血浆Hcy、D-D、PAF与不孕症的关系及对患者预后的影响

时会会，陈秀芹，王悦

（1.河南省医药科学研究院附属医院 妇产科，河南 郑州 450006；2.郑州大学第五附属医院 妇产科，河南 郑州 450052；3.河南省人民医院 妇产科，河南 郑州 450003）

不孕症为干扰男女身心健康的一种世界问题，给患病夫妇带来巨大精神压力与社会压力，同时给家庭和谐带来不安定因素［1］。据统计，国内不孕症发病率约为3.53%～11.3%［2］。不孕症发病因素较为复杂，包括年龄、营养、精神、内分泌、机体免疫、先天发育与生殖器病变等有关［3］。血小板活化因子（platelet activating factor,PAF）是由组织细胞分泌一类调节因子，其可参加生殖过程中多个病理生理反应［4］。研究显示，PAF 于排卵、胚胎植入、受精、分娩等多个过程中起到重要作用［5］。同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）为机体心血管风险事件的预测因子之一，和机体多个炎性反应具有紧密联系［6］。血栓前状况可能引起孕妇出现胚胎反复种植失败的状况［7］。因此，本研究选取不孕症患者69 例作为研究对象，分析血浆Hcy、D-二聚体（D-dimer,D-D）、PAF 与不孕症的关系以及对预后的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020 年1 月至2021 年2 月期间河南省医药科学研究院附属医院接收的不孕症患者69 例作为研究组，选择同期健康者78 例作为对照组。研究组：年龄24～35 岁，平均（29.54±2.55）岁，体质量指数（body mass index,BMI）20.9～24.1 kg/m2，平均（22.51±0.74）kg/m2；对照组：年龄24～36岁，平均（30.11±2.69）岁，BMI 20.5～24.2 kg/m2，平均（22.37±0.81）kg/m2。两组年龄、BMI 等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：经过排卵检测、精液分析、子宫输卵管造影等相关检查确诊是不孕症女性；经伦理委员会与学术委员会审核；自愿参与本研究，并签署知情同意协议书者。

排除标准：输卵管异常等引起不孕；肾肝功能严重障碍者；中途参与其他研究者；合并认知障碍或者精神障碍者；同期参与其他研究者。

1.3 方法

检测方法：取晨起空腹外周静脉血5 mL，以3 500 r/min 转速离心取血清；经固相夹心酶联免疫吸附法检测血清PAF 水平；取血清100 μL，加入浓度是10%的三-N-J 基磷化氢，10 μL 的N-二甲基甲酰胺溶液，放在5℃冰箱中孵育0.5 h，将硫基还原和血浆蛋白予以分离，加入100 μL 高氯酸溶液，离心沉淀，取30 μL 上清液，加入NaOH（0.5 mol/L）15 mL，加30 mL SBD-F 衍生液，放置60℃水浴锅中加热1 h，待完全反应之后，放在冰上冷却，后精密量取5 μL，通过高效液相色谱法测血浆Hcy 含量。采用免疫比浊法测D-D 含量。

1.4 观察指标

①对比两组Hcy、D-D、PAF 水平。②分析Hcy、D-D、PAF 对于不孕症诊断价值。③对比不同预后Hcy、D-D、PAF 水平。其中预后良好［接受体外受精-胚胎移植（IVF-ET）后妊娠］者51例、预后欠佳（IVF-ET 之后未妊娠）者18 例。④分析Hcy、D-D、PAF 对于不孕症患者预后的预测价值。

1.5 统计学方法

采用SPSS 22.0 统计学软件处理数据，计量资料采取Bartlett 方差齐性检验与Kolmogorov-Smirnov正态性检验，均确认具备方差齐性且近似服从正态分布，以均数±标准差（）表示，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两组间比较采用LSD-t检验，两组间比较采用独立样本t检验，采用受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线，获取曲线下面积（AUC）、置信区间、敏感度、特异度及截断值，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组D-D、Hcy、PAF 比较

研究组D-D、Hcy 高于对照组，PAF 低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组D-D、Hcy、PAF 比较（）

表1 两组D-D、Hcy、PAF 比较（）

注：D-D：D-二聚体；Hcy：同型半胱氨酸；PAF：血小板活化因子。

2.2 Hcy、D-D、PAF 对于不孕症的诊断价值

以不孕症患者（69 例）作为阳性样本，以健康体检患者（78 例）作为阴性样本，依据D-D、Hcy、PAF 水平变化趋势绘制成ROC 曲线。结果为，联合检测AUC 为0.843、敏感性94.20%、特异性92.31%，D-D 的AUC 为0.775、敏感性75.36%、特异性73.08%，Hcy 的AUC 为0.777、敏感性78.26%、特异性76.92%，PAF 的AUC 为0.769、敏感性72.46%、特异性71.79%，其中联合检测的敏感性、特异性最高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 Hcy、D-D、PAF 对于不孕症的诊断价值

2.3 不同预后D-D、Hcy、PAF 比较

预后良好者D-D、Hcy 低于预后欠佳者，PAF高于预后欠佳者，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 不同预后D-D、Hcy、PAF 比较（）

表3 不同预后D-D、Hcy、PAF 比较（）

2.4 Hcy、D-D、PAF 对于不孕症患者预后的预测价值

以预后欠佳患者（18 例）作为阳性样本，以预后良好患者（51 例）作为阴性样本，依据D-D、Hcy、PAF 水平变化趋势绘制成ROC 曲线，结果为，联合检测AUC 为0.818、敏感性94.44%、特异性92.16%，D-D 的AUC 为0.686、敏感性72.22%、特异性72.55%，Hcy 的AUC 为0.767、敏感性77.78%、特异性76.47%，PAF 的AUC 为0.756、敏感性72.22%、特异性70.59%，其中联合检测敏感性、特异性最高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表4。

表4 Hcy、D-D、PAF 对于不孕症患者预后的预测价值

3 讨论

PAF 属于血管活性介质之一，于女性月经周期和妊娠期间发挥重要作用［8］。PAF 能影响卵泡细胞功能和黄体生成，加快胚胎发育，引发子宫内膜与蜕膜反应［9］。在种植窗期间，子宫内膜血管扩张，通透性增加，PAF 能引发血管内皮细胞收缩，同时刺激一氧化氮分泌，扩大细胞间隙，致使着床位置血管扩张，增加子宫内膜容受性［10］。PAF 凝血上升能促进子宫内膜腺体分泌前列腺素，两者可共同增加血管通透性，分泌多个营养物质，有助于胚胎着床［11］。本研究结果显示，不孕症患者PAF 呈低表达状况，且预后欠佳者PAF 水平较低，其原因可能为PAF 水平下降，可阻碍子宫内膜容受性创建，导致孕卵难着床，致使不孕以及预后欠佳。

Hcy 为甲硫氨酸代谢物，于血浆内多和蛋白结合之后存在。胱硫醚β-合成酶、甲硫氨酸合成酶等为Hcy 代谢过程中重要酶，Hcy 经转硫基与甲基化代谢途径于机体内保存动态平衡，于健康体检人群中水平含量偏低。高浓度Hcy 可出现细胞毒性与胚胎毒性，能抑制胚胎发育，致使胚胎停育，对不孕以及预后欠佳发挥促进效果［12］。本研究结果指出，研究组Hcy 高于对照组，预后欠佳者Hcy 高于预后良好者（P＜0.05），说明Hcy 水平升高可在不孕以及胚胎移植后胚胎发育等产生不良影响。

以往研究指出，血栓前状态引起微循环障碍可相应提高不孕症患者胚胎种植失败的风险，降低患者子宫内膜的容受性［13］。胚胎反复种植失败者可由于自身多卵泡发育，使其进至高雌激素状况，本身可能具有获得性血栓以及遗传性血栓等，加上黄体支持，病理性高凝状况可持续恶性，严重影响子宫内膜容受性，增加胚胎种植障碍［14］。临床上D-D 为评估机体血栓前状况的指标之一，其主要是由交联纤维蛋白降解获取。本研究显示，研究组D-D 高于对照组，且预后欠佳者D-D 呈高表达状况（P＜0.05），说明D-D 在不孕症以及胚胎移植中发挥重要作用，其原因可能与血栓前状况相关。

笔者将D-D、Hcy、PAF 水平变化绘制成ROC曲线对不孕症诊断效能以及对于预后的预测价值予以分析，结果显示，联合检测对于不孕症的诊断价值AUC 为0.843、敏感性94.20%、特异性92.31%高于D-D、Hcy、PAF，对于不孕症患者预后的预测价值AUC 为0.818、敏感性94.44%、特异性92.16% 高于D-D、Hcy、PAF（P＜0.05），说明D-D、Hcy、PAF 可有效筛查不孕症，并能有效预测预后，分析原因可能是为D-D、Hcy、PAF 可从不同角度分析对于不孕症以及对于预后的影响，故在筛查不孕症以及预测预后价值较高。

综上所述，不孕症患者D-D、Hcy 呈高表达状况，PAF 呈低表达状况，联合D-D、Hcy、PAF 可有效筛查不孕症，并能预测预后。