基于快速检测的烟草番茄斑萎病防控技术

闫 鼎，蔡宪杰，宋明健，李德文，倪 霞，未启立，尚海丽，夏文凯，盘文政，肖家繁，李文陆，桂龙凤，赵学通，张志红

（1.上海烟草集团有限公司，上海 200082；2.云南省烟草公司昭通市公司，云南昭通 657000；3.云南省微生物发酵工程研究中心有限公司，昆明 650217；4.华环国际烟草有限公司，安徽滁州 233121）

番茄斑萎病毒（Tomato spotted wilt virus，TSWV）隶属于布尼亚病毒目（Bunyavirales）番茄斑萎病毒科（Tospoviridae）正番茄斑萎病毒属（Orthotopoviruses），是危害烟草的主要病毒［1，2］。自20 世纪90 年代传入中国以来，该病毒迅速扩张，侵染超过1 090 种植物，严重影响中国经济、粮食作物的生长和产量，甚至导致绝收，给农户造成巨大的经济损失［3，4］。烟草是云南省昭通市昭阳区重要的经济支柱产业，番茄斑萎病连年发生，导致烟草大量减产，迫切需要建立一套病毒病早发现、早上报、早防治的综合方法。

烟草番茄斑萎病的防控大多通过化学、物理、生物等手段控制传毒介体蓟马的数量。云南省烟草公司昭通市公司利用蓟马对紫外光的忌避及对蓝色的趋性，在烟田上铺银色地膜，烟田内悬挂信息素蓝板，将烟株番茄斑萎病的发病率控制在5%以内［5］。穆青等［6］通过释放捕食类螨，发现烟草番茄斑萎病防治效果可达66.97%。游堂贵等［2］通过小区试验，施用1%香菇多糖水剂、3%超敏蛋白微粒剂、5%氨基寡糖素水剂和2%嘧肽霉素水剂4 种病毒抑制剂，发现3%超敏蛋白微粒剂对烟草番茄斑萎病的防效好，其防治效果高达59.91%。

番茄斑萎病毒病为云南省烟区烟草主要病毒病［2］。于海芹等［7］调查云南省主要烟区TSWV 阳性数情况，其中昭通市昭阳区烟草及周边杂草的TSWV 阳性数达100%，严重影响了烟株的经济价值，成为制约昭阳区烟草生产发展的瓶颈。有关控制该病毒传播者蓟马的药剂防治效果不太理想。胶体金免疫层析技术（Gold immuno-chromatography assay，GICA）具有操作简便、快速、结果准确、无需特殊设备等优点［8］，在医学、动植物检疫、食品安全监督等领域得到广泛应用［9-12］。本研究采用胶体金免疫层析快速检测技术检测烟株携带番茄斑萎病毒（TSWV）的情况，通过设计3 组田间小区试验，对昭通市烟区常见的番茄斑萎病快速检测技术进行探索性研究，在此基础上研究低毒化学农药施用时期、施用量和施用次数，以期建立一套病毒病综合防治方法。

1 材料与方法

1.1 试验时间及地点

试验时间：2020 年3—10 月。

试验地点：昭通市昭阳区苏家院乡迤那村。该地块烤烟2016—2019 年长年连作，导致番茄斑萎病、马铃薯Y 病毒病等病害发生越来越严重。

1.2 试验材料

供试品种：云烟121。

供试药剂：嘧肽·吗啉胍、氨基寡糖素、超敏蛋白、胶体金免疫层析快速检测试纸（购自郑州左安检测科技有限公司）。

1.3 病毒病的快速检测

试验地在移栽前检测烟苗带毒情况，移栽后每隔7 d 利用胶体金免疫层析快速检测试纸对烟株番茄斑萎病和马铃薯Y病毒病带毒情况进行快速检测。

1.4 病毒病田间防治小区试验设计

根据“1.3”的检测结果，以清水为对照，设置小区试验研究不同药剂及用量对病毒病的防治效果，试验设计如表1 所示。

表1 病毒病防治试验设计

1.5 烟株番茄斑萎病发病情况调查

用药前调查一次病害，以后每次用药后10 d 或15 d 分别进行调查，最后一次用药后5 d 调查。按照《GB/T 23222—2008 烟草病虫害分级及调查方法》［13］，以株为单位，对各处理烟株病毒病发病情况进行调查记录，并计算病株率和病情指数。

1.6 数据统计分析

记录各级发病株数，根据公式计算发病率、病情指数及防控效果。试验数据采用Excel 2010 软件进行分析，计算公式如下。

2 结果与分析

2.1 病毒病快速检测结果

为了检测烟苗以及移栽后每隔7 d 烟株带毒情况，利用胶体金快速检测试纸对烟株番茄斑萎病和马铃薯Y 病毒病进行快速检测，结果如表2 所示。从表2 中可以看出，试验地的烟苗不带毒，在5 月18日，接近团棵期时，番茄斑萎病的检测结果为阳性，马铃薯Y 病毒病的检测结果仍为阴性。

表2 试验地番茄斑萎病和马铃薯Y 病毒病快速检测结果

2.2 病毒病田间病情和防控效果

如表2 所示，5 月18 日在试验地检测出烟株带番茄斑萎病的病原菌，因此从5 月18 日开始施用药剂对番茄斑萎病进行防治。各处理烟株番茄斑萎病株率、病情指数统计结果见表3。从表3 中可以看出，随着时间的推移，各处理烟株番茄斑萎病的病株率和病情指数均呈上升趋势，以清水对照的上升趋势最明显；药剂处理之间，以T3 处理和T5 处理的上升趋势较明显，T6 处理的次之，T2 处理和T4 处理的相对平缓。

表3 烟株番茄斑萎病病株率及病情指数调查结果

不同处理对烟株番茄斑萎病的防效统计结果见表4。从表4 中可以看出，T4 处理的防效最好，T2 和T3 的次之，T6 的稍差，T5 的最差。说明氨基寡糖素连续喷雾3次对番茄斑萎病的防效最好，达60.24%。

表4 不同处理对烟株番茄斑萎病的防效统计结果

3 小结与讨论

利用快速检测试纸对烟叶进行检测，可以提前预测烟草病毒病的发生，从而提前预防。随着时间的推移，各处理烟株番茄斑萎病的病株率和病情指数均呈上升趋势，以清水对照的上升趋势最明显，氨基寡糖素连续喷雾3 次的上升趋势较缓。不同处理对烟株番茄斑萎病的防效统计结果表明，氨基寡糖素连续喷雾3 次对番茄斑萎病的防治效果最好，达60.24%；波尔多液连续喷雾3 次的防效次之，为51.89%；氨基寡糖素连续喷雾2 次的防效接近波尔多液的防效，为47.32%；超敏蛋白连续喷雾3 次和2次的防效均较差，分别为43.94%和31.81%。游堂贵等［2］研究表明，5%氨基寡糖素水剂1 000 倍液处理的烟草TSWV 的防治效果为38.21%±9.65%。龙光泉等［14］通过试验证明，在烟草病毒病发病前或发病初期连续施用5%氨基寡糖素AS 3 次，每次间隔7 d，每公顷施用750 g，其防治效果达73.95%，与本研究结果接近，与游堂贵等［2］的研究结果不同，究其原因可能是所施用的氨基寡糖素浓度远低于本研究。

综上所述，通过在昭通市昭阳区苏家院乡迤那村的田间试验初步建立了一套基于快速检测的病毒病综合防治技术，即利用胶体金快速检测试纸在移栽前检测烟苗带毒情况，移栽后每隔7 d 对烟株主要病毒病的带毒情况进行快速检测，当病毒病检测结果呈阳性时使用氨基寡糖素喷雾防治，连续用药3次，间隔10 d，每次用量1 500 mL/hm2，对病毒病的防效在60%左右。