犊牛大肠杆菌病的诊断与防治

冯明祥，徐 雨，韦登雄，图 雅，陈 颖

（贵州省关岭县动物疫病预防与控制中心 561300）

犊牛大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的消化道疾病，感染犊牛消瘦﹑腹泻﹑脱水甚至死亡，部分犊牛治疗不及时，恢复后生长发育迟缓，给养殖业造成严重的经济损失[1]。大肠杆菌分为非致病性大肠杆菌和致病性大肠杆菌，致病性大肠杆菌常在饲养环境不良﹑过度拥挤﹑营养不足等情况下引起犊牛发病，并常与其他致病菌混合感染，导致犊牛病情复杂，治疗不及时，甚至导致死亡。

该病目前在全国各地均有发生，通常使用抗菌药物进行治疗，这也导致细菌耐药性不断加强，一方面是大肠杆菌自身的改变，如产生灭活或钝化抗菌药物的酶﹑抗菌药物靶基因改变﹑细胞浆膜的通透性改变以及代谢途径改变等；一方面是药物的选择压力，如联合使用药物﹑长期使用同类药物﹑低剂量使用药物等，不合理的使用药物导致治疗效果越来越差[2-3]。大肠杆菌病属于人畜共患病，病菌可以通过动物传染动物，动物传染人，人传染人，最终导致人类感染，其耐药质粒可以遗传，当人感染了耐药性高的细菌时，治疗费用过高，甚至无药可医[4]。因此，本文通过对大肠杆菌的流行特点﹑临床特点﹑诊断﹑预防和治疗等进行讨论，以期为制定科学合理的防治措施奠定基础。

1 流行特点

犊牛大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的消化道疾病，患病犊牛的主要临床表现为消瘦﹑腹泻和脱水。该病在初生犊牛中发病率较高，特别是10日龄内的犊牛，其余日龄的牛感染但不发病[5]。该病全年均可发生，但以冬春季发病率较高。全国各地均有发生，呈地方性流行。犊牛大肠杆菌病的传染源主要是患病犊牛以及带菌犊牛，主要通过消化道感染患病，也能够通过产道和脐带感染患病。

2 临床症状

根据临床症状将其分为败血症型﹑肠毒血症型和肠炎型三种[6]。

2.1 败血症型

多发于2～3d龄犊牛，精神萎靡﹑被毛凌乱﹑体温升高至40℃以上，食欲下降甚至废绝，淡黄色水样腹泻，通常发病后1d内急性死亡，个别病犊还未出现临床症状就突然死亡，死亡率50%～80%。

2.2 肠毒血症型

多发于1周龄犊牛，此发病率和死亡率较高，达70%～100%，常无任何症状突然死亡。部分病程稍长的，有典型的中毒性神经症状，发病初期兴奋，后期沉郁，昏迷直至死亡，常有白色带气泡的腹泻。

2.3 肠炎型

又叫犊牛白痢，多发于1～2周龄犊牛，患病初期犊牛体温上升至40℃以上，数小时后开始腹泻，初期粪便呈淡黄色﹑粥样，随病程发展，粪便颜色变为灰白色，水样，有时可见未消化的凝乳块﹑凝血块及泡沫，有酸败气味。发病末期，犊牛会出现肛门失禁，可因脱水或酸中毒死亡。如果及时治疗，通常能够治愈，但是康复后的犊牛生长发育迟缓，常继发脐炎﹑关节炎﹑肺炎的炎症。

3 病理解剖

败血症型﹑肠毒血症型病死的犊牛，通常剖检无明显的病理变化。肠炎型病死的犊牛胃黏膜充血﹑出血；小肠黏膜充血﹑出血，部分黏膜上皮脱落；肠系膜淋巴结肿大；心脏内膜出血；肝脏和肾脏苍白，可见出血点。

4 实验室诊断

采集病死犊牛的内脏﹑血液和粪便等，其中对败血型和肠毒血型的采集内脏和血液，无菌划线与麦康凯培养基和伊红美蓝培养基，大肠杆菌麦康凯培养基中生长为圆形﹑表面光滑﹑粉红色，在伊红美蓝琼脂培养基中菌落为圆形﹑表明光滑带有金属光泽﹑深紫黑色，对符合分离特征的进行革兰氏染色镜检，显微镜下观察呈红色﹑短杆状，为革兰氏阴性菌；对符合染色特征的分离菌进行生化鉴定，大肠杆菌在靛基质﹑甲基红﹑动力﹑产气﹑山梨醇等实验中为阳性，在VP﹑硫化氢﹑苯丙氨酸﹑枸橼酸盐﹑尿素等实验中为阴性，进一步确诊还可以使用聚合酶链式反应技术﹑酶免疫分析技术﹑免疫磁珠分离技术和血清学诊断技术等。

在确定分离出的大肠杆菌后，还需要进一步进行动物致病性实验，分析分离株的致病力，还可以进行血清型鉴定，确定分离株血清型，以及耐药性实验，分析分离株耐药情况，为后续用药进行指导。

5 防治措施

5.1 预防措施

5.1.1 加强饲养管理

管理不当导致犊牛腹泻的外在原因，如环境脏乱﹑圈舍阴冷潮湿﹑舍内过热或过冷﹑营养不足等都会引起犊牛腹泻，因此，加强饲养管理，保持圈舍干燥卫生﹑保温通风﹑合理饲养密度等都可以减低犊牛发病率。

第一，妊娠母牛的饲养管理。逐渐增加精料，增强妊娠母牛的体质，保证每日定时运动，防止便秘，并根据不同孕期添加适当的蛋白质和电解多维等。分娩前一周消毒擦干后转入产房，保持产房干燥通风，每日更换垫料。

第二，产后母牛的饲养管理。及时处理胎衣，促进排恶露，对阴道周围每天定时温水洗净消毒，定期清理牛舍内的粪污，保持干燥卫生，同时控制室温。产后以饲喂干草或青草为主，少喂精料，饮水使用温水。每日温水清洗消毒乳房一次，同时定时按摩挤压。产后一周内的母牛，如无其他问题，转出产房。

第三，新生犊牛的饲养管理。犊牛出生后，应立即清除口鼻中的污物，剪断脐带，长度在10～12cm，用碘酊消毒处理伤口，再包上纱布，同时尽快擦干身体。新生犊牛消化道系统如胃肠道黏膜尚未发育完全，对疾病的抵抗能力弱，而牛初乳可以有效保护胃肠黏膜，对犊牛抵抗疾病有很大作用，在犊牛出生后尽快饲喂初乳，获得被动抗体。后期保持环境卫生干燥，避免突然刺激犊牛，减少应激，可以降低疾病的发生。

5.1.2 清洗消毒

大肠杆菌对外界的抵抗力不强，通常能在室温下存活数周，在土壤和水中能存活120d，而一般50℃ 30min或者60℃15min即可被灭活，大部分的消毒药物也可以将其快速杀死，但是当其在黏液和粪便中，消毒药物的效果会减弱[7]，因此，在消毒之前，日常清洗至关重要。

产房需要提前准备，先用消毒液喷湿地面后，再清扫场地，铲除污物，确保不留死角，清扫完成后，关闭好圈舍门窗，用消毒液对圈舍地面﹑四周墙壁﹑门窗﹑栏柱等进行喷洒消毒，饲槽﹑饮水槽用消毒液洗刷，待2h后打开门窗通风，用清水冲洗，干燥后备用。

在妊娠母牛分娩前后对母牛乳房﹑外阴﹑肛门和后驱用温热水清洗消毒，接生相关工作人员做好接产相关器具和自身的消毒，全程进行无菌操作，避免脐带感染，后续做好日常清洗消毒工作。圈舍消毒可选用氢氧化钠﹑戊二醛类﹑氯制剂类等；器具消毒可选用季铵盐类﹑复方含碘类（碘﹑磷酸﹑硫酸复合物）﹑过硫酸氢钾类；皮肤消毒可选用含碘类﹑来苏儿﹑高锰酸钾等。

5.1.3 疫苗免疫

对于常有犊牛大肠杆菌病发病的牛场，推荐接种大肠杆菌疫苗，目前，已经研究出O78﹑O26和O15三价苗﹑O2﹑O86﹑O101三价苗﹑K99-F41二价灭活苗以及亚单位疫苗和基因疫苗等[8-11]，这些疫苗通常在产前15～45d注射，因此，注射时要注意动作迅速轻柔，避免母牛受惊，同时，大肠杆菌的血清型多达几百种，并存在交叉性，因此，不同地区﹑不同场流行的血清型差异很大，当市场上的疫苗不能满足养殖场防疫需求的时候，可以考虑制备该场分离株的灭活疫苗。

5.2 治疗措施

5.2.1 抗菌消炎：对刚养殖的发病牛场主要采用常用抗生素药物进行治疗，如链霉素﹑庆大霉素﹑氧氟沙星等，应严格按照说明书进行使用，不要过量或者少量，精准用药，尽量避免联合使用抗生素。对于老场或是耐药性严重的养殖场不要盲目用药，因立刻采样送实验室检测，根据药敏实验针对性用药，避免耐药性的进一步加重。

对于抗菌药物的使用，严禁使用禁止药物和假冒伪劣的药物，根据抗菌药物分级分类使用，从低到高，从窄到广，谨慎联合使用抗菌药物。可选用高效﹑休药期短和低残留的品种以及中药﹑微生态制剂等绿色兽药。

5.2.2 补液：腹泻导致大量水分流失，可根据脱水量进行补水。针对脱水不严重的，犊牛仍具有食欲能够自己吮吸的情况，可以服补充温热的糖盐水。对脱水严重的，犊牛不能吮吸的情况，可以静脉注射5%葡萄糖生理盐水。一旦犊牛出现酸中毒症状，缓慢静脉注射5%的碳酸氢钠。

5.2.3 调节肠胃机能：可使用乳酸和鱼石脂，用温热水混匀后灌服，连续使用3次。也可以口服吸附剂，保护胃肠黏膜，如硝酸铋﹑活性炭等，避免犊牛吸收大量的毒素。

5.2.4 调节肠道的微生态平衡：口服生态制剂，补充益生菌群，如促菌生﹑乳酶生或者其他乳杆菌制剂，让肠道的菌群尽快恢复到正常微生态平衡的状态。

6 讨论

犊牛大肠杆菌病在牛场养殖中时有发生，败血症型和肠毒血症型通突然发病，还未进行治疗就已死亡，死亡率高，肠炎型通常使用敏感抗生素药物治疗即可控制痊愈。然而，不规范的使用药物，导致大肠杆菌的耐药性不断增强。目前，大多数规模牛场主﹑散养户还没意识到细菌耐药性对养殖场的危害，而越来越多的文献报道，大肠杆菌多重耐药性的普遍性，韩和祥在四川部分规模化肉牛场中分离的50株致病性大肠杆菌进行耐药性实验，结果表明对强力霉素﹑多粘菌素﹑庆大霉素﹑磺胺间甲氧嘧啶﹑氨苄西林﹑阿莫西林和青霉素的耐药率分别为72%﹑78%﹑78%﹑84%﹑92%﹑94%和96%，并且有多重耐药现象[12]。肖跃强等在黄河三角洲部分地区肉牛场中分离出33株大肠杆菌，对强力霉素﹑阿莫西林﹑红霉素﹑磺胺甲基唑84.8%﹑81.8%﹑75.8%和81.85%，也有多重耐药现象[13]。有的病例甚至出现无药可以的状态，王海瑞对分离菌进行药敏实验，结果表明部分分离株对使用药物全部耐药[14]。因此，作为基层兽医部门必须提高对细菌耐药性的警惕，引导和培训规模养殖场主和散养户对细菌耐药性的防范意识，根据当地流行情况结合各场自身条件制定合理长期可行的用药制度，逐步降低细菌耐药性，减少耐药性对养殖业造成的危害，为百姓带来更大的经济效益。

大肠杆菌的耐药性，不单单影响养殖业的发展，同时对食品安全和公共卫生安全产生重大隐患，耐药菌株随着粪便﹑尿液等排出体外，进入外界环境中，对环境和人类造成严重危害，世界各国每年都有人通过不同途径感染致病性大肠杆菌，如饮用污染的食物等，最终导致发病或死亡的报道[15]。而且，大肠杆菌病是人畜共患病，致病菌株可以在人和动物，动物和动物之间传播，耐药基因可以遗传，可以不断转移，耐药基因的传播范围不断扩大，最直接反应在人类医疗上，新药物的研发速度赶不上细菌耐药性的增强速度，最终一起常见细菌病的感染，也可能会无药可医[4]。因此，制定合理的用药规章制度，减缓耐药性产生的速度，以延长抗菌药物的使用时间，对全世界都至关重要。

2021年10月，为遏制细菌的耐药，维护国家的公共卫生安全以及生物安全，我国农业农村部发布《全国兽用抗菌药使用减量化行动方案（2021年—2025年）》，方案中要求到2025年末，50%以上的规模养殖场将从饲养管理﹑生物安全防护﹑规范用药﹑谨慎用药﹑替代用药五个方面进行兽药减量化行动[16]。因此，抗菌药物的减量行动势在必行，各部门和机构都应该提前做好准备工作。目前，发达国家对致病性大肠杆菌高度重视，并形成规范的国家监测网络，而我国在该病监测和研究等方面还有不足，但建立致病性大肠杆菌的监测网已成为大趋势，各地区提前做好流行病学调查，建立监测网络，并根据地方实际情况制定健康监测检测方案，以期为指导后续行动做好准备工作。