缺铁性贫血患儿Flt-3L、TF、25（OH）D检测的临床意义

赵晓敏， 江晓宇， 单凯莉， 单铁英， 刘秀珍

（邯郸市中心医院儿科，河北 邯郸 056000）

缺铁性贫血是由铁摄入不足、需求量增加、吸收障碍、丢失过多等多种因素引起体内铁元素缺乏，血红素合成减少而引起的[1]，是婴幼儿常见的慢性疾病之一。婴幼儿期是人快速生长发育的黄金阶段，如这个时期外源性铁摄入不足，极易发生铁元素缺乏，从而引起缺铁性贫血，严重危害婴幼儿健康[2]。缺铁性贫血不仅可造成婴幼儿免疫、神经、肌肉等各系统、器官的功能损伤，还会对智力发育造成不可逆的影响[3]。因此，早期发现和诊断是降低婴幼儿缺铁性贫血发生率的关键。FMS样酪氨酸激酶3配体（FMS-like tyrosine kinase 3 ligand，Flt-3L）是早期造血生长因子，可以单独或与其他细胞因子协同增强原始造血干细胞的增殖和分化，进而增强机体的造血功能，是与造血和免疫功能密切相关的调控因子[4-5]。Flt-3L还能促进树突状细胞的增殖和成熟，激活机体的天然免疫反应[6]。转铁蛋白（transferrin，TF）属于急性时相反应蛋白，能准确反映机体内铁的利用水平及贮存量，其主要的生理功能是与铁结合后将其运送到细胞内[7]。另外，TF与炎症反应和免疫应答也存在一定的联系[8]。25-羟基维生素D[25-hydroxyvitamin D，25（OH）D]在婴幼儿的生长发育中起着重要作用[9]。目前，临床针对缺铁性贫血的筛查多以传统血常规、体内铁代谢指标等检测为主，存在一定的漏诊风险。为此，本研究拟探讨Flt-3L、TF、25（OH）D对婴幼儿缺铁性贫血的辅助诊断价值。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2019年3月—2021年3月邯郸市中心医院儿科确诊的缺铁性贫血患儿128例（缺铁性贫血组），其中男66例、女62例，年龄5～36个月；按贫血的严重程度分为轻度贫血[血红蛋白（hemoglobin，Hb）为90～110 g/L]61例、中度贫血（Hb为60～89 g/L）55例、重度贫血（Hb<60 g/L）12例。选取同期邯郸市中心医院确诊的非缺铁性贫血患儿68例（非缺铁性贫血组），其中男31例、女37例，年龄6～49个月；包括巨幼细胞性贫血29例、再生障碍性贫血15例、溶血性贫血24例。另选取同期邯郸市中心医院体检健康婴幼儿100名作为正常对照组，其中男51名，女49名，年龄5～45个月。各组间年龄、性别差异均无统计学意义（P>0.05）。本研究经过邯郸市中心医院伦理委员会批准（审批号：2019003）。

纳入标准：（1） 符合《铁缺乏症和缺铁性贫血诊治和预防多学科专家共识》[10]和《儿童缺铁和缺铁性贫血防治建议》[11]中关于缺铁性贫血的诊断标准；（2）血清铁蛋白（serum ferritin，SF）<15 μg/L，血清铁（serum iron，SI）<10.7 μmol/L；（3）无慢性出血，且3个月内未服用过铁剂；（4）近期无消化道、呼吸道等感染；（5）患儿家属同意并签署知情同意书。

排除标准：（1）患心、肺、肝、肾等重要脏器的严重疾病；（2）患严重的免疫系统疾病或血液系统疾病；（3）近期服用过治疗缺铁性贫血的相关药物；（4）由不明原因出血导致的贫血；（5）患儿依从性差。

1.2 方法

1.2.1 红细胞相关指标测定 采用抗凝管采集所有对象清晨空腹静脉血3 mL，采用ADVIA 2120i全自动血液分析仪（德国西门子公司）及配套试剂检测Hb、红细胞平均体积（mean corpuscular volume，MCV）、红细胞平均血红蛋白含量（mean corpuscular hemoglobin，MCH）、红细胞平均血红蛋白浓度（mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC）。

1.2.2 血清Flt-3L、TF、25（OH）D、SI水平测定 采用促凝管采集所有对象清晨空腹静脉血4 mL，分装于2管，1 000×g离心20 min，分离血清，-80 ℃保存待检。采用酶联免疫吸附试验检测血清Flt-3L、TF、25（OH）D、SI水平。Flt-3L试剂盒购自美国Abcam公司[批号ab4598753，最低检出限为4.7 pg/mL，线性范围为4.7～300.0 pg/mL，批间、批内变异系数（coefficient of variation，CV）分别为4.19%、4.29%，标准曲线r2=0.998]。TF、25（OH）D和SI试剂盒均购自上海晶抗生物工程有限公司[批号分别为JLC7702-3245、JLC480-431、JLC7453-31；TF试剂盒的最低检出限为0.25 g/L，线性范围为0.25～8.00 g/L，批间、批内CV分别为10.0%、11.5%，标准曲线r2=0.997；25（OH）D试剂盒最低检出限为1.5 ng/mL，线性范围为1.5～48.0 ng/mL，批间、批内CV分别为10%、11%，标准曲线r2=0.999；SI试剂盒最低检出限为1.25 μmol/L，线性范围为1.25～40.00 μmol/L，批间、批内CV分别为10%、12%，标准曲线r2=0.999]。

1.3 统计学方法

采用SPSS 13.0软件进行统计分析。呈正态分布的计量资料以±s表示，多组间比较采用方差分析，两两比较采用独立样本t检验。计数资料以例或率表示，组间比较采用χ2检验。采用Logistic回归分析评估婴幼儿发生缺铁性贫血的危险因素。采用受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线评价各项指标诊断缺铁性贫血的效能。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 缺铁性贫血组、非缺铁性贫血组和正常对照组各项指标比较

缺铁性贫血组和非缺铁性贫血组Hb、MCV、MCH、MCHC均低于正常对照组（P<0.05）。缺铁性贫血组Flt-3L、TF水平均高于正常对照组和非缺铁性贫血组（P<0.05），SI、25（OH）D水平均低于正常对照组和非缺铁性贫血组（P<0.05）。见表1。

表1 缺铁性贫血组、非缺铁性贫血组和正常对照组各项指标比较

2.2 不同程度贫血患儿各项指标比较

重度贫血组Flt-3L、TF水平高于中度贫血组和轻度贫血组（P<0.05），25（OH）D、Hb、MCV、MCH、MCHC、SI水平均低于中度贫血组和轻度贫血组（P<0.05）。中度贫血组Flt-3L、TF水平高于轻度贫血组（P<0.05），25（OH）D、Hb、MCV、MCH、MCHC、SI水平低于轻度贫血组（P<0.05）。见表2。

表2 不同程度贫血患儿各项指标比较

2.3 缺铁性贫血的危险因素分析

Logistic回归分析结果显示，血清Flt-3L、TF、25（OH）D均是婴幼儿发生缺铁性贫血的危险因素[比值比（odds ratio，OR）分别为4.319、4.513、5.094，95%可信区间（confidence interval，CI）分别为1.537～12.133、1.932～10.545、1.414～18.354]。见表3。

表3 缺铁性贫血的危险因素分析

2.4 Flt-3L、TF、25（OH）D单项与联合检测诊断和鉴别诊断缺铁性贫血的效能

采用Logistic回归分析建立Flt-3L、TF、25（OH）D的联合检测方程：Logit（P）=1.463×Flt-3L+1.507×TF+1.628×25（OH）D +0.186。ROC曲线分析结果显示，Flt-3L、TF、25（OH）D单项检测和联合检测诊断缺铁性贫血的曲线下面积（area under curve，AUC）分别为0.860、0.854、0.897、0.983，鉴别诊断缺铁性贫血和非缺铁性贫血的AUC分别为0.797、0.821、0.862、0.981。见表4、表5、图1。

表4 Flt-3L、TF、25（OH）D单项与联合检测诊断缺铁性贫血的效能

表5 Flt-3L、TF、25（OH）D单项与联合检测鉴别诊断缺铁性贫血与非缺铁性贫血的效能

图1 Flt-3L、TF、25（OH）D单项与联合检测诊断缺铁性贫血和鉴别诊断缺铁性贫血与非缺铁性贫血的ROC曲线

3 讨论

目前，随着物质生活水平的提高，各种营养素缺乏症已明显减少，但缺铁性贫血仍是威胁婴幼儿健康最常见的营养缺乏性疾病，其起病缓慢且隐匿，严重影响婴幼儿身体健康[12]。婴儿期铁元素主要来自于母体及辅食喂养，约4月龄后，婴儿从母体获得的铁逐渐耗尽[13]。由于4月龄的婴儿生长发育迅速、造血活跃，但婴儿主食或乳类食品中铁含量均不高，不能满足婴儿生长发育的需求，导致其体内的铁元素被大量消耗，进而发生缺铁症状[14]。早诊断、早治疗可有效缓解婴幼儿的缺铁状态，保障婴幼儿健康成长。

本研究结果显示，缺铁性贫血组MCV、MCH、MCHC、SI、25（OH）D均低于正常对照组（P<0.05），Flt-3L、TF水平均高于正常对照组（P<0.05）。提示缺铁性贫血患儿体内铁元素含量不足，直接导致红细胞中Hb含量减少，从而引发贫血[15]。另外，Flt-3L水平升高可促进T细胞增殖，T细胞会介导骨髓造血细胞的过度凋亡，抑制骨髓造血，增加了婴幼儿的造血负担[16]，尤其是Flt-3L能促进树突状细胞的增殖和成熟，并增强机体的免疫反应[17]。SI直接反映了机体用于造血的铁的含量。TF是血浆中主要的含铁蛋白，负责输送消化道吸收的铁和红细胞降解后释放出的铁，在调节机体内环境稳定性方面发挥重要作用[18]。血清中可溶性TF受体水平升高程度与生成红细胞所需的铁的缺乏量有关，能够准确反映红细胞内铁水平[19]。维生素D（vitamin D，Vit D）属于脂溶性维生素，其主要功能包括促进小肠黏膜细胞对钙和磷的吸收、促进皮肤组织细胞的增殖、对细胞分化的调节和对免疫功能的调节[20]。25（OH）D可以反映体内Vit D水平，Vit D水平不足会降低钙、磷、铁的合成与吸收，进而引发相关疾病[21]。有研究结果显示，慢性疾病引发的炎症和感染与缺铁性贫血的发病密切相关，会导致红细胞破坏增多，使铁利用发生障碍，幼红细胞对红细胞生成素的反应性减弱，机体铁吸收减少，细胞免疫功能受到抑制，从而引发铁代谢紊乱[22]。另外，本研究ROC曲线分析结果显示，Flt-3L、TF、25（OH）D联合检测诊断和鉴别诊断缺铁性贫血的效能均优于3项指标单项检测。

综上所述，Flt-3L、TF、25（OH）D对婴幼儿缺铁性贫血有较高的辅助诊断价值，其水平高低与贫血的严重程度有关。