参加动物防疫采样工作发现的问题与思考

张晓敏 白唯

（陕西省大荔县动物疫病预防控制中心 715100）

在重大动物疫病监测中采样工作至关重要。采样方法、采样数量及样品质量直接影响监测结果的准确性和监测结论的科学性。因此，对负责采样人员如何掌握采样方法采样技术多有特定要求，只有符合要求的技术人员才能获得合格的样品。

在现在基层防疫工作体系中，由于单位职责划分和方便工作管理多年来长期形成了一套工作模式。在这套模式中实验室监测工作大多与采样分离，主要负责接收样品和实验室监测工作，采样工作由县级防疫工作人员组织相关技术人员指导基层站人员实施完成。

身为兽医实验室实验工作人员，今年有幸被抽调参加省市对大荔县春季动物免疫考核验收工作。采样监测是每年验收工作必不可少的一项，也是评价免疫效果最有效的科学依据之一。

1 采样任务要求

根据上级文件要求，被抽查县区内随机抽查4个规模场（1个鸡场、1个猪场、1个牛场、1个羊场），每个场采样15份。1个生猪屠宰场采样15份；1个家禽屠宰场采样15份。抽查2个乡镇，每个乡镇随机抽查5～10个养殖户，随机抽取畜禽血样各15份，共采集血清60份。

共采集家禽全血样60份，家畜全血样90份。

附件对春季重大动物疫病采样要求：本次检查采取全血样品；同一规模场县区不同日龄的动物采样；散养采样每村不少于5户；采样材料由各县准备，家畜样品每份不少于5ml全血，家禽不少于2ml全血；血样编号猪A01-A30、牛B01-B30、羊C01-C30、鸡D01-D30；采样时做好消毒和防护，同种动物采样先到养殖场，再到散养户。

2 采样准备及实施采样

准备防护服、一次性注射器、酒精棉球、一次性手套、非抗凝管等。在采样工作中严格规范操作，采集完成了所要求的样品种类和数量，并按要求编号，填写采样信息表格。但由于气温偏高，采集血样很快凝集，在二次注入非抗凝管时推力对凝集的红细胞造成破坏引发分离血清部分发生溶血。

3 本次采样存在问题与思考分析

（1）文件采样监测的目的和要求不明确。实验室监测工作依据国家及省农业农村厅制定出台的 《2021年动物疫病监测方案》，2021年监测方案重点动物疫病监测 （高致病性禽流感、口蹄疫、高致病性猪蓝耳病、猪瘟、鸡新城疫）包括免疫抗体监测和病原学检测。结合监测方案，因为文件验收中包括生猪屠宰场和家禽交易市场，本次采样除了采集血清样本还应有病原学样本泄殖腔、咽喉拭子样本，颌下淋巴结样本及食道-咽部分泌物 （O-P液）样本。但由于文件只要求我们采集畜禽血清样品没有要求其他样品采集工作。

（2）文件中提到防疫验收工作包含各县非洲猪瘟防控工作，对非洲猪瘟采样没有明确要求。非洲猪瘟采样要求采集抗凝血。有人对非洲猪瘟采样和其他血清学采样要求区别不清晰。

（3）由于气温偏高，采集血样很快凝集，在注入非抗凝管时的推力对凝集的红细胞造成破坏，导致分离时血清部分溶血。其实将血样导入非抗凝管的做法，个人认为是不正确的，既增加了工作量，又破坏了血清质量，给实验室检测取样造成极大的不便。

（4）采集血样应根据检测目的确定样品种类，监测免疫抗体 （禽流感、新城疫抗体、口蹄疫抗体、猪瘟抗体）需要采集血清样品；检测病原需要采集病原学样品。

（5）基层兽医 （特别县乡）专业人员严重缺乏，年龄老化。据调查2009年畜牧体制改革，大荔县为健全畜牧体系增强服务职能将乡镇兽医站扩编增强队伍至90多人。10多年过去了，由于退休虽然编制数不变，但实有在职人员减少至65人。在职人员50岁以上占60%以上。近年来事业单位招考用人体制的推行，基层防疫体系将面临越来越严峻的用人荒。

（6）本次采样出现问题是由于文件要求血样为全血，其本意要求现场采样的用意，并没有对盛血容器进行具体要求。而所采血样从一次性注射器二次倒入非抗凝管 （上级要求）主要受上级部门人员误导，自身缺乏采样监测知识，造成耗材费力起不到良好的效果。

4 对策与建议

（1）建议上级部门发文安排采样工作时明确监测目的和任务要求，贯彻完成 《2021动物疫病监测方案》中重大动物疫病的检测任务。单纯针对验收考核动物防疫效果，只需要采集血清样品即可；但本次文件上级部门验收考核的是春季防疫为主，包含重大动物疫病防控全方位工作，理应有病原学样本。

（2）非洲猪瘟的防控工作主要检查验收生猪养殖场对上级畜牧兽医部门制定的养殖场调运出入环节、饲养环节、定期监测等环节生物安全防控措施的贯彻落实情况。非洲猪瘟检测属于分子生物 （病原）学范畴。根据国家病原微生物实验室生物安全管理条例及实验室生物安全国家标准规定，非洲猪瘟聚合酶链反应 （PCR）的检测应在国家认可的二级以上实验室进行检测。其样本采集要求EDTA（10%乙二胺四乙酸二钠）抗凝血，市场上可买到EDTA抗凝血管和非抗凝管两种。猪前腔静脉用一次性软长针管采血直接流入抗凝血管中，轻轻摇动使管中包被的抗凝剂充分混匀，防止凝固，即可得到非洲猪瘟检测要求的EDTA抗凝血样品。非抗凝管用于放置血清血样品，静置足够时间可分离血清。

（3）检测动物免疫抗体血清血样品的采集用一次性采血管，基层如果没有采血管可用5ml一次注射器即可。选择动物合适的部位用一次性注射器采血2～5ml，将采好血的注射器轻轻后拉少许，使血液表面有一定斜面，斜靠静置30min以上，血清即可析出。这时才可整理带走，否则急于带走摇晃会破坏红细胞而溶血。

（4）动物防疫体系人员缺乏是多年困扰难题之一，主要由于行业歧视、待遇不公、教育受限、招考门槛高等诸多因素造成。要打破困扰，需要用人单位降低门槛，提高待遇，增加招聘岗位及人员数量，吸引专业人才投入畜牧兽医行业中来。

5 结束语

此文旨在运用自身知识和经验对失误情况进行分析，不对之处请指出，以期对日后做好相关工作提供参考。