外周血循环肿瘤细胞联合血清肿瘤标志物检测在非小细胞肺癌患者中的临床意义

冯 雨，崔 东，张会民，刘渊源，李瑞杰，栾加强，徐明星，钱如林

(河南省胸科医院，河南 郑州 450003)

非小细胞肺癌(NSCLC)属于原发性支气管肺癌，具有分化低、恶性程度高、生长快、易发生远处转移等特点。其早期无特异性表现，多数患者在确诊时已错过最佳治疗时机，只能采取放化疗，但其5年生存率不足10%[1，2]。早诊断、早治疗是提高NSCLC疗效、预后的关键。血清肿瘤标志物具有检测方便、无创性和结果快等优点，广泛应用于肿瘤筛查和诊断当中。循环肿瘤细胞(CTCs)和肿瘤转移、复发具有密切的联系，具有潜在的诊断价值[3，4]。两者均可有效检测NSCLC，但甚少有研究将两者联合进行检测。本研究对CTCs联合肿瘤标志物检测在NSCLC患者中的临床意义进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料2020年1月至2022年1月我院收治的102例NSCLC患者作为研究组，纳入标准：①符合NSCLC诊断标准[5]；②资料完整；③患者均知情同意参与研究。排除标准：①存在严重器脏疾病或免疫性疾病者；②患有其他恶性肿瘤者；③存在精神疾病或相关家族史，无法配合研究者。研究组男58例，女44例；年龄(62.51±5.15)岁；临床分期：Ⅰ～Ⅱ期49例，Ⅲ～Ⅳ期53例。选取同期健康体检者87例作为对照组，男48例，女39例，年龄(62.07±5.49)岁。

1.2 方法CTCs检测方法：收集3 ml静脉血，免疫磁珠富集技术分离CTCs，用荧光原位杂交和免疫荧光染色鉴别CTCs，荧光显微镜观察CTCs。肿瘤标志物检测方法：分离5 ml静脉血，10 min后取出低温保存，罗氏电化学发光免疫分析仪检测癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19血清片段21-1(CYFRA21-1)，具体操作方法严格按照说明书进行。

1.3 观察指标①比较研究组与对照组、不同临床分期患者外周血CTCs、CEA、NSE、CYFRA21-1的表达情况。②电话随访1年，记录患者预后，以全因性死亡或复发再入院为随访终点，将其作为预后不良的标准，分析影响预后的因素。③分析CTCs联合CEA、NSE、CYFRA21-1对NSCLC的诊断价值。

1.4 统计学方法应用SPSS22.0统计学软件分析数据。计量资料以均数±标准差描述，比较采用t检验；计数资料以率或构成比表示，采用χ2检验。多元Logistic回归分析影响预后的因素。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究组与对照组外周血CTCs、血清肿瘤标志物的表达情况比较研究组CTCs阳性表达、CEA、NSE、CYFRA21-1水平高于对照组(P<0.05)。见表1。

2.2 不同临床分期患者外周血CTCs、CEA、NSE、CYFRA21-1的表达情况比较Ⅲ～Ⅳ期NSCLC患者CTCs阳性表达、CEA、NSE、CYFRA21-1水平均高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05)。见表2。

2.3 影响NSCLC患者预后的多因素分析年龄、临床分期、CTCs、CEA、NSE、CYFRA21-1为NSCLC患者预后的影响因素(P<0.05)。见表3。

2.4 外周血CTCs联合CEA、NSE、CYFRA21-1的诊断价值分析外周血CTCs联合血清肿瘤标志物检测灵敏度、特异度、AUC最高(P<0.05)。见表4。

表1 研究组与对照组CTCs、血清肿瘤标志物的表达情况比较

表2 不同临床分期患者外周血CTCs、CEA、NSE、CYFRA21-1的表达情况比较

表3 影响NSCLC患者预后的多因素分析

表4 外周血CTCs联合CEA、NSE、CYFRA21-1诊断价值分析

3 讨论

临床对NSCLC已进行深入研究，仍未完全明确其发病机制[6～8]。NSCLC主要采取手术、放化疗、靶向治疗等，但依旧会出现复发、转移的现象；且发生后临床再次干预时预后较差。临床认为尽早诊断、治疗是预后的关键。

血清肿瘤标志物(CEA、NSE、CYFRA21-1)异常表达对临床诊断NSCLC具有一定的指导作用[9～11]。但CEA、NSE、CYFRA21-1均为非特异性肿瘤相关抗原，单一肿瘤标志物检测特异性和敏感性较差，无法及时发现病情。因此临床急需寻找到一种敏感性强，特异性高的检测指标，与CEA、NSE、CYFRA21-1进行联合检测，从而提高NSCLC早期诊断率，延长患者的生存率[12～14]。研究发现，大部分进入血液的肿瘤细胞会在短时间内死亡，而存活下来的少数肿瘤细胞具有高活性和转移潜力，可形成癌栓，且后期可发展为转移灶进入外周循环，因此在外周血液中检测到肿瘤细胞提示了远处转移的可能性。CTCs属于肿瘤细胞，由实体瘤或转移灶释放，CTCs水平的变化可为个体化疾病诊疗提供依据，且外周血获取简单，操作方便，但因此项检测技术为新技术，目前在临床中并无广泛应用[15～17]。本研究发现研究组、Ⅲ～Ⅳ期患者CTCs阳性表达、血清肿瘤标志物水平均高于对照组、Ⅰ～Ⅱ期患者，说明CTCs、血清肿瘤标志物参与NSCLC的发生及发展过程，两者对NSCLC具有一定的诊断价值。研究认为采用外周血循环肿瘤细胞联合血清肿瘤标志物检测，可大大提高检测敏感度，为肿瘤的早期诊断提供依据，从而提高NSCLC患者生存期[18～20]。本研究还对两者预测价值进行分析发现，外周血CTCs联合CEA、NSE、CYFRA21-1检测NSCLC的灵敏度、特异度、AUC最高。说明外周血CTCs、血清肿瘤标志物均可有效检测NSCLC，但两者联合检测临床诊断价值更高。此外本文发现年龄、临床分期、外周血CTCs、血清肿瘤标志物为影响NSCLC患者预后的因素，说明CTCs、血清肿瘤标志物的异常表达可对患者预后造成一定的影响。