小米粥不同组分的成分测定与体外消化研究
2023-04-14张荣
张 荣
(新疆第二医学院,新疆 克拉玛依 834000)
谷子(Setaria italica)又称粟,脱壳后为小米,属于“五谷”之一,为中国传统粮食作物,已有4000 多年的栽培史[1],在中国的“三北”地区广为种植,是主要粮食作物[2]。小米的营养丰富、齐全,包括碳水化合物、蛋白质、氨基酸、脂肪酸、维生素、矿物质等,营养比例适宜,而且消化率高,可作为很好的营养源[3,4],也可以用于开发安全保健食品。关于小米的保健功效,古人在《别录》《滇南本草》《本草纲目》等都有记载。
用小米加红糖熬煮,具有安身和滋阴养血的功能,被誉为“代参汤”,可用做产妇、幼儿及老人的滋补佳品[5]。小米作为一种高营养价值的天然功能性食品,其开发利用具有先天优势[1]。鲜见关于小米粥组分中营养成分的研究报道,本研究旨在通过常见营养成分的测定,分析小米粥各组分中成分含量及特点,为小米的加工利用及功能研究提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
小米,河北省张家口市农业科学院提供;α-淀粉酶、直链淀粉和支链淀粉标准品,购于美国Sigma公司;葡萄糖、3,5-二硝基水杨酸、酒石酸钾钠、亚硫酸钠、碘、碘化钾、乙醚、盐酸、无水乙醇、浓硫酸、石油醚、氢氧化钠、苯酚等其他试剂均为分析纯。
1.2 仪器与设备
Allegra 64r 型台式高速冷冻离心机(美国Beckman 公司);T6 型紫外可见光光度计(北京普析通用仪器有限公司);索氏抽提器;PHS-3D 型数字酸度计(上海三信仪表厂);Kjeltec 8400 型凯氏定氮仪(美国FOSS 公司);ALPHA 1-2LD Plus 型真空冷冻干燥机(德国Christ 集团);JJ-1 型精密定时电动搅拌器、高速万能粉碎机(北京市中兴伟业仪器有限公司);DHG-9030A 型电热恒温鼓风干燥箱(上海精密实验设备有限公司);RE-52AA 型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);感量为0.001 g 的电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)。
1.3 方法
1.3.1 原料的制备方法 小米经淘洗,加水熬制成小米粥后冷却,自然结成油皮,挑取分离得到米油皮,剩下的部分命名为米汤,并取其中一部分米汤过滤得到米粒和米汁,取新小米重新熬粥,得到全营养小米粥,将5 种原料分别冷冻干燥后粉碎过筛,制成米油皮、米汤、米粒、米汁和米粥5种原料干粉,储存备用。
1.3.2 水分含量的测定 采用直接干燥法[6]。
1.3.3 还原糖和总糖含量的测定 采用苯酚硫酸法[6]。
1)标准曲线的制作。分别取1 mg∕mL 葡萄糖标准溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL 于试管中,分别加去离子水至体积为2 mL,加入DNS 试剂1.5 mL,充分混匀。将各管在沸水浴中加热5 min 后取出,冷却至室温,用去离子水定容至25 mL,混合均匀。以空白为对照,在波长540 nm 处测定吸光度[6]。
2)供试液的制备与样品还原糖含量测定。准确称取3.00 g 米油皮、米汤、米粒、米汁和米粥5 种原料干粉,放入三角瓶,先用少量去离子水调成糊状,然后补足至50 mL,搅匀,置于50 ℃恒温水浴20 min。将浸出液 转 移到50 mL 离 心管,5000 r∕min 离心10 min,沉淀洗一次,再离心,将2 次离心的上清液收集在100 mL 容量瓶,定容、混匀,作为待测液。后续步骤同标准曲线,最后根据标准曲线求出5 种原料还原糖的含量。计算公式如下。
3)供试液的制备与样品总糖含量测定。准确称取5 种原料干粉各1.00 g ,放入三角瓶,加15 mL 去离子水及10 mL 6 mol∕L HCl,沸水浴30 min,冷却,调pH 至中性,过滤,再冲洗烧瓶及滤纸,收集滤液至100 mL 容量瓶,定容,混匀,作为总糖待测液。后续步骤同标准曲线,最后根据标准曲线求出5 种原料总糖的含量。计算公式如下。
1.3.4 淀粉含量的测定 参考文献[7]测定淀粉含量,采用双波长法[8]测定直链淀粉和支链淀粉含量。
式中,X为查双波长直链淀粉(支链淀粉)标准曲线得到的样品液中直(支)链淀粉含量(mg);V为待测液体积(mL),m为样品质量(g)。
1.3.5 脂肪、蛋白质、粗纤维、灰分含量的测定 脂肪含量测定采用索氏提取法[9],蛋白质含量的测定采用凯氏定氮法[10],粗纤维含量的测定采用酸性洗涤剂法[11],灰分含量的测定采用GB 5009.4—2016食品中灰分的测定方法[12]。
式中,m1为玻璃滤器质量(g);m2为玻璃滤器加残渣质量(g)。
1.3.6 体外消化法测定小米粥不同组分在胃肠道中的消化率 采用胃蛋白酶-胰酶两步法评定小米粥不同组分的消化率[13]。
1)胃蛋白酶消化阶段,5 种原料干粉分别称取1 g于250 mL锥形瓶,每个样品3个重复。加入25 mL磷酸缓冲液(pH=6.0,0.1 mol∕L),搅拌,加入10 mL 0.2 mol∕L 盐酸,1 mL 新鲜的胃蛋白酶溶液,调pH 至2.0,加入0.5 mL 0.5%的氯霉素溶液,置于40 ℃的恒温水浴摇床中(120 次∕min),计时消化4 h。
2)加入10 mL 磷酸缓冲液(pH=6.8,0.2 mol∕L),再加入5 mL 0.6 mol∕L 的NaOH 溶液,加入1 mL 新鲜胰酶(胰蛋白酶、糜蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶)溶液,调pH 至7.0,置于40 ℃恒温水浴摇床继续消化4 h。
3)消化结束,在锥形瓶中加入5 mL 20%的磺基水杨酸溶液,置于室温30 min,过滤,将残渣同无氮滤纸置于105 ℃烘箱中烘至恒重,测定残渣重量。计算小米粥不同组分的干物质消化率。
4)采用国标法测定消化后干物质中各营养成分含量,从而与消化前物质比较,计算各种营养物质的消化情况。
2 结果与分析
2.1 小米粥各组分水分含量的测定
采用直接干燥法测得小米粥各组分水分含量,结果如表1 所示。从表1 可以看出,几种原料中水分含量值都不高,其中小米中水分含量最高,米粒中水分含量最低,而其他几种组分中水分含量相差不大。由于样品预处理方式全部相同,经过分析,水分含量高低可能与样品自身水分含量、疏松度与吸水性等有关。
表1 小米粥各组分中的水分含量 (单位:%)
2.2 小米粥各组分还原糖和总糖含量的测定
2.2.1 还原糖标准曲线的制作 图1 为葡萄糖标准曲线,回归方程为y=0.6633x-0.0256,R2为0.9972。其中,y为吸光度,x为溶液中葡萄糖含量。
图1 葡萄糖标准曲线
2.2.2 小米粥各组分还原糖和总糖含量的测定 采用苯酚硫酸法测得小米粥各组分还原糖和总糖含量,结果如表2 所示。从表2 可以看出,小米及米粥各组分中还原糖的含量普遍很低,其中米粒中含量最低,几乎检测不出,而米汁中含量最高(除小米外)。可以推知,小米经过熬煮,还原糖大部分溶解到了水中。总糖含量在小米及米粥各组分中普遍较高,其中米汤中含量最高,米汁中最低,分析可能与淀粉和粗纤维的分配有关。
表2 小米粥各组分中的还原糖、总糖含量 (单位:%)
2.3 小米粥各组分淀粉含量的测定
2.3.1 小米粥各组分淀粉含量的测定 采用GB∕T 5514—2008 的方法测定淀粉含量,结果如表3 所示。从表3 可以看出,小米粥各组分中,米皮油中淀粉含量最高,达到62.84%,米汤中则最低。分析可能是在熬煮过程中,淀粉发生糊化,物理性质改变而膨胀上浮,冷却后凝结在表面的油皮中。因此,较大的淀粉含量决定了米皮油较为光滑、细腻的物理特性。
表3 小米粥各组分中的淀粉含量 (单位:%)
2.3.2 直链淀粉和支链淀粉含量测定波长的确定 采用双波长法确定了小米粥各组分中直链淀粉、支链淀粉的测定波长和参比波长,结果如图2 所示,λ1(514 nm)和λ2(565 nm)是用于直链淀粉测定的测定波长和参比波长,λ3(545 nm)和λ4(730 nm)用于支链淀粉含量测定的测定波长和参比波长。
图2 直链淀粉/支链淀粉检测波长
2.3.3 直链淀粉和支链淀粉检测标准曲线的制作分别以直链淀粉、支链淀粉含量为横坐标,ΔA直和ΔA支为纵坐标绘制的直链淀粉和支链淀粉标准曲线(图3、图4),回归方程分别为y=0.2602x+0.0003,R2=0.9965 和y=0.1075x-0.0007,R2=0.9997。
图3 直链淀粉检测标准曲线
图4 支链淀粉检测标准曲线
2.3.4 小米粥各组分中直链淀粉和支链淀粉含量的测定 原料经洗涤干燥脱脂等一系列处理后,采用双波长法测定其中直链淀粉和支链淀粉含量,结果如表4 所示。由表4 可以看出,米皮油中直链淀粉含量最高而支链淀粉含量最低,米粒中直链淀粉含量最低,而支链淀粉含量则较高。米粒中支链淀粉和直链淀粉的比值最大,米皮油中最少。结合各组分中总淀粉的含量分析,导致该结果的原因可能是小米熬煮后,直链淀粉糊化上升形成油皮的比例比支链淀粉大,但总量还是不及支链淀粉多。
表4 小米粥各组分中的直链淀粉和支链淀粉含量
2.4 小米粥各组分粗脂肪含量的测定
采用索氏抽提法测定粗脂肪含量,结果如表5所示。由表5 可知,米粒中所含粗脂肪最多,米汁中含量最低,米皮油中粗脂肪含量也较少。可能是小米经过熬煮后,绝大部分粗脂肪仍停留在米粒内部,没有被较多地提取出来。
表5 小米粥各组分中的脂肪、粗纤维、灰分含量 (单位:%)
2.5 小米粥各组分粗纤维含量的测定
采用酸性洗涤剂法测定小米粥各组分中粗纤维含量,结果如表5 所示。由表5 可知,米皮油中粗纤维含量最高,米汁中粗纤维含量最低。分析可能是纤维溶胀以后上浮,凝结在米粥表皮的油皮中,从而导致米皮油中含量大大高于其他组分。
2.6 小米粥各组分灰分含量的测定
小米粥各组分中灰分含量测定结果如表5 所示。从表5 可以看出,米汁中灰分含量较大,其他组分中灰分含量均较低。灰分是指待测物灼烧后残留的物质,主要内容为矿质元素等,可知小米经过熬煮,其中的无机物、矿物质很多都溶解到水中,成为米汁的成分。
2.7 小米粥各组分蛋白质含量的测定
采用凯氏定氮法测定小米粥各组分中蛋白质含量,结果如表6 所示。由表6 可知,米粒中蛋白质含量最高,米汁中含量最低,米皮油中也较少。推测可能是蛋白质在水中溶解度较低,经过熬煮后在米汤中溶解不多,大部分仍存留在米粒中。
表6 小米粥各组分中的蛋白质含量 (单位:%)
2.8 小米粥中的各组分成分含量分析
通过采取相应方法测定小米粥各组分中主要营养成分,小米中总糖含量最大,其次是淀粉和蛋白质,还原糖和灰分的含量都很少;特别分析米皮油中各物质的比例,总糖、淀粉和粗纤维的含量很高,其余成分都不突出。此外,经计算,所测定各组分中水分、还原糖、淀粉、粗脂肪、粗纤维、蛋白质和灰分的含量总和接近100%,其余物质含量仍待进一步研究测定。
2.9 小米粥不同组分在胃肠道中的消化率测定
小米及小米粥不同组分的体外消化率有一定的差别,小米、米粥、米皮油、米汤、米粒、米汁的消化率分 别 为38.54%±3.01%、50.93%±8.07%、45.73%±3.06%、55.51%±5.02%、53.43%±6.7%、54.23%±6.06%。
除了生小米外,其中消化率最低的为米皮油成分,由此可见,其他物质中含有的蛋白质、粗脂肪和淀粉容易被动物的消化道所利用,而米皮油的利用度比较低,可能是由于其中含有较高的粗纤维,不易被消化道所消化,而是进入大肠,被大肠内微生物所分解,从而促进肠道蠕动,调节肠道菌群,促进肠道吸收。
3 小结
通过对小米粥各组分的主要营养成分进行测定分析,小米在熬煮处理以后,主要成分是碳水化合物类,其他成分含量都不是很高,而其中绝大部分脂肪和蛋白质仍停留在米粒内部,还原糖和无机物大部分溶解到了水中。此外,在熬煮过程中,淀粉发生糊化,物理性质改变而膨胀上浮,冷却后凝结在表面的油皮中,其中直链淀粉糊化上升形成油皮的比例比支链淀粉大,但总量小于支链淀粉。由于纤维溶胀以后上浮,导致米皮油中纤维素含量最高,米汁纤维素含量最低。小米经过熬煮,其中的无机物、矿物质大部分溶解到水中,使得米汁中的灰分含量较高。