牛尾草根中二萜类成分及其细胞毒活性研究

廖紫柔，梁昕然，李伟昌，张宏丽，余茜

（1.广东药科大学临床药学院，广东广州 510006；2.云南省红河州哈尼族彝族自治州卫生健康委员会，云南蒙自 661100）

牛尾草Isodon ternofolius（D.Don）Kudo 为唇形科（Labiatae）香茶菜属（Isodon）多年生粗壮草本或半灌木、灌木，又名三叶香茶菜、四楞草、龙胆草、三叉金、三姊妹、伤寒头、虫牙药等。主要分布于我国的云南南部、西南部及东南部，贵州南部，广西及广东等地区。生长于空旷坡上或疏林下[1]。全草入药，是广西壮族民间常用的中草药[2]。牛尾草具有清热解毒、利湿消肿的功效，主要用于治疗痢疾肠炎、黄疸性肝炎、咽喉炎、扁桃腺炎、毒蛇咬伤、牙疼等。牛尾草是复方三叶香茶菜片的主要成分，用于肝胆湿热所引起的胁痛、呕吐、恶心等症的辅助治疗。现代研究表明牛尾草中含有萜类[3-7]、黄酮类[7]、木脂素类[8]、苯乙醇苷[8]、不饱和内酯等化学成分[9]。现代药理学研究表明牛尾草具有抗肿瘤[7]、保肝[10-11]、抗炎[8]等活性。

本课题组前期抗肿瘤活性筛选研究结果表明牛尾草根的乙酸乙酯部位具有较强的细胞毒活性。本研究在细胞毒活性的指导下，对牛尾草根的乙酸乙酯部位进行了系统的化学成分研究。分离得到9 个二萜类化合物，应用质谱和核磁等波谱方法进行结构鉴定，分别鉴定为(+)-脱氢松香烷[(+)-dehydroabietane，1]、(+)-7-羰基-松香烷-8,11,13-三烯[(+)-7-dehydroabietanone，2]、(4αS,10αS)-1,2,3,4,4α,10α-hexahydro-1,1,4α-trimethyl-7-(1-methylethyl)-phenanthrene (3)、ent-16β-H-3-oxokauran-17-ol (4)、ent-3S,16S,17-trihydroxy-kauran-2-one (5)、ent-16S,17-dihydroxykauran-3-one(6)、对映-3β,(13S)-二羟基阿替生烷-16烯-14酮(ent-3β,(13S)-dihydroxyatis-16-en-14-one，7)、ent-16S,17-dihydroxyatisan-3-one(8)、ent-atisane-3β,16α,17-triol (9)。化合物1～3 为松香烷型二萜类化合物，化合物4～6 为贝壳杉烷型二萜类化合物，化合物7～9 为阿替生烷型二萜类化合物。化合物1～9 为首次从该植物中分离得到（图1）。此外，还采用MTT 法对分离鉴定的9 个二萜类化合物的体外细胞毒活性进行了测试，结果表明化合物1～4 对3 株肿瘤细胞（MCF-7，A549 和HCT116）的增殖具有一定的抑制活性，IC50值的范围在28～83 μmol/L。该研究进一步丰富了牛尾草中二萜类化合物的结构类型，为合理地开发利用牛尾草资源提供实验依据。

图1 化合物1～9的结构Figure 1 Structures of compound 1-9

1 仪器与材料

1H-NMR、13C-NMR 采用Bruker Advance III‑400和Bruker Advance III‑500 型核磁共振仪（德国Bruker 公司），溶剂为CDCl3和CD3OD（美国Cam‐bridge Isotope Laboratories，Inc.）；岛 津LC-20AT 型高效液相色谱仪（日本岛津公司）；ESI 数据由仪器MDS SCIEX API 3200 LC/MS/MS 采集；EYELA N-1200A 型旋转蒸发器（日本东京理化）；CKX41 型倒置显微镜（日本Olympus 公司）；PowerWave XS2 型全波长酶标仪（美国Biotek 公司）；MCO-15AC 型CO2培养箱（日本Sanyo 公司）；薄层色谱硅胶GF254和柱层析硅胶（100～200 目和300～400 目，青岛海洋化工有限公司）；MCI 吸附树脂（CHP20P，75～150 μm，日本三菱化工）；RP-C18（150～200 目，德国Merck 公司）；羟丙基葡聚糖凝胶Sephadex LH-20（瑞典Amersham Biosciences 公司）；噻唑蓝（MTT，德国BIOFROX 公司）；胎牛血清（FBS）、胰蛋白酶、DEME 培养基和RPMI-1640 培养基（美国Thermo Fisher Scientific 公司）；顺铂（cisplatin，大连美仑生物）；人乳腺癌细胞（MCF-7）、人非小细胞肺癌细胞（A549）和人结肠癌细胞（HCT116）均购买自中国科学院上海细胞库。95%乙醇，甲醇，乙酸乙酯和二氯甲烷（AR，天津市致远化学试剂有限公司）。

牛尾草干燥根在2018 年6 月采集于广西壮族自治区玉林市，由中山大学唐贵华副教授鉴定为唇形科植物牛尾草Isodon ternofolius（D.Don）Kudo 的干燥根。植物标本（2018121101）存放于广东药科大学药学院。

2 提取与分离

牛尾干燥根25 kg，粉碎，过60目的筛，加入20 L的95%乙醇热回流提取，提取3次，每次2 h，合并提取液，减压浓缩得到900 g。浓缩液用2 L 水混悬，用乙酸乙酯（EtOAc，3×5 L）进行萃取。减压浓缩得到乙酸乙酯部位600 g。将乙酸乙酯部位（600 g）经MCI吸附树脂柱色谱分离（1 800 g，10×100 cm），用MeOH/H2O（3∶7～10∶0）梯度洗脱，薄层色谱检测合并为9 个组分（Fr.A～I）。Fr.F（80 g）经Sephadex LH-20 柱分离（80 g，3×100 cm），用MeOH 洗脱，薄层色谱检测合并得到3 个组分（Fr.F1～Fr.F3）。其中Fr.F1（20 g）依次经硅胶柱色谱纯化（160 g，5×60 cm），用CH2Cl2/MeOH 150∶1 洗脱，RP-C18柱色谱纯化（50 g，3×40 cm），用MeOH/H2O（7∶3～10∶1）梯度洗脱，再经硅胶柱色谱进一步纯化（10 g，1×20 cm），用CH2Cl2/MeOH（100∶1）洗脱，得到化合物1（7 mg）和化合物3（12 mg）。Fr.G（134 g）经胶柱色谱分离（400 g，6×100 cm），用CH2Cl2/MeOH（200∶1～50∶1）梯度洗脱，得到2 个组分（Fr.G1 和Fr.G2）。Fr.G1（24 g）经Sephadex LH-20 纯化（80 g，3×100 cm），用MeOH 洗脱，得到2 个组分（Fr.G1a和Fr.G1b）。Fr.G1a（0.1 g）经过硅胶柱色谱进一步纯化（10 g，1×20 cm），用CH2Cl2/MeOH（200∶1）洗脱，得到化合物5（10 mg）。Fr.G1b（40 mg）经过硅胶柱色谱进一步纯化（8 g，1 × 20 cm），用CH2Cl2/MeOH（100∶1）洗脱，得到化合物2（6 mg）。Fr.G2（34 g）经RP-C18柱色谱纯化(170 g，5 × 60 cm)，用MeOH/H2O（6∶4～10∶1）梯度洗脱，得到2 个组分（Fr.G2a 和Fr.G2b）。Fr.G2a（12 g）经硅胶柱色谱纯化（150 g，5×60 cm），用CH2Cl2/MeOH（100∶1）洗脱和Sephadex LH-20 进一步纯化（80 g，3×60 cm），用MeOH 洗脱，得到化合物4（23 mg）和化合物6（13 mg）。Fr.I（185 g）经硅胶柱色谱纯化（400 g，6×100 cm），用CH2Cl2/MeOH 梯度洗脱，得到4 个组分（Fr.I1～Fr.I4）。Fr.I3（13 g）经Sephadex LH-20 分离（150 g，5×60 cm），用MeOH 洗脱，再经硅胶柱色谱进一步纯化（10 g，1×20 cm），用CH2Cl2/MeOH（100∶1）洗脱，得到化合物9（8 mg）。Fr.I4（36 g）经RP-C18柱色谱纯化（160 g，5×60 cm），用MeOH/H2O（6∶4～1∶0）洗脱，分离得到4个组分（Fr.I4a～Fr.I4d）。Fr.I4b（7 g）经硅胶柱色谱纯化（150 g，5×60 cm），用CH2Cl2/MeOH（100∶1）洗脱，再经Sephadex LH-20柱进一步纯化（80 g，3×100 cm），用MeOH 洗脱，得到化合物7（6 mg）。Fr.I4c（0.6 g）经Sephadex LH-20 柱纯化（80 g，3×100 cm），用MeOH 洗脱，再经硅胶柱色谱进一步纯化（10 g，1×20 cm），用CH2Cl2/MeOH（80:1）洗脱，得到化合物8（7 mg）。化合物1～9的纯度验证均通过在三种不同极性展开系统中展开为单一斑点的方法进行验证。化合物1～9 的结构鉴定应用质谱和核磁等波谱方法进行鉴定。

3 结构鉴定

化合物1:无色液体，溶于三氯甲烷，ESI-MSm/z:269[M-H]-，分子式为C20H30。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δH7.18 (1H，d，J=8.0 Hz，H-11)，6.99 (1H，dd，J=8.0，1.5 Hz，H-12)，6.89 (1H，s，H-14)，2.90(2H，m，H2-7)，2.84 (1H，sept，J=7.0 Hz，H-15)，2.28(1H，d，J=12.3 Hz，H-1a)，1.88 (1H，m，H-6a)，1.62～1.81 (3H，m，H2-2，H-6b)，1.54 (1H，m，H-3a)，1.48(1H，d，J=12.8 Hz，H-3b)，1.42 (1H，dd，J=12.5，3.5 Hz，H-1b)，1.34 (1H，dd，J=12.5，2.1 Hz，H-5)，1.24(3H，s，H3-16)，1.22 (3H，s，H3-17)，1.19 (3H，s，H3-20)，0.95 (3H，s，H3-18)，0.93 (3H，s，H3-19)。13CNMR (100 MHz，CDCl3)δC147.6 (C-13)，145.4 (C-9)，135.0 (C-8)，126.8 (C-14)，124.2 (C-12)，123.8 (C-11)，50.4 (C-5)，41.8 (C-3)，38.9 (C-1)，37.5 (C-10)，33.5 (C-15)，33.3 (C-4)，30.5 (C-7)，24.9 (C-20)，24.0(C-16，17)，21.6 (C-18，19)，19.4 (C-6)，19.1 (C-2)。以上数据与文献报道基本一致[12]，故鉴定化合物1为(+)-脱氢松香烷[(+)-dehydroabietane]。

化合物2:白色粉末，溶于三氯甲烷，ESI-MSm/z: 283 [M-H]-，分子式为C20H28O。1H-NMR (400 MHz，CDCl3)δH7.90 (1H，s，H-14)，7.41 (1H，d，J=8.1 Hz，H-12)，7.32 (1H，d，J=8.1 Hz，H-11)，2.94(1H，sept，J=7.0 Hz，H-15)，2.75 (1H，dd，J=18.2，4.5，H-6a)，2.68 (1H，dd，J=18.2，13.5 Hz，H-6b)，2.35(1H，d，J=12.0 Hz，H-1a)，1.90(1H，dd，J=13.0，4.0 Hz，H-5)，1.80(1H，m，H-2a)，1.72(1H，m，H-2b)，1.56 (2H，m，H-1b，H-3a)，1.28 (3H，s，H3-20)，1.25(6H，s，H3-16，H3-17)，1.21 (1H，m，H-3b)，1.02 (3H，s，H3-18)，0.95 (3H，s，H3-19)。13C-NMR (100 MHz，CDCl3)δC199.9 (C-7)，153.9 (C-9)，146.7 (C-13)，132.7 (C-14)，130.9 (C-8)，125.1 (C-11)，123.8 (C-12)，49.6 (C-5)，41.6 (C-3)，38.2 (C-1)，38.1 (C-10)，36.5 (C-6)，33.8 (C-15)，33.4 (C-4)，32.8 (C-18)，24.0(C-20，C-17)，23.6 (C-16)，21.5 (C-19)，19.1 (C-2)。以上数据与文献报道基本一致[12]，故鉴定化合物2为(+)-7-羰基-松香烷-8,11,13-三烯[(+)-7-dehydroabietanone]。

化合物3:白色粉末，溶于三氯甲烷，ESI-MSm/z: 267 [M-H]-，分子式为C20H28。1H-NMR (400 MHz，CDCl3)δH7.09 (1H，d，J=8.0 Hz，H-11)，7.04(1H，dd，J=7.9，1.5 Hz，H-12)，6.91 (1H，d，J=1.5 Hz，H-14)，6.53 (1H，dd，J=9.5，2.2 Hz，H-7)，6.00(1H，dd，J=9.5，2.2 Hz，H-6)，2.85 (1H，sept，J=7.0 Hz，H-15)，2.16(1H，d，J=13.0 Hz，H-5)，2.12(1H，t，J=2.6 Hz，H-1a)，1.77 (1H，brd，J=13.0 Hz，H-2a)，1.69 (1H，d，J=3.0 Hz，H-2b)，1.65 (1H，m，H-1b)，1.62(1H，m，H-3a)，1.52(1H，brd，J=13.5 Hz，H-3b)，1.23 (6H，d，J=7.0，1.2 Hz，H3-16，H3-17)，1.05 (3H，s，H3-18)，1.04 (3H，s，H3-20)，0.96 (3H，s，H3-19)。13C-NMR (100 MHz，CDCl3)δC146.2 (C-13)，145.9(C-9)，132.9 (C-8)，130.4 (C-6)，127.9 (C-7)，125.7(C-12)，124.6 (C-14)，121.9 (C-11)，51.3 (C-5)，41.2(C-3)，37.7 (C-10)，36.1 (C-1)，33.7 (C-15)，33.0 (C-4)，32.7(C-18)，24.1(C-16，17)，22.6(C-19)，20.5(C-20)，19.1 (C-2)。以上数据与文献报道基本一致[13]，故鉴定化合物3 为(4αS,10αS)-1,2,3,4,4α,10α-hexahydro-1,1,4α-trimethyl-7-(1-methylethyl)-phenanthrene。

化合物4:黄色粉末，溶于三氯甲烷，ESI-MSm/z: 303 [M-H]-，分子式为C20H32O2。1H-NMR (400 MHz，CDCl3)δH3.68～3.76(2H，m，H2-17)，2.47(2H，dd，J=8.5，6.5 Hz，H2-2)，2.14～2.25(2H，m，H-11a，H-13)，1.96～2.02 (2H，m，H-1a,H-14a)，1.55～1.59 (3H,m,H-11b，H-12a，H-15a)，1.45～1.52 (4H，m，H-1b，H-5，H-12b，H-15b)，1.36～1.44 (4H，m，H2-6，H2-7)，1.26（1H，d，J=7.0 Hz，H-9），1.10（1H，m，H-14b），1.08(3H，s，H3-18)，1.06(3H，s，H3-20)，1.03(3H，s，H3-19)。13C-NMR (100 MHz，CDCl3)δC218.3 (C-3)，64.2 (C-17)，56.2(C-9)，54.6(C-5)，47.3(C-4)，44.2(C-8)，43.5(C-15)，43.3 (C-16)，41.2 (C-10)，40.2 (C-7)，39.5 (C-1)，38.7 (C-14)，37.1 (C-13)，34.2 (C-2)，27.4 (C-18)，26.0 (C-12)，21.9 (C-6)，21.1 (C-19)，19.6 (C-11)，17.9(C-20)。以上数据与文献报道基本一致[14]，故鉴定化合物4为ent-16β-H-3-oxokauran-17-ol。

化合物5:黄色粉末，溶于三氯甲烷，ESI-MSm/z:335 [M-H]-，分子式为C20H32O4。1H-NMR (400 MHz，CDCl3)δH3.85 (1H，d，J=4.0 Hz，3-OH)，3.50(1H，d，J=4.0 Hz，H-3)，3.46 (1H，d，J=11.5 Hz，H-17a)，3.37(1H，d，J=11.5 Hz，H-17b)，2.69(1H，d，J=12.5 Hz，H-1a)，2.08 (1H，m，H-11a)，2.03 (1H，brd，J=12.0 Hz，H-13)，1.88(1H，brd，J=12.0 Hz，H-12a)，1.79 (1H，brd，J=10.5 Hz，H-14a)，1.65 (1H，brd，J=12.4 Hz，H-1b)，1.55 (1H，d，J=3.5 Hz，H-15a)，1.50(1H，m，H-6a)，1.47 (1H，d，J=3.5 Hz，H-12b)，1.38～1.45 (4H，m，H2-7，H-11b，H-6b)，1.34 (1H，dd，J=13.5,3.5 Hz,H-15b)，1.15 (3H，s，H3-18)，1.03 (1H，m，H-5)，1.00 (1H，m，H-14b)，0.96 (3H，s，H3-20)，0.92(1H，d，J=7.5 Hz，H-9)，0.67(3H，s，H3-19)。13CNMR (100 MHz，CDCl3)δC211.3 (C-2)，83.0 (C-3)，79.6 (C-16)，69.7 (C-17)，56.3 (C-9)，54.4 (C-5)，53.5(C-1)，52.1 (C-15)，45.6 (C-4)，45.4 (C-10)，43.6(C-8)，41.2 (C-7)，40.7 (C-13)，37.7 (C-14)，29.7(C-18)，26.5 (C-12)，20.1 (C-6)，19.0 (C-11)，18.7(C-20)，16.4 (C-19)。以上数据与文献报道基本一致[15]，故鉴定化合物5 为ent-3S,16S,17-trihydroxykauran-2-one。

化合物6:黄色粉末，溶于三氯甲烷，ESI-MSm/z:319 [M-H]-，分子式为C20H32O3。1H-NMR (400 MHz，CDCl3)δH3.45 (1H，d，J=10.9 Hz，H-17a)，3.36(1H，d，J=10.9 Hz，H-17b)，2.45(2H，dd，J=6.5，2.0 Hz，H2-2)，2.08 (1H，m，H-11a)，1.98～2.04 (2H，m，H-13，H-12a)，1.92 (1H，dd，J=12.5，2.0 Hz，H-1a)，1.77 (1H，m，H-14a)，1.54～1.59 (2H，m，H2-15)，1.35～1.52(9H，m，H-1b，H-11b，H-12b，H2-6，H2-7，H-9，H-14b)，1.18(1H，brd，J=8.7 Hz，H-5)，1.06(3H，s，H3-18)，1.05(3H，s，H3-19)，1.00(3H，s，H3-20)。13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δC218.6 (C-3)，79.6 (C-16)，69.8(C-17)，55.6(C-5)，54.1(C-9)，52.1(C-15)，47.3(C-4)，43.4 (C-8)，40.9 (C-14)，40.7 (C-13)，39.3 (C-7)，38.6(C-10)，37.9 (C-1)，34.1 (C-2)，27.4 (C-18)，26.7(C-12)，21.3 (C-6)，21.0 (C-19)，19.3 (C-11)，17.7(C-20)。以上数据与文献报道基本一致[15]，故鉴定化合物6为ent-16S,17-dihydroxykauran-3-one。

化合物7: 白色粉末，溶于甲醇，ESI-MSm/z:317 [M-H]-，分子式为C20H30O3。1H-NMR (400 MHz，CD3OD)δH4.95 (1H，d，J=1.4 Hz，H-17a)，4.81 (1H，d，J=1.4 Hz，H-17b)，3.83 (1H，d，J=3.0 Hz，H-13)，3.18 (1H，d，J=8.0 Hz，H-3)，2.69 (1H，q，J=3.0 Hz，H-12)，2.23～2.34 (3H，m，H-7a，H2-15)，1.91 (1H，m，H-1a)，1.78 (1H，m，H-11a)，1.52～1.68(5H，m，H2-2，H-9，H2-6),1.36～1.47 (1H，m，H-11b)，1.06 (1H，s，H-5)，0.99 (3H，s，H3-18)，0.97～0.96(2H，m，H-1b，H-7b)，0.77(3H，s，H3-19)，0.71(3H，s，H3-20)。13C-NMR (100 MHz，CD3OD)δC219.1 0(C-14)，145.0 (C-16)，110.6 (C-17)，79.5 (C-3)，76.0(C-13)，55.8 (C-5)，53.2 (C-9)，49.2 (C-8)，47.3(C-12)，44.4 (C-15)，39.7 (C-4)，38.9 (C-10)，37.7(C-1)，32.2(C-7)，28.8(C-18)，27.3(C-2)，26.5(C-11)，19.8 (C-6)，16.2 (C-19)，14.3 (C-20)。以上数据与文献报道基本一致[16]，故鉴定化合物7 为对映-3β,(13S)-二羟基阿替生烷-16 烯-14 酮[ent-3β,(13S)-di‐hydroxyatis-16-en-14-one]。

化合物8: 白色粉末，溶于氯仿，ESI-MSm/z:319[M-H]-，分子式为C20H32O3。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δH3.51 (1H，d，J=11.1 Hz，H-17a)，3.38 (1H，d，J=11.1 Hz，H-17b)，2.51～2.60 (1H，m，H-2a)，2.26～2.34(1H，m，H-2b)，1.95～2.01(1H，m，H-11a)，1.78～1.86 (3H，m，H-1a，H-12，H-14a)，1.55～1.62(1H，m，H-13a)，1.34～1.57 (5H，m，H-1b，H2-6，H2-7)，1.12～1.33 (6H，m，H-5，H-9，H-11b，H-13b，H2-15)，1.07 (3H，s，H3-18)，1.04 (3H，s，H3-19)，1.01 (3H，s，H3-20)，0.73～0.81 (1H，m，H-14b)。13C-NMR (100 MHz，CDCl3)δC218.0 (C-3)，74.2 (C-16)，68.9 (C-17)，55.6 (C-5)，52.3 (C-15)，50.9 (C-9)，47.7 (C-4)，38.8 (C-7)，38.0 (C-1)，37.2 (C-10)，34.1 (C-2)，32.9(C-8)，32.0 (C-12)，27.2 (C-14)，26.2 (C-18)，23.3(C-13)，23.0 (C-11)，21.7 (C-19)，19.7 (C-6)，13.5(C-20)。以上数据与文献报道基本一致[15]，故鉴定化合物8为ent-16S,17-dihydroxyatisan-3-one。

化合物9:白色粉末，溶于甲醇、三氯甲烷，ESIMSm/z: 321 [M-H]-，分子式为C20H34O3。1H-NMR(500 MHz，CD3OD)δH3.50 (1H，d，J=11.2 Hz，H-17a)，3.36 (1H，d，J=11.2 Hz，H-17b)，3.17 (1H，dd，J=12.0，4.0 Hz，H-3)，1.95～2.00 (1H，m，H-2a)，1.82～1.87 (1H，m，H-2b)，1.79 (1H，t，J=2.8 Hz，H-11a)，1.55～1.67 (4H，m，H-9，H-12，H-13a，H-14a)，1.44～1.51 (2H，m，H-5，H-13b)，1.37～1.42 (2H，m，H2-6)，1.20～1.35 (2H，m，H2-7)，1.14～1.19 (2H，m，H2-1)，1.05 (2H，m，H2-15)，1.00 (1H，m，H-11b)，0.98(3H，s，H3-18)，0.97 (3H，s，H3-19)，0.80 (1H，m，H-14b),0.79 (3H，s，H3-20)。13C-NMR (125 MHz，CD3OD)δC79.3 (C-3)，74.7 (C-16)，69.2 (C-17)，56.1(C-5)，52.7(C-15)，52.5(C-9)，40.1(C-7)，39.3(C-4)，38.3 (C-1)，38.0 (C-8)，33.3 (C-10)，32.5 (C-12)，28.4(C-18)，27.9 (C-2)，27.0 (C-14)，23.8 (C-13)，23.6(C-11)，19.1 (C-6)，15.9 (C-19)，14.4 (C-20)。以上数据与文献报道基本一致[17]，故鉴定化合物9 为ent-atisane-3β,16α,17-triol。

4 MTT法检测细胞毒活性

根据文献的方法[18]，采用MTT 法检测化合物1～9的体外细胞毒活性。选用人乳腺癌细胞（MCF-7）、人结肠癌细胞（HCT116）和人非小细胞肺癌细胞（A549）。以顺铂为阳性对照，每个样品平行测试3次，结果表明化合物1～4对这3株肿瘤细胞的增殖具有一定的抑制活性，其余化合物对这3 株肿瘤细胞增殖无显著影响（表1）。

表1 牛尾草根中二萜类化合物的细胞毒活性Table 1 The cytotoxic activities of diterpenes from the roots of I.ternofolius

5 讨论

本实验对牛尾草根乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位进行了系统的分离纯化，得到9 个二萜类化合物。化合物1～3 为松香烷型二萜，化合物4～6 为贝壳杉烷型二萜，化合物7～9 为阿替生烷型二萜。化合物1～9 首次从该植物中分离得到。体外细胞毒活性实验表明，化合物1～4 对三株肿瘤细胞（MCF-7，A549 和HCT116）的增殖具有一定的抑制活性。

松香烷型二萜具有三环二萜结构，主要存在于唇形科（Labiatae）、松科（Pinaceae）、菊科（Composi‐tae）、大戟科（Euphorbiaceae）和豆科（Fabaceae）等植物，具有抗肿瘤、抗炎、抗病毒等活性。松香酸是从松香中发现首个松香烷二萜类化合物[19]。贝壳杉烷型二萜类化合物从天然产物中已分离鉴定超过1 500 种，多数来自唇形科（Labiatae）香茶菜属（Isodon）、菊科（Compositae）、凤尾蕨科（Pterida‐ceae）和大戟科（Ephorbiaceae）等植物。这类四环二萜分子可以通过分子内氧化反应，切断反应以及重排反应，展现出复杂多样性。大量药理活性研究表明这类化合物具有较强的抗菌和抗肿瘤活性[20]。阿替生烷型二萜类化合物主要存在于大戟科（Ephorbiaceae）植物，具有抗肿瘤、抗HIV、抗炎等生物活性[16,21]。本研究丰富了牛尾草中二萜类化合物的结构类型，为后续二萜类化合物在抗肿瘤活性方面的研究提供了相关的科学依据，同时也为二萜类化合物的提取、分离提供了方法借鉴。