全自动氨基酸分析仪的常见故障及解决办法
2022-12-08河南省土壤肥料站程传凯
河南省土壤肥料站 程传凯
氨基酸水溶肥料作为肥料行业的新成员，除具有水溶肥料易溶解、易吸收等优点外，还具有调节植物生长和土壤酸碱度的特点。近年，河南省针对氨基酸水溶肥料进行了大量作物田间试验，加上水肥一体化技术的推广和春季“一喷三防”项目的大力推动，使农民真正看到良好的效果。但在氨基酸水溶肥料快速发展的同时，由于大家对氨基酸肥料缺乏了解，再加上氨基酸水溶肥料生产对设备场地的要求相对较低，导致氨基酸水溶肥料产品质量参差不齐，在一定程度上限制了氨基酸肥料的发展。河南省土壤肥料站作为肥料质量监督的重要一环，有必要引进氨基酸水溶肥料检测仪器，开展氨基酸水溶肥料检测工作。
氨基酸水溶肥料检测标准——《水溶肥料 游离氨基酸含量的测定》（NY/T 1975-2010）是氨基酸水溶肥料检测的主要依据，标准内提到使用液相色谱法中的氨基酸自动分析仪法（柱后衍生法）和柱前衍生法两种方法测定水溶肥料中游离氨基酸的含量。而自动分析仪法是最终仲裁法。本文主要以柱后衍生法为基础，以德国塞卡姆全自动氨基酸分析仪为主要检测仪器，分析检测过程中常见的几种故障和解决方法。
一、仪器内进入气泡
（一）原因分析
由于全自动氨基酸分析仪在运行中主要靠泵推动试剂进行检测，一旦气泡进入泵头，将造成液体流速不稳甚至完全停止，泵压来回变化或泵压降低，图谱错乱甚至无峰。分析产生原因主要有以下几点：首先，试剂更换或者添加试剂时没有及时排气泡；其次，全自动氨基酸分析仪的自动化程度较高，且单针运行时间约为1 h，如果样品较多，仪器分析的时间将会延长，某一种试剂在运行中耗尽并且没有得到补充，那么密封氮气将会随管路进入仪器。
（二）解决方法
通过与工程技术人员沟通、整理操作规程，检测人员在每次运行仪器前要检查各个试剂余量，确保能够满足当前批次使用，然后在每次更换或添加试剂后及时进行管路排除气泡操作，确保管路中没有气泡。
二、茚三酮溶液配置问题
（一）原因分析
全自动氨基酸分析仪为了降低后期使用成本，除能够使用原厂茚三酮试剂外，还提供了氨基酸分析所需茚三酮试剂的配比方法。检测人员在实际化验中可以根据厂家提供的试剂配置方案自行配置，从而大大节约试剂成本。由于茚三酮容易氧化变质，根据化验需要自行配置茚三酮试剂，可防止剩余试剂因为放置时间过长而变质。但是，由于精密度高，仪器对试剂的要求非常高，使用纯度达不到要求的茚三酮试剂极易发生氧化造成变质失效，且由于这种试剂所含杂质较多易造成仪器在运行时堵塞毛细管，使仪器内压力过大损坏反应单元。
（二）解决方法
1.检测人员配置茚三酮溶液时要使用大厂出品的茚三酮，品质有保证；使用0.45 mm 孔径滤膜进行过滤，去除杂质，减少堵塞毛细管的概率。
2.在检测过程中出现的反应颜色或者压力异常，很有可能是由于茚三酮溶液变质造成的。遇到这种情况应立即终止仪器运行，检查管路，运行管路清洗程序。如果仍然不能使压力降低，原因就能够确定为管路已经堵塞，需要把反应池两头的毛细管反接，进行反冲。
三、钾钠缓冲液配置问题
（一）原因分析
由于Cys 对pH 最敏感，所以配置的钾钠缓冲液对pH 的要求非常高。钾钠缓冲液的pH 要为5.51±0.03。pH 偏高就会造成Cys 出峰提前与Ala 粘连或重叠；相反，如果pH 偏低，Cys 则与Val 粘连或重叠，无法正常积分。而影响pH 最主要的因素是温度，由于配置钾纳缓冲溶液时使用乙酸，一旦温度过高，乙酸容易挥发造成pH的变化。
（二）解决方法
通过实际验证，配置钾钠缓冲液要在低温条件下使用磁力搅拌，并且使用保鲜膜覆盖烧杯以免造成乙酸挥发。溶解试剂应避免使用超声波震荡仪，因为超声波震荡仪在工作时会产生一定热量，容易造成钾钠缓冲溶液pH 的变化。
四、管路茚三酮试剂沉淀问题
（一）原因分析
实际操作中会出现个别样品茚三酮试剂浓度较高，常规清洗程序和洗液不能够彻底去除管路内残留的茚三酮试剂。仪器如果不连续使用，容易在管路内部残留茚三酮试剂沉淀，堵塞管路。
（二）解决方法
通过多次摸索和试验，提高异丙醇洗液浓度至50%，并且把自动清洗程序连续运行2 遍，能够较好地保证仪器正常运行。
