中性粒细胞/淋巴细胞比值在视神经脊髓炎谱系疾病中的临床价值

段正昊 冯娟

视神经脊髓炎谱系疾病(neuromyelitis opitca spectrum disoder，NMOSD)是一种以视神经、脊髓受累为主要特征的中枢神经系统脱髓鞘疾病，该病亦可累及大脑、脑干等部位[1]。目前研究发现，NMOSD并非仅有B细胞介导的体液免疫参与致病过程，中性粒细胞也参与了NMOSD致病过程[2]。中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio，NLR)不易受应激、年龄等其他因素影响，在评估机体炎症状态方面更加稳定[3]。NLR可用于评估多种自身免疫病，如系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)[4]、炎性肠病(inflammatory bowel disease，IBD)[5]、多发性硬化(multiple sclerosis，MS)等的疾病活动度[6-7]。目前对于NLR在NMOSD中的临床价值研究相对较少。因此，本文探讨了NLR在NMOSD患者中的变化情况，并对NLR在神经功能缺损评估方面的临床价值进行分析。

1 对象和方法

1.1 研究对象本研究已获得中国医科大学附属盛京医院伦理委员会批准，编号2022PS482K。选择2016年至2021年就诊于中国医科大学附属盛京医院神经内科的初发NMOSD患者112例。患者均满足《中国视神经脊髓炎谱系疾病诊断与治疗指南》[8]中关于NMOSD患者的诊断标准，且采血前未应用糖皮质激素(后文简称“激素”)、免疫修饰药物。排除标准：(1)非初次发作；(2)合并风湿免疫、感染性疾病；(3)存在严重肝脏、肾脏等器质性疾病；(4)合并胶质纤维酸性蛋白抗体(glial fibrillary acidic protein antibody，GFAP-Ab)、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体(myelin oligodendrocyte glycoprotein antibody，MOG-Ab)等其他自身免疫性抗体；(5)合并精神疾病；(6)临床资料不完整。最终纳入NMOSD患者45例。选择同NMOSD患者年龄、性别匹配且无慢性病史的健康体检者40人作为健康对照(对照组)。

1.2 方法本研究所纳入的NMOSD患者均于入院后第2日清晨完善血常规、肝功能、肾功能及风湿免疫指标等血生化检查，并均于激素冲击治疗前完成水通道蛋白4抗体(aquaporin-4 antibody，AQP4-Ab)等自身免疫性抗体检测。对照组全部于就诊当日完善血生化检查，采血后患者无其他临床处理。

收集全部NMOSD患者性别、年龄、扩展残疾状况量表评分(expanded disability status scale，EDSS)等临床资料，同时收集AQP4-Ab检测结果和血常规中的白细胞数(white blood cell，WBC)、中性粒细胞数(neutrophil，NE)、单核细胞数(monocyte，MO)、嗜酸性粒细胞数(eosinophil，EO)及嗜碱性粒细胞数(basophil，BA)。根据血常规的中性粒细胞数和淋巴细胞数计算NLR(NLR=中性粒细胞计数/淋巴细胞计数)。

根据EDSS评价神经功能缺损程度，评分范围为0～10分，得分越高代表神经功能缺损越重。

1.2.1不同分组临床资料比较：根据AQP4-Ab检测结果将全部NMOSD患者分为AQP4-Ab阳性组和AQP4-Ab阴性组，并比较二者及对照组间的临床资料差异。

根据NLR平均值将患者分为高NLR组和低NLR组，并比较两组患者间的临床资料差异。

1.2.2NMOSD患者重度神经功能缺损的危险因素分析及识别：以EDSS≤3分为轻度神经功能缺损，以EDSS>3分为重度神经功能缺损[9]，分析NMOSD患者重度神经功能缺损的危险因素，并分析NLR识别重度神经功能缺损的价值。

1.3 统计学处理采用SPSS26.0软件进行分析。正态分布的计量资料采用均数±标准差形式表示，两组间数据比较采用t检验，三组间数据比较及组内两两比较采用单因素方差分析；非正态分布的计量资料采用中位数(四分位数)形式表示，两组间比较采用秩和检验，三组间及组内两两比较采用K-W检验；计数资料采用频数形式表示，三组间比较及组内两两比较采用卡方检验。上述三组间两两比较所得P值均以bonferroni校正。采用Logistics回归分析评估NMOSD患者重度神经功能缺损的独立危险因素。通过受试者工作曲线(receiver-operating characteristic curve，ROC)分析NLR在识别重度神经功能缺损的准确性及最佳截断值。除三组间两两比较采用Bonferroni校正以P<0.017为差异具有统计学意义外，余均以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两NMOSD组与对照组临床资料比较45例患者中AQP4-Ab阳性NMOSD 30例，AQP4-Ab阴性NMOSD 15例。AQP4-Ab阳性 NMOSD患者年龄高于AQP4-Ab阴性NMOSD患者，中性粒细胞数和NLR高于AQP4-Ab阴性NMOSD和对照组，淋巴细胞数明显低于AQP4-Ab阳性NMOSD和对照组(均P<0.05)，具体见表1。AQP4-Ab阳性 NMOSD与AQP4-Ab阴性NMOSD患者EDSS评分差异无统计学意义〔3.50(2.50，4.13)分比3.50(1.50，4.00)分，H=-1.208，P=0.227〕。

2.2 高、低NLR组临床资料比较45例NMOSD患者NLR为3.41±2.24，以3.41为界分为高NLR组(NLR>3.41，n=18)和低NLR组(NLR≤3.41，n=27)，两组性别构成、年龄无统计学意义(P>0.05)。高NLR组NE、MO、EDSS评分高于低NLR组，LY低于低NLR组(均P<0.05)。具体见表2。

2.3 NMOSD患者重度神经功能缺损的危险因素分析以AQP4-Ab检测结果、年龄、性别、WBC、NE、LY、MO、EO、BA和NLR作为自变量，以神经功能缺损程度为因变量进行单因素Logistics回归分析。其中分类变量赋值情况如下：(1)神经功能缺损程度(轻度=0，重度=1)；(2)AQP4-Ab检测结果(阴性=0，阳性=1)；(3)性别(男=0，女=1)。

单因素Logistics回归分析结果显示，WBC、NE、LY和NLR是重度神经功能缺损的可能危险因素(P<0.05)，年龄、性别、AQP4-Ab、MO、EO、BA同重度神经功能缺损无关。具体见表3。

表1 AQP4-Ab阳性、AQP4-Ab阴性NMOSD患者与对照组临床资料资料比较

表2 NMOSD患者高NLR组与低NLR组临床资料比较

表3 NMOSD患者重度神经功能缺损相关危险因素的单因素Logistics回归分析

选取WBC、NE、LY和NLR作为自变量，神经功能缺损程度作为因变量进行多因素Logistics回归分析。结果显示，NLR是NMOSD患者重度神经功能缺损的独立危险因素(OR=13.506，95%CI： 1.050～173.753，P=0.001)，具体见表4。

表4 NMOSD患者重度神经功能缺损相关危险因素的多因素Logistics回归分析

2.4 NLR识别NMOSD患者重度神经功能缺损的ROC曲线ROC曲线的结果具体见图1，ROC曲线下面积(area under the ROC curve，AUC)为0.856(95%CI：0.746～0.996，P=0.000)，最佳截断值为3.33，其灵敏度和特异度分别为0.720、1.000(P=0.000)。

注： NLR：中性粒细胞/淋巴细胞比值；NMOSD：视神经脊髓炎谱系疾病；ROC曲线：受试者工作曲线图 1 NLR识别NMOSD患者重度神经功能缺损的ROC分析

3 讨论

有研究发现NMOSD急性期NLR水平明显增高[10]，且同EDSS评分具有正相关性[9，11]。缓解期NMOSD患者NLR同健康人无差异，若再次出现NLR升高提示患者可能有复发风险[12]。目前NLR的变化特点同NMOSD致病机制间的联系仍有待进一步探讨。

为了除外口服激素及免疫抑制剂对结果的影响，本研究纳入的45名患者均为初次临床发作。AQP4-Ab阳性NMOSD和AQP4-Ab阴性NMOSD患者比较，前者血液中中性粒细胞数和NLR明显高于后者，而淋巴细胞数明显低于后者。这可能同AQP4-Ab可以激活补体，促进中性粒细胞活化及浸润有关[13]。本研究结果显示，ROC曲线的最佳截断值为3.33，其灵敏度和特异度分别为0.720、1.000(P=0.000)，支持NLR可用于识别NMOSD患者重度神经功能缺损，可能有利于医生客观评价患者病情，但尚需进一步观察证实。表2中结果提示高NLR的NMOSD患者外周中性粒细胞升高和淋巴细胞减低，这进一步支持了NMOSD的免疫过度激活起源于外周。中性粒细胞增高可促进血脑屏障的破坏，高应激水平可抑制淋巴细胞增殖，因此外周血NLR可反应机体的免疫稳态和应激水平，用其评估神经功能缺损具有一定的理论基础。但由于NLR对感染的敏感度极高，因此在应用NLR进行病情评估时，需要除外感染性疾病。

既往研究证实AQP4-Ab相关的体液免疫是NMOSD致病机制的重要组成，但中性粒细胞介导的非特异性免疫也在NMSOD的致病过程中发挥作用。中性粒细胞可以破坏血脑屏障[14]、促进中枢神经系统炎症引起神经元脱髓鞘改变[15]。NMOSD起病早期病灶以中性粒细胞浸润为主，而抑制中性粒细胞活性则可以显著降低病情严重程度[16]。血清白细胞介素(interleukin，IL)-17[17]、IL-21[18]、IL-23[19]等中性粒细胞活化标志物，在NMOSD急性期明显升高，且同EDSS评分有明显相关性，这从另一个角度说明中性粒细胞在NMOSD中可能起到致病作用。

本研究通过对NMOSD患者外周血的研究，发现NLR在识别NMOSD重度神经功能缺损方面具有一定的临床价值，为临床医生提供了一种方快速评估病情的客观生化指标。但由于客观条件限制，本研究为小样本单中心开放性研究，可能存在一定的选择偏倚，结论仍需大样本多中心研究进行验证。