一起猪轮状病毒病的确诊和防治

陈长福

（龙岩市动物疫病预防控制中心，福建龙岩 364000）

病毒性腹泻是仔猪死亡的重要原因之一。常见的猪致泻性病毒主要有猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（transmissible gastroenteritis virus，TGEV）、猪轮状病毒（porcine rotavirus，PoRV）和猪德尔塔冠状病毒（porcine delta corona virus，PDCoV）[1]。PoRV 在电镜下形态似车轮，因此被命名为轮状病毒。PoRV 基因组长约18 500 bp，编码6 种结构蛋白（VP1～4、VP6 和VP7）和5 种非结构蛋白（NSP1～5）[2]。其中VP1～3 位于病毒核心，外层由VP7（37 kDa）形成光滑层，VP4（88 kDa）形成颗粒表面延伸的尖峰，VP6 位于中间层，对病毒有保护作用，参与病毒转录。基于VP6 的抗原特征，PoRV 分为A 到J 9 种，其中A 是最常见的，致病性强，遗传变异性高，其次是C 和B。

近年来，PoRV 受到养殖户的广泛关注。猪只感染后胃内有凝乳块，内容物呈灰黄色或灰黑色，肠道中的绒毛肠细胞变钝变短，微绒毛不规则，引发电解质失衡、肠道吸收不良、腹泻、脱水等症状，严重的可能死亡[3]。新生仔猪和断奶仔猪由于缺乏保护性免疫最容易被PoRV 感染，成年猪感染一般无临床症状。仔猪的易感性和成年猪的无症状感染特性使该病的防控工作更加复杂化[4-5]。本研究采集了一腹泻猪场不同阶段猪群的粪便、口腔拭子和环境、人员外表等样本，利用荧光PCR 方法对病毒载量进行了检测，证实引起该场腹泻病的病原为PoRV。而后针对PoRV 感染提出了有效防治措施，以期为PoRV 感染防控提供参考。

1 猪场发病情况及临床表现

福建省某规模化养猪场地处山区，猪场外围生物安全措施严格。总存栏母猪1 000 头左右，采用自繁自养的连栋养猪模式。

2021 年3 月15 日，该猪场B 栋猪舍定位栏母猪和产房仔猪出现腹泻病例，经荧光PCR 检测为PoRV 阳性，PEDV、TGEV 阴性；3 月20 日，A 栋产房仔猪暴发腹泻，24 h 内发病率极高，7 日龄以下仔猪病死率高达100%，经再次检测，确认为PoRV 强阳性，PEDV、TGEV 阴性；之后该病全场传播，发病猪群涵盖仔猪到成年猪的各年龄段；最后传播至保育猪、育肥猪和公猪群。产房7 日龄仔猪主要症状为呕吐加水样腹泻，体重减轻，治疗无效后脱水死亡，死亡率接近100%，10 日龄以上仔猪死亡率为50%，个别个体耐过后恢复，但大部分成为僵猪。

该场共饲养猪2 000 头，发生腹泻的约有300头。曾免疫PEDV、TGEV 和PoRV 三联弱毒苗，免疫程序为产前40 d、产前20 d 各免疫1 次，后备母猪基础免疫3 次。该场3 年内未发生过腹泻病。腹泻发生后，对患病猪群使用“利克太保”、阿莫西林、硫酸黏菌素进行治疗，但是效果不明显。

2 临床剖检症状

对濒死仔猪进行剖检发现，胃和小肠内有大量凝乳块或淡黄色胃内容物，肠壁变薄，肠道鼓气，部分肠壁伴有弥漫性出血点，肠系膜淋巴结肿大，肠内容物散发腥臭味。

3 实验室检测

分别采集配怀母猪、产房母猪、产房仔猪、保育猪、育肥猪、公猪等猪群的粪便、口腔拭子及人员外表、环境样本，使用核酸提取仪提取样本核酸（购自南京诺唯赞生物科技公司），使用PoRV-A 荧光PCR 检测试剂盒（购自广州维伯鑫生物科技公司）对所有样本进行病原检测。Ct ＞40判定为PoRV 阴性，否则判定为阳性。参考10 个相同规模猪场的不同PoRV 载量阳性率（表1），即病毒载量＞104的病猪发生PoRV 感染阳性率＞90%，因此本研究以病毒载量＞104为界限，评估感染情况。

表1 10 个猪场不同PoRV 病毒载量的阳性率 单位：%

4 结果与分析

4.1 配怀母猪

结果（表2）显示，配怀母猪唾液样品的阳性检出率为96.58%，显著高于粪便检出率（P＜0.05）。由于唾液比粪便更早排毒，说明该阶段猪群有可能处于感染早期。粪便样本中病毒载量高于104比例有15.56%，说明配怀母猪群感染PoRV 后，腹泻比例较低。

表2 配怀母猪不同PoRV 病毒载量阳性率 单位：%

4.2 产房母猪

结果（表3）显示，产房母猪粪便样品的阳性检出率为83.27%，显著高于唾液检出率（P＜0.05），表明该阶段猪群处于感染中后期。产房母猪粪便样品的病毒载量较低，但是有22.44%的病毒载量高于104，提示产房母猪感染PoRV（潜伏带毒）后可能不会出现腹泻症状，但是产房仔猪由于免疫系统不完善，可能被感染，需做好粪便管理。

表3 产房母猪不同PoRV 病毒载量阳性率 单位：%

4.3 产房仔猪

结果（表4）显示，产房仔猪粪便样品的阳性检出率为82.50%，说明大部分产房仔猪被感染。产房仔猪粪便样本病毒载量高于104的比例有22.50%，并且超高病毒载量（＞105）的比例有7.50%，说明此时产房仔猪有两种情况，一种属于感染中期，疫病即将大规模暴发，另一种可能属于发病后康复期。

表4 产房仔猪不同PoRV 病毒载量阳性率 单位：%

4.4 保育猪

结果（表5）显示，保育猪粪便样品的阳性检出率为41.67%，说明接近一半的保育猪群被感染。结合有33.34%比例的粪便样品病毒载量高于104，并且超高病毒载量（＞105）的比例为25.00%，说明此时部分保育猪处于暴发期，出现腹泻症状，而另外一部分保育猪还未被感染或者已康复，需做好已发病保育舍的隔离消毒工作。

表5 保育猪不同PoRV 病毒载量阳性率 单位：%

4.5 育肥猪

结果（表6）显示，育肥猪粪便样品的阳性检出率为90.00%，说明大部分猪群被感染。结合有80.00%比例的粪便样本病毒载量高于104，并且超高病毒载量（＞105）的比例为50.00%，说明此时育肥猪处于腹泻暴发期，需要及时介入处理。

表6 育肥猪不同PoRV 病毒载量阳性率 单位：%

4.6 公猪

结果（表7）显示，公猪的唾液样品阳性检出率（100%）高于粪便（64.70%），说明公猪几乎都被感染。结合有11.76%比例的粪便样本病毒载量高于104，推测公猪群很可能处于感染前中期，此时公猪腹泻的比例虽然不高，但需及时干预，防止疫病进一步暴发。

表7 公猪不同PoRV 病毒载量阳性率 单位：%

4.7 产房人员和环境

结果（表8）显示，产房人员外表的阳性检出率显著高于生产环境（P＜0.05），说明该场存在较大人员机械传播风险，发病期更需要对进入生产区的工作人员实施严格的消毒管理措施。

表8 产房人员外表和环境中不同PoRV 病毒载量阳性率 单位：%

5 防控措施

确认病原为PoRV 后，场内第一时间对所有母猪紧急补免了PEDV、TGEV、PoRV 三联弱毒苗，并严格按照母猪产前洗澡消毒、做好产房粪便管理、仔猪静默生产、7 日龄内发病仔猪无害化处理等生产流程进行管理。实施以上防控措施1 个月后，至4 月中旬，全场病情趋于稳定，新生仔猪未再出现腹泻；定位栏中个别母猪食欲较低，但未发生腹泻；保育猪、后备猪和公猪均没有出现腹泻，给食正常，精神状态良好。

6 讨论

生猪养殖是我国畜牧业的重要组成部分，是居民主要的肉食品来源。随着养殖规模的扩大，猪腹泻疫病防控形势趋于复杂。腹泻病毒在猪群中传播，导致料肉比升高，并且引发的仔猪高发病率和死亡率，严重威胁着猪群健康，给养殖业带来巨大经济损失[6]。近年来，PoRV 在我国的检出率呈上升趋势，已受到养殖场和相关从业人员的广泛重视。而PoRV 感染与其他腹泻病毒感染在临床上的表现往往很相似，从临床剖检或临床症状上很难进行诊断，需要进行实验室检测确诊[7-8]。

疫苗免疫是预防PoRV 感染的措施之一。目前，PoRV 商业疫苗（灭活苗和弱毒苗）已被证实可以有效预防PoRV 感染。此外，还需制定科学有效的针对性防控管理措施。第一，进入秋冬季后，PoRV 感染呈高发态势，需在提前对配怀母猪的唾液及粪便中的PoRV 载量进行测定，做到提前预警，及早发现潜在发病猪群，如发现排毒量大的猪群，应及时进行疫苗补免。第二，对进入产房前的怀孕母猪应洗澡消毒，确保清除母猪体表的PoRV，以免仔猪出生后通过接触感染。第三，加强产房的消毒与管理，人员进入产房前应对衣物和鞋子进行彻底消毒，防止通过人员机械传播病毒；产房应有两套清洁工具，一套用于产房清洁，另一套用于走道清洁，避免交叉，降低病毒传播风险；第四，产房如出现发病猪只，则实行静默生产，并及时对发病猪只进行无害化处理。