血清IgE、IL-10、TNF-α水平在分泌性中耳炎患儿早期诊断和病情评估中的应用价值

王定松，马善春*，雷小平，连 刚，梁雪梅

(成都医学院第三附属医院·成都市郫都区人民医院 1.耳鼻咽喉头颈外科；2.泌尿外科，四川 成都610000)

分泌性中耳炎(SOM)在成人与儿童中均可发病，但儿童发病率较高，诊断较为困难，进而导致漏诊率较高[1-2]。近年来，随着临床对于SOM发病机制的深入研究，已有学者证实中耳积液中存在肿瘤坏死因子(TNF)-α，白介素-10(IL-10)，免疫球蛋白E(IgE)[3-5]。目前临床对于上述细胞因子的研究多集中于成人SOM患者，关于儿童的研究较少。本研究旨在探讨血清IgE、IL-10、TNF-α水平在SOM患儿早期诊断和病情评估中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择成都医学院第三附属医院2017年7月-2020年9月收治的103例SOM患儿作为研究组，纳入标准：①符合SOM诊断标准[6]；②均在本院接受治疗；③患儿临床资料完整；④患儿家属对本研究知情同意。排除标准：①合并变应性鼻炎、哮喘等影响免疫功能疾病；②合并恶性肿瘤者；③存在中耳占位、鼻咽部占位等疾病；④近3个月内存在抗生素或激素类药物使用史。另选择同期体检的87例健康儿童作为对照组。研究组男63例，女40例；年龄3-13岁，平均(6.43±1.27)岁；病情程度：急性41例，亚急性33例，慢性29例。对照组男51例，女36例；年龄3-12岁，平均(6.28±1.35)岁。两组研究对象一般资料比较无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法根据SOM患儿病因进行治疗，其中上呼吸道感染患儿根据感染原因对症治疗，细菌感染患儿给予抗菌、消炎治疗，病毒感染患儿给予抗病毒治疗，腺样体肥大或保守治疗无效患儿给予腺样体切除手术治疗。分别抽取研究组(治疗前后)和对照组(体检当日)儿童空腹静脉血，以3 000 r/min的速度离心10 min，取上层清液，于-20℃冷冻保存。采用酶联免疫吸附法检测血清IgE、IL-10、TNF-α水平，具体方法：根据说明配制各种所需试剂，从平衡至室温的密封袋中取出所需的板条，除空白孔外，分别将不同浓度标准品加入相应孔中，100 μl/孔；将标准品/标准稀释液按1:5稀释，加入相应孔中，100 μl/孔，封孔板，37℃温箱孵育90 min；洗板4次，加入酶标抗体工作液100 μl/孔，37℃孵育60 min；洗板4次，加入显色剂100 μl/孔，避光显色15-20 min；加入终止液100 μl/孔，混匀后测量OD45值。

2 结果

2.1 两组患儿血清IgE、IL-10、TNF-α水平比较研究组患儿血清IgE、IL-10、TNF-α水均显著高于对照组(P<0.05)，见表1。

表1 两组患儿血清IgE、IL-10、TNF-α水平比较

2.2 血清IgE、IL-10、TNF-α水平对SOM的诊断价值血清IgE、IL-10、TNF-α水平三者联合诊断SOM的曲线下面积(AUC)、敏感度均显著高于单一指标诊断(P<0.05),见表2和图1。

表2 血清IgE、IL-10、TNF-α水平对SOM的诊断价值

2.3 不同病程患儿血清IgE、IL-10、TNF-α水平比较急性SOM患儿血清IgE、IL-10、TNF-α水平显著低于亚急性和慢性患儿，而亚急性患儿上述血清指标均显著低于慢性患儿(P<0.05),见表3。

2.4 血清IgE、IL-10、TNF-α水平与疾病病程相关性血清IgE、IL-10、TNF-α水平均与疾病病程呈正相关(P<0.05),见表4。

表3 不同病程患儿血清IgE、IL-10、TNF-α水平比较

图1 血清IgE、IL-10、TNF-α水平对SOM的诊断ROC曲线

表4 血清IgE、IL-10、TNF-α水平与疾病病程相关性

2.5 研究组治疗前后血清IgE、IL-10、TNF-α水平比较与治疗前比较，研究组患儿IgE、IL-10、TNF-α水平均显著降低(P<0.05),见表5。

表5 研究组治疗前后血清IgE、IL-10、TNF-α水平比较

3 讨论

SOM若可在疾病早期及时诊断和治疗，则预后较好[7]。有研究显示SOM患者血清IgE、IL-10、TNF-α水平存在显著升高[8-9]。本研究对SOM患儿进行血液分析，结果显示研究组患儿血清IgE、IL-10、TNF-α水平均显著高于对照组，提示SOM患儿也存在血清IgE、IL-10、TNF-α水平异常升高。分析其原因，中耳黏膜经抗原刺激后，可产生免疫应答[10]。而IgE主要由消化道、呼吸道黏膜细胞产生，在正常儿童血液中含量较低，但SOM的发生会促使机体受疾病刺激，从而使IgE蛋白大量生成，并与免疫细胞膜表面的受体结合作用，产生免疫应答。TNF-α作为炎症介质，在感染等因素作用下，可促使SOM患儿机体免疫活性细胞增加，释放TNF-α等细胞因子，促使机体血清TNF-α水平迅速升高；而IL-10作为免疫调节细胞因子以及抗炎因子，在SOM发生过程中，会大量释放来调节机体炎症反应以及免疫功能[11]。本研究在既往研究基础上，进一步通过ROC曲线分析其临床意义，结果显示血清IgE、IL-10、TNF-α水平三者联合诊断SOM的AUC、敏感度均显著高于单一指标诊断，因此三者联合的诊断效能更高，这也是本研究的创新之处。

本研究通过Spearman相关性分析显示，提示血清IgE、IL-10、TNF-α水平越高，患儿病程越长。既在SOM患儿疾病早期，TNF-α水平升高可促进发病部位以及全身免疫系统的免疫应答，其机制可能与激活PMN介导过度炎症反应、诱导血管内皮细胞黏附分子的过度表达、促进炎症介质产生等有关[12]。而IL-10通过下调Th1/2细胞介导的免疫炎症反应等机制对上述促炎作用产生拮抗作用。当这种调节失衡时，会促使炎症反应进入慢性过程，并通过血液等途径扩展至全身，进而加重中耳部位的炎症损伤。此外，本研究还显示研究组患儿IgE、IL-10、TNF-α水平治疗后较治疗前显著降低，可能与经过治疗后患儿炎症反应的消失有关。

综上所述，血清IgE、IL-10、TNF-α水平在SOM患儿中血液中呈高表达，其水平变化与患儿的病程、转归相关。临床检测血清血清IgE、IL-10、TNF-α水平可为儿童SOM的诊断治疗提供参考。