VEGF、HIF-1α 在乳腺癌患者组织中的表达及临床意义

应利侠 尚玲 冯瑞雪

（淅川县人民医院病理科，河南 南阳 474450）

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。乳腺癌病因比较复杂，包括遗传、激素、生殖、营养、环境等各个方面。乳腺癌早期症状不明显，多数患者确诊时已达到中晚期，发生远处转移，错过手术最佳治疗时机，影响治疗效果，增加病死风险。肿瘤细胞浸润深度、淋巴结转移等病理特征与预后有关。因此，寻找可准确评估乳腺癌临床特征的指标十分必要。

王阳等报道，新生血管的形成可为肿瘤细胞生长提供所需的营养物质，促进肿瘤形成、增殖、浸润、转移与复发，与肿瘤预后有关[1]。血管内皮生长因子（VEGF）是一种促血管内皮细胞生长因子，可促进血管内皮细胞增殖，诱导蛋白水解酶、组织因子等的形成，为血管新生创造良好的前提条件[2]。缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）是具有转录活性的核蛋白，可调控VEGF 的合成与分泌，进而促进新生血管的形成[3]。

因此，推测VEGF、HIF-1α 可能与乳腺癌临床病理特征有关。本研究主要分析VEGF、HIF-1α 蛋白在乳腺癌患者组织中的表达及临床意义。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2018 年9 月至2021 年3 月期间于本院经病理组织确诊的78 例乳腺癌患者组织标本及其癌旁正常乳腺组织标本作为研究对象，研究内容符合医院医学伦理委员会相关规范，且病例资料查阅经患者及家属知情同意。

纳入标准：乳腺癌符合《中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范（2015 版）》[4]中相关规定，且经病理学检查确诊；术前未接受相关放化疗、内分泌治疗；病理组织保存完好；病例资料完整，包括本研究所需资料。排除标准：合并其他恶性肿瘤；合并乳腺炎、乳腺囊性增生等其他乳腺疾病；肿瘤复发。

1.2 方法

1.2.1 VEGF、HIF-1α 蛋白检测与结果判定

收集患者手术切除的病灶组织及距病灶5 cm的正常乳腺组织标本，用10%的中性缓冲福尔马林固定后，常规脱蜡至水、透明、包埋、切片（厚4 μm），采用免疫组化法对切片进行染色，检测标本中VEGF、HIF-1α 蛋白表达情况，试剂盒选自上海长岛生物技术有限公司，所有操作均严格按照试剂盒说明进行。

结果判定标准：免疫组化染色切片由2 名经验丰富的检验科医生独立判读，并综合判断得出一致结果；VEGF、HIF-1α 蛋白阳性判定标准：①染色强度计分：无着色计0 分，浅黄色计1 分，棕黄色计2 分，棕褐色计3 分；②染色数目计分：1%以下计0 分，1%-10%计1 分，11%-50%计2分，51%-75%计3 分，＞75%计4 分。将染色强度与染色数目计分乘积作为最后结果，≤2 分为阴性，＞2 分为阳性。

1.2.2 临床特征资料搜集分析

查阅资料，收集患者年龄（≤50 岁、＞50岁）、分化程度（低、中/高）、肿瘤直径（≥3 cm、＜3 cm）、病理组织类型（非浸润性癌、浸润性癌）、淋巴结转移（有、无）等资料。

1.3 观察指标

对比乳腺癌患者的病灶组织与癌旁正常乳腺组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达率；分析对比不同临床特征的乳腺癌患者病灶组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达情况；病灶组织中VEGF、HIF-1α蛋白阳性表达对乳腺癌患者淋巴结转移的评估价值。

1.4 统计学方法

采用SPSS24.0 软件处理数据，计数资料用n（%）表示，采用χ2检验，若期望值＜5，采用连续校正卡方检验；绘制受试者工作特征曲线（ROC），并计算曲线下面积（AUC）值，以检验VEGF、HIF-1α 蛋白对乳腺癌患者淋巴结转移的评估价值，AUC 值＞0.9 表示评估价值较高，0.71-0.9 表示有一定评估价值，0.5-0.7 表示评估价值较差，＜0.5 表示无评估价值；检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 病灶组织与癌旁正常乳腺组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达率

病灶组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达率均高于癌旁正常乳腺组织（P＜0.05）。见表1。

表1 病灶组织与癌旁正常乳腺组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达率（n(%),总例数=78）

2.2 不同临床特征的乳腺癌患者病灶组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达情况

有淋巴结转移的患者病灶组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达率高于无淋巴结转移的患者（P＜0.05）；其他不同临床特征的患者VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达率对比，差异无统计学意义。见表2。

表2 不同临床特征乳腺癌患者病灶组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达情况

2.3 病灶组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达对乳腺癌患者淋巴结转移的评估价值

将乳腺癌患者淋巴结转移情况（“1”=有，“0”=无）作为状态变量，将病灶组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达情况作为自变量并赋值（“1”=阳性，“0”=阴性），绘制ROC 曲线（见图1），结果显示，病灶组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达对乳腺癌患者淋巴结转移评估价值的AUC 分别为0.723、0.727，均有一定评估价值。见表3。

图1 病灶组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达对乳腺癌患者淋巴结转移评估价值的ROC 曲线

表3 病灶组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达对乳腺癌患者淋巴结转移的评估价值

3 讨论

随着肿瘤细胞的不断增殖及癌细胞对周围正常组织的侵袭，乳腺癌患者可能会引发全身恶病质、呼吸困难、骨痛等严重并发症，威胁患者生命安全。因此，尽早对乳腺癌病情做出准确诊断具有重要意义[4]。

本研究结果显示，VEGF、HIF-1α 蛋白在乳腺癌患者组织中阳性表达率较高，且有淋巴结转移的患者病灶组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达率更高，进一步绘制ROC 曲线结果显示，病灶组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达对乳腺癌患者淋巴结转移均有一定诊断价值，提示VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达情况可能对评估患者淋巴结转移情况具有积极意义。分析原因为，VEGF 阳性表达可增加血浆酶原活化因子的mRNA表达，提高血浆酶原活化因子活性，促进细胞外基质水解，并能刺激非增殖血管内皮细胞增生，促进新生血管生成，为肿瘤发生、发展提供养分，从而促进肿瘤细胞增殖、侵袭与转移，增加淋巴结转移风险[5-6]。HIF-1α 蛋白可与细胞DNA 中的缺氧反应元件HIF-1α 蛋白结合位点相结合，促进VEGF、一氧化氮、糖酵解酶等下游基因的转录，促进新生血管网的形成，进而促进肿瘤细胞形成、增殖与转移，增加淋巴结转移发生风险[7-8]。

综上所述，VEGF、HIF-1α 蛋白在乳腺癌患者组织中阳性表达率较高，检测病灶组织中VEGF、HIF-1α 蛋白阳性表达有助于评估患者淋巴结转移情况。