一例集约化猪场伪狂犬的诊断及防控

关金连 ，赵志伟 ，韦锦福 ，贺东生

（1.华南农业大学兽医学院 广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室，广东 广州 510640；2.广西贺州市八步区动物疫病预防控制中心，广西 贺州 542800）

笔者团队开展了一个猪场暴发伪狂犬病（Pseudorabies，PR）后的确诊和防控实践。通过发病情况调查、观察临床症状和剖解组织病变，初步判断某集约化猪场暴发了伪狂犬病。采集2头典型病猪的病料经PCR鉴定为伪狂犬病毒（PRV）阳性，采集10头病猪的血清经PRV gE-ELISA检测为阳性（9/10），确诊该猪场流行和暴发的为猪伪狂犬病。确诊后对该场猪群采取了隔离、消毒和紧急接种等综合防控措施，快速制止了该猪场PR的流行，取得显著的防控效果。

1 发病情况调查

某集约化养猪场于2021年7月出现定位栏怀孕母猪流产、产房母猪出现早产、产死胎及产木乃伊胎的数量增加，死胎率达30%，并且母猪产后出现高烧不食，产后乳房炎、子宫炎增多现象；产房内10日龄仔猪出现高烧扎堆、口吐白沫大量流涎、间歇式发抖抽搐、运动不协调、颈部肌肉僵硬、四肢划水游泳样等神经症状，最后昏迷死亡，部分仔猪还出现腹泻，发病率高达100%，死亡率达 95%，腹泻仔猪按大肠杆菌使用常用抗生素治疗无效。

回顾该猪场最近引种情况，发现猪场同年4月份从某种猪场引进了70头后备母猪和2头后备公猪，在猪场发病时，这批后备猪已投入使用。经统计，后备母猪配种后返情率高占35%，此批后备猪流产率也占流产猪总数的50%。通过临床症状和引种史分析，怀疑是新引进的这批种猪带有PRV野毒，因为引种前后和混群前都没有进行PRV野毒抗体和病原检测，可能携带PRV野毒。

2 临床症状

产房15日龄内仔猪症状表现最为明显，表现在体温升高到41℃左右、食欲废绝；出现耳部皮下、腹下潮红；出现中枢神经系统症状，开始为运动不协调、身体震颤、唾液分泌增多、颈部肌肉僵硬、四肢划水样运动、眼球震颤，发展至角弓反张，最后昏迷死亡，病程不超过72 h，病死率高达100%。部分48 h内新生仔猪发病，会出现呕吐、甚至腹泻，并在24～36 h内死亡。15日龄以上仔猪表现略为轻点，症状没那么明显，病死率约70%。

保育舍仔猪体温升高；出现喷嚏、流涕及剧烈咳嗽等呼吸系统症状，仔猪表现为腹式呼吸，呼吸困难，部分7 d后自行恢复，部分发生死亡；部分猪还出现肌肉震颤、剧烈抽搐、惊厥，部分猪后躯麻痹，运动失衡；保育舍发病率约为50%，死淘率约为30%。

怀孕舍的妊娠母猪返情率达到了30%，比往年同期返情率显著升高。妊娠35日以上的母猪发生部分流产。产房母猪出现产死胎和木乃伊胎，产弱仔和死胎等现象增多。

3 病理变化

剖检病死仔猪的大体病变有：扁桃体出现充血、出血点、部分扁桃体及咽喉头出现明显坏死；出现神经症状的仔猪的脑膜表面出血或充血，脑脊液增多；肝脏和脾脏表面出现灰白色坏死病灶；肾脏布满针尖样大小出血点；肺表现充血、出血、水肿；卡他性胃炎和肠炎；淋巴结出血等病变。流产母猪的胎衣可见白色坏死灶。

4 病料采集与处理

无菌采集3头发病典型的病死仔猪的脑、扁桃体、肝、肾、脾等组织病料，加冰保存送检。将采集的病料剪碎、同时添加无菌PBS，用组织捣碎机捣碎研磨制成悬液；组织悬液于-80℃与4℃反复冻融3次；低速离心后小心吸取上清液。上清液置-80℃冰箱冻存备用。

全场使用一次性采血管采用前腔静脉采血法采集乳猪发病对应的母猪和发病保育猪群的血液各5份，每头猪至少采集2 mL。所采集的血液在常温下静置30 min后，血清析出来后，置于4℃运输送检。

5 PRV gE-ELISA检测

将采集的血清样品使用离心机低速离心，将析出血清转移至洁净EP管并保存于4℃冰箱。采用IDEXX的PRV gE ELISA试剂盒按说明书进行伪狂犬野毒抗体检测。

6 PRV的PCR鉴定结果

琼脂糖凝胶电泳结果出现了与PRV阳性结果预期大小（805 bp）相同的DNA条带（图1）。

图1 PRV gE的PCR扩增结果

7 PRV gE-ELISA检测

10份样品的PRV gE-ELISA检测结果为：母猪伪狂犬野毒抗体阳性率为5/5，保育猪的为4/5。提示猪群为伪狂犬感染。

综合上述的猪场发病情况、引种史、临床发病症状，剖检病猪组织病变、病料PRV的PCR鉴定和gE ELISA检测，确诊该猪场猪群为伪狂犬的急性爆发。

8 防控措施

（1）病死猪处理。按临床表现区分发病猪和健康猪群，将发病猪集中隔离饲养。对病死猪、流产胎儿、死胎、胎衣无害化处理。用碘酸、醛类、酚类等消毒剂对全场进行严格消毒，尤其是发病猪舍及周围环境，保证每24 h消毒1次，连续消毒7 d。

（2）野毒抗体检测和紧急免疫。对全场所有母猪抽血进行实验室PRV gE-ELISA检测，将所有gE抗体阳性猪群集中隔离至一栋猪舍中单独饲养，不可继续混养，由专人专用工具饲养。全场母猪紧急肌肉注射接种优质的PRV基因缺失活疫苗，按照正常量的2倍剂量进行肌肉免疫，3周后再加强免疫1次。母猪免疫注射执行1头猪使用1个针头。淘汰2头PRV gE-ELISA检测结果为阳性的公猪，其它几头公猪紧急接种PRV活疫苗，按照正常量的2倍剂量进免疫。3周后再加强免疫1次。对刚出生10日以内的仔猪滴鼻免疫1头份，对10日龄以内发病猪直接淘汰无害化处理。对10日以上的发病仔猪进行紧急肌肉免疫1头份，3周后再加强免疫1次。对保育舍仔猪紧急免疫2头份，3周后再加强免疫1次。

（3）治疗和保健。所有猪群饲料添加替米考星、卡巴匹林钙及电解多维，连用7 d。发病的乳猪和保育猪都统一肌注长效头孢、控制细菌的继发感染。

（4）加强猪群的科学饲养管理。做好各项环控指标的控制，创造优良饲养环境，执行全进全出的饲养方法，减少不同猪群疾病的交叉感染，提高营养水平，提高猪群的自身免疫力。采取严格的生物安全措施，重点加强灭蚊蝇及灭鼠的相关工作；各栋猪舍工作人员相对固定，尽量避免流动，若非生产工作需要，减少串舍，禁止发病猪舍与健康猪舍之间的人流与物流；严格执行生产线卫生防疫制度与消毒规范；严禁猫、狗在猪场内随意活动，加强灭鼠、灭蚊、灭蝇工作。若发生母猪流产或产死胎，必须要用不渗漏的胶桶收集，收集完后密封，并尽快做无害化处理，对于污染过地面要进行彻底消毒；及时淘汰各阶段低价值的病残猪，减少传染源，降低环境的病毒裁量。

9 防控结果

通过采取上述防控措施，7日后猪群新发病率开始减少，新发病的症状开始逐渐减轻、总的死亡率也开始逐渐下降。1个月后，发病率降低约为30%、死亡率显著下降。三周后，对猪群再次加强免疫伪狂犬活苗一次，之后一个月的生产成绩基本恢复正常水平，产房成活率从55%恢复到了90%；保育成活率从78%恢复到了95%；育肥成活率从90%恢复到了95%。

猪群稳定后，重新调整整个猪场执行的免疫程序，公猪、母猪按1头份/头每3个月免疫1次；后备种猪按1头份/头配种前6周和3周各免疫1次；产房仔猪按1头份/头1天龄之内滴鼻免疫1次；商品猪按1头份/头8周龄1免，3周后加免1次。使用该防控措施后，3至6个月期间多次回访该猪场，期间无再次爆发，则防控效果良好。