2022年四川省市级兽医系统实验室布病检测能力比对分析

2023-02-20黄雅琳李盛琼杨天俊阳爱国

四川畜牧兽医 2023年2期

黄雅琳，侯巍，尹杰，高露，李盛琼，杨天俊，阳爱国

（四川省动物疫病预防控制中心，四川成都 610041）

目前，兽医实验室主要承担动物疫病病原学监测，动物免疫效果检测及疫病诊断等工作［1］。为进一步评价和提高四川省各市（州）兽医实验室管理水平和检测能力，需要不定期对实验室进行检测能力比对。2022 年6 月，四川省组织开展了全省市级兽医系统实验室检测能力比对工作，以期为全省兽医系统实验室的进一步建设和发展提供参考。

1 材料与方法

1.1 比对项目设计在全省20个市级兽医实验室进行布鲁氏菌病抗体的检测比对。

1.2 比对盲样与试剂每个比对实验室设置4个盲样，盲样由四川省动物疫病预防控制中心统一测试和发放，试剂由各市级动物疫病预防控制中心自行提供，其中使用A 厂家11 个，B 厂家9个。

1.3 方法采用相应的国家现行标准（GB/T 18646-2018）进行比对（表1）。

表1 比对项目及方法

1.4 比对结果判定标准当标准阴性血清不出现凝集、标准阳性血清出现凝集时试验成立，方可对受检血清进行判定。出现肉眼可见凝集现象者判定为阳性（＋），无凝集现象且反应混合液呈均匀粉红色者判定为阴性（-）。

2 比对结果

2.1 市级兽医实验室比对结果详见表2。

2.2 试剂使用情况比对结果详见表3。

表2 市级兽医实验室比对结果

表3 不同厂家抗原比对结果

3 讨论

通过此次比对结果分析，我们发现造成比对结果不理想的原因可能有以下几点：（1）实验试剂对结果影响很大，分别使用A、B两个厂家试剂检测盲样得出的符合率有很大差别，说明选择敏感性高的试剂很重要，部分实验会因试剂敏感性的不同而产生不同的结果；（2）实验过程中的细节把控很重要，实验过程容易受到许多外界因素影响，包括试剂、检测样本的平衡时间和温度，平板的材质（是否使用玻璃板），凝集反应观察的时间；（3）实验人员的观察能力也很重要，对经验有一定要求，可能对同样的结果出现不同的判读标准，应在日光下观察，否则容易将弱阳性误判为阴性。

根据《国家布鲁氏菌病防治计划（2016-2020年）》的相关要求，实验室检测是畜间布病防治的重要技术措施，县级动物疫病预防控制机构应具备开展布病血清学检测的能力。各市（州）应不断提高兽医实验室检测能力，以更加高效科学地完成辖区内动物疫病的防治和检测任务，为本地动物防疫工作提供保证。

目前，血清学检测方法是现有的诊断布鲁氏菌病最广泛的方法，其中间接酶联免疫吸附试验（iELISA）、胶体金检测试纸条、虎红平板凝集试验（RBT）均为动物布鲁氏菌病的初筛方法。在国标方法中，iELISA敏感性较高［2］，灵敏性和特异性好，通过酶标仪直接读数可避免主观判断带来的误差，但需在实验室由专业技术人员操作，检测时间长，不适用于基层大量初筛。胶体金检测试纸条具有灵敏度高、特异性好、血清用量少、操作简便、快速等优点，但存在定量问题、质控指标不一等不足之处。RBT是国标规定的初筛方法，具有操作简便、检测快速、价格便宜、敏感性高的特点，适用于动物布病检测的初步筛查，是重要的检测方法，也是检测布鲁氏菌抗体最常用的方法之一。RBT 是各兽医实验室日常监测布鲁氏菌病，基层大量初筛的最常见检测方法，因而作为此次实验室比对的首选实验方法。

目前布病的血清学检测方法中还没有一种完全具备敏感性高、特异性强、操作简便、检测速度快和检测成本低等优点的检测方法，在布病检测的实际临床应用中，一般是两种或两种以上的方法联合应用，通过对不同检测方法的结果进行比较分析来验证结果的准确性。有研究发现，采用RBT 初筛，再用补体结合试验（CFT）与ELISA 进行联合诊断，用于阳性畜的扑杀最为理想［3］。