阿糖腺苷对EB病毒相关性传染性单核细胞增多症患儿 T淋巴细胞亚群的影响

祁 鑫

（盐城市第三人民医院儿内科，江苏 盐城 224000）

EB病毒（EBV）属于人类疱疹病毒4型，主要通过唾液传播，也可经输血传染，与多种恶性肿瘤的发生密切相关。EBV感染是导致传染性单核细胞增多症（infectious mononucleosis，IM）的重要因素之一，好发于儿童群体，患儿常见发热、咽峡炎、颈部淋巴结肿大等症状，若未及时得到有效治疗，威胁患儿生命安全。对于此症，临床上主要进行退热、抗感染、护肝等对症治疗，但效果不明显[1]。更昔洛韦为临床常用抗病毒药，对于因免疫功能缺陷而感染巨细胞病毒的患儿治疗效果较好，但该药具有细胞毒性，且对于EBV相关性传热性单核细胞增多症（EBV-IM）患儿的抗病毒作用无法达到理想效果[2]。阿糖腺苷为抗病毒药，主要通过抑制病毒DNA多聚酶活性，以阻断病毒DNA的合成，对多种病毒的杀灭作用较强[3]。基于此，本研究旨在探讨阿糖腺苷治疗EBV-IM患儿后，其T淋巴细胞亚群水平的变化，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年1月至2022年9月盐城市第三人民医院收治的54例EBV-IM患儿，并以随机数字表法分为对照组和观察组，各27例，对照组中男患儿15例，女患儿12例；年龄3～13岁，平均（8.00±1.21）岁；病程6～13 d，平均（9.50±1.02） d。观察组中男患儿16例，女患儿11例；年龄2～13岁，平均（8.00±1.23）岁；病程5～14 d，平均（9.50±1.05） d。两组患儿一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。诊断标准：参照《诸福棠实用儿科学（第8版）》[4]中关于 EBV-IM的诊断标准。纳入标准：符合上述诊断标准，有发热、咽峡炎、肝脏肿大、脾脏肿大等症状者；EB病毒DNA（EBV-DNA）阳性、EB病毒早期抗原免疫球蛋白G抗体（EBV-EA-IgG）及EB病毒衣壳抗原免疫球蛋白M抗体（EBV-VCA-IgM）等EBV特异性抗体阳性等。排除标准：有心肌炎、重症基础性疾病者；有全身感染性疾病者；有自身免疫性疾病者等。本研究已通过院内医学伦理委员会批准，所有患儿法定监护人均签署知情同意书。

1.2 治疗方法 对照组患儿行退热、抗感染、护肝等对症治疗后，加以10 mg/kg体质量注射用更昔洛韦（湖北科益药业股份有限公司，国药准字H10980189，规格：50 mg/支）静脉滴注，2次/d，治疗1周后剂量变更为5 mg/kg体质量，1次/d，并继续持续给药1周。观察组患儿对症治疗后，加以注射用单磷酸阿糖腺苷（瑞阳制药股份有限公司，国药准字H20084333，规格：0.1 g/支）静脉滴注，10 mg/kg体质量，1次/d，持续治疗2周。

1.3 观察指标 ①对患儿临床疗效进行判定，分为显效（用药5 d内体温开始下降，7 d内恢复正常，肝脏、脾脏体积缩小，咽峡炎好转，异型淋巴细胞比例恢复正常）、有效（用药7 d内体温开始下降，10 d内恢复正常，肝脏、脾脏体积缩小，咽峡炎好转，异型淋巴细胞比例下降但未恢复正常）、无效（用药治疗10 d内体温仍未恢复正常水平，肝脏、脾脏体积等均未见明显缩小，异型淋巴细胞比例未见明显改变）[4]。总有效率=显效率+有效率。②统计两组患儿临床症状恢复时间（退热、咽峡炎改善、淋巴结肿大消退、肝脏回缩至正常、脾脏回缩至正常）。③于治疗1、2周后采集患儿静脉血5 mL，抽取其中2 mL，加入淋巴细胞分离液2 mL，以2000 r/min的转速，离心10 min，吸取白细胞层，然后以12000 r/min离心5 min，去除上清液，在沉淀中加入DNA提取液，应用荧光定量聚合酶链反应扩增法检测EBV-DNA（阳性：扩增曲线呈S形，且EBV-DNA＞1×103copies/mL）；另取3 mL样本，以3000 r/min离心5 min后采集上层血清，以酶联免疫吸附实验法检测EBV-EA-IgG（阳性：标本吸光度/标准品吸光度＞0.50）、EBV-VCA-IgM（阳性：标本吸光度/标准品吸光度≥0.80）。④血样采集方法同③，随后采用流式细胞仪对患儿CD3+、CD4+、CD8+百分比进行检测，并对 CD4+/CD8+比值进行计算。

1.4 统计学方法 采用SPSS 22.0统计学软件分析数据，计数资料以[例(%)]表示，行χ2检验；经K-S检验证实计量资料均符合正态分布，以(±s)表示，行t检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患儿治疗效果比较 观察组患儿治疗总有效率[96.30%（26/27）]相比于对照组[70.37%（19/27）]升高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组患儿治疗效果比较[ 例(%)]

2.2 两组患儿临床症状恢复时间比较 观察组患儿临床症状恢复时间相比于对照组均缩短，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表2。

表2 两组患儿临床症状恢复时间比较(d，±s)

表2 两组患儿临床症状恢复时间比较(d，±s)

组别 例数 退热时间 咽峡炎改善时间 淋巴结肿大消退时间 肝脏回缩至正常时间 脾脏回缩至正常时间对照组 27 4.98±0.60 5.27±0.67 10.87±2.12 7.23±0.81 10.65±1.73观察组 27 3.65±0.45 4.13±0.48 7.49±2.03 6.21±0.76 7.23±1.68 t值 9.215 7.187 5.984 4.772 7.369 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.3 两组患儿各项抗体阴转率比较 治疗1、2周后，相较于对照组，观察组患儿EBV-DNA、EBV-EA-IgG及EBV-VCA-IgM阴转率均升高，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表3。

表3 两组患儿各项抗体阴转率比较[ 例(%)]

2.4 两组患儿T细胞亚群水平比较 相较于治疗前，治疗后两组患儿CD3+、CD8+百分比均降低，观察组低于对照组；CD4+百分比、CD4+/CD8+比值均升高，观察组高于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表4。

表4 两组患儿T淋巴细胞亚群水平比较( ±s)

表4 两组患儿T淋巴细胞亚群水平比较( ±s)

注：与治疗前比，*P＜0.05。

组别 例数 CD3+(%) CD4+(%) CD8+(%) CD4+/CD8+治疗前 治疗2周后 治疗前 治疗2周后 治疗前 治疗2周后 治疗前 治疗2周后对照组 27 62.32±2.89 60.21±3.60* 22.91±5.78 30.21±5.87* 39.27±11.98 29.33±2.67* 0.42±0.14 1.06±0.28*观察组 27 63.02±2.91 58.30±3.21* 22.95±5.80 34.10±6.10* 39.30±12.01 24.10±2.58* 0.43±0.15 1.42±0.26*t值 0.887 2.058 0.025 2.388 0.009 7.319 0.253 4.896 P值 ＞0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05

3 讨论

IM主要是一种由EBV引起的、以侵犯淋巴系统为主的急性感染性疾病，因 EBV-IM 为免疫病理学疾病，其病理特征是EBV感染下的CD8+T淋巴细胞被过度激活，产生大量细胞因子，引起相关脏器损害。临床治疗分为对症治疗、抗病毒治疗两部分，可在一定程度上缓解患儿症状，但单一治疗效果不佳[5]。更昔洛韦是目前临床治疗EBV-IM使用率较高的抗病毒药物，通过竞争性抑制脱氧鸟苷三价磷酸盐与DNA聚合酶的结合，起到抗病毒效应，但其不良反应较多，导致患儿耐药性较差，进而影响疗效[6]。

阿糖腺苷的代谢产物可通过作用于病毒DNA多聚酶表达，阻断病毒DNA的复制，抗病毒作用显著，可促进患儿疾病的有效改善，其作用机制与更昔洛韦类似，但阿糖腺苷在停药后血浆浓度会快速降低，减少不良反应的发生情况，从而避免因不良反应的发生影响患儿依从性，导致治疗效果不佳[7]。本研究发现，相较于对照组，观察组患儿各项临床症状恢复时间均缩短，治疗总有效率升高，提示阿糖腺苷治疗EBV-IM患儿，可有效缩短临床症状恢复时间，疗效显著。

EBV不仅会感染B淋巴细胞，还会对NK细胞、T淋巴细胞亚群等其他细胞产生感染，使患儿免疫功能受到损伤，抵抗病毒功能的能力下降，且无法清除感染病毒的免疫细胞，刺激淋巴细胞释放大量的细胞因子，降低患儿机体免疫力，不利于病情恢复[8]。本研究中，治疗1、2周后，观察组患儿EBV-DNA、EBV-EA-IgG及EBV-VCA-IgM阴转率均高于对照组，提示阿糖腺苷可清除EBV，纠正免疫紊乱，作用明显。分析其原因可能是，阿糖腺苷为嘌呤核苷类抗病毒药物，其通过抑制病毒信使RNA（mRNA）和转移RNA（tRNA）的甲基化，发挥抗病毒作用，同时阿糖腺苷作为病毒DNA聚合酶活性抑制剂和病毒核苷酸还原酶活性剂，具有双倍的抑制病毒复制能力，相比于更昔洛韦（病毒DNA聚合酶活性抑制剂）的抗病毒效果 更好[9]。

EBV进入B淋巴细胞循环后，会造成全身性感染，导致T淋巴细胞出现强烈的免疫应答，并转化为病毒性T淋巴细胞，对周围器官组织造成损害[10]。本研究中，治疗2周后观察组患儿CD3+、CD8+均低于对照组，CD4+、CD4+/CD8+均高于对照组，提示阿糖腺苷可有效增强EBV-IM患儿机体T淋巴细胞亚群活力，改善免疫系统的功能，提高患儿机体抵抗疾病的能力，促进病情恢复。分析原因可能为，更昔洛韦的半衰期为2.9 h，相比于阿糖腺苷3.5 h的半衰期更短，虽然能通过发挥抗病毒作用来改善免疫功能，但维持时间短，因此整体治疗效果并不理想；而阿糖腺苷水溶性好、起效快，在进入细胞后，磷酸化为阿糖腺苷二磷酸和阿糖腺苷三磷酸，抗病毒活性主要由三磷酸所引起，通过竞争性地结合病毒DNA上的结合位点，抑制病毒DNA上的转移酶活性，渗入病毒并与DNA链末端位置进行连接，抑制病毒DNA的继续合成，进而改善机体状态，减轻EBV对免疫功能的损伤，调节T淋巴细胞，增强患儿免疫力[11]。

综上，阿糖腺苷治疗EBV-IM患儿，可有效清除EBV，纠正免疫紊乱，调节T淋巴细胞，从而缩短临床症状恢复时间，且疗效显著，值得临床推广。