电针14 天组更为明显（P＜0.05）。见表2。

表2 各组小鼠血脂、脂肪细胞因子及不同组织中FAS含量比较（±s）

表2 各组小鼠血脂、脂肪细胞因子及不同组织中FAS含量比较（±s）

注：与正常组比较，**表示P＜0.01；与模型组比较，△表示P＜0.05，△△表示P＜0.01；与电针14天组比较，▲表示P＜0.05

组别正常组模型组电针14天组电针28天组鼠数血脂CHO（mmol/L）2.87±0.25 6.42±0.58**4.71±0.66△3.96±1.36△△▲TG（mmol/L）1.00±0.16 3.93±0.72**2.47±0.57△1.15±0.29△△▲脂肪细胞因子LP（pg/mL）383.39±40.40 1185.94±150.02**663.78±102.70△△471.17±146.12△△▲ADPN（pg/mL）379.28±55.60 623.63±66.15**491.79±32.64△△406.81±76.59△△▲肝脏（ng/mL）2.61±2.92 19.20±4.05**14.71±3.51△8.95±3.49△△▲6 6 6 6不同组织中FAS含量脂肪（ng/mL）9.83±2.09 40.55±6.12**21.82±1.83△△15.00±7.57△△▲

3 讨论

流行病学调查结果显示，中国目前超重率为31.5%，肥胖率为12.2%，而且这一数字依然呈现快速的增长［8-9］的趋势。肥胖症与高血压、2 型糖尿病、胆囊炎及部分癌症等疾病密切相关［10］。血清CHO、TG 是直接反应血脂状态的客观指标，降低血清血脂，有助于提高胰岛素的敏感性，改善β胰岛细胞功能状态［11-12］。脂肪组织能够分泌脂肪细胞因子，分泌LP、ADPN 特异性调节脂质代谢。LP抑制食欲，激动交感神经活性，释放储存的能量，抑制脂肪合成的作用［13］；ADPN 抑制糖异生，减少葡萄糖产生，降低脂肪堆积，促进骨骼肌细胞氧化，两者协同调控脂肪分解、能量代谢平衡等环节［14］。FAS 在脂肪组织储存和运输能量，维持细胞结构稳定，提供多种激素合成所需的中间产物等方面起到重要作用［15］。

在中医诊断治疗体系中，电针亦是一种传统而常规的治疗手段［16-17］。天枢、关元、足三里、三阴交穴等四穴配伍，是调节脂质代谢的重要腧穴，显著改善肠腑、脾胃及诸劳虚证［18］。电针具有调解瞬息电压感受器阳离子通道受体，抑制增加能量消耗，抑制脂肪细胞分化，防止脂肪组织堆积，调节脂肪代谢的生理活动，活化Ca2+、Mg2+和Na2+等阳离子内流，改善胰岛素等作用［19-20］。

本研究发现，模型组实验鼠血清血脂（CHO、TG）及脂肪因子（LP、ADPN）均显著高于正常组，在电针干预后得到有效改善，针灸治疗的效果在一定时间内与治疗时间呈现递进关系，其在治疗28天的减肥降脂效果优于治疗的14 天时的效果。FAS 主要合成部位是脂肪和肝脏组织，对其含量变化的研究中发现，肥胖鼠脂肪及肝脏组织的FAS含量均显著增加，在治疗后可有效减少FAS的合成，对调节脂质代谢异常有着关键作用。

综上所述，电针可调控肥胖症小鼠的体质量、血脂（CHO、TG）、脂肪细胞因子（LP、ADPN）、脂肪和肝脏组织中的FAS 的功能，从而改善肥胖症的脂质代谢，实现减肥消脂目的。