软硬件等级程度及组合方式对制备冷沉淀凝血因子效用性的影响

侯亚平 李建民 郭敏 程菲 刘旭枝 牛校敏

冷沉淀凝血因子是一种临床必需的重要的血液成分。冷沉淀在我国医学领域中用于血友病甲(HA)，纤维蛋白原(Fg)缺乏、大量输血和弥漫性血管性凝血(DIC)等凝血功能障碍患者的治疗，特别适用于难以给予大量的新鲜冰冻血浆(FFP)来提供足量的凝血因子的患者，更多的是配合性输注[1]。如果没有血管性血友病因子(vWF)，血管内皮出现损伤，即使是微小的损伤，血小板是难以粘附和聚集到损伤部位的[2,3]。因此，人体内vWF水平异常与缺血性疾病密切相关。冷沉淀中的重要成分之一是vWF，输注冷沉淀是临床患者补充vWF的常用治疗手段，因此，冷沉淀中vWF含量应值得重视[4]。目前制备冷沉淀的方法有水浴离心法和水浴虹吸法两种[5]。水浴虹吸法用于制备冷沉淀的仪器初期有进口Polyscience、CytoTNERM-4T及国产GBK-LCB-A1等型，后期随着国内科技技术的不断进步，又出现沃唐、中保康等更为先进的软硬件结合型设备，不同时期、不同方式水浴虹吸法制备冷沉淀凝血因子所表现出来的结果不尽相同，伴随着制备冷沉淀凝血因子的硬件设备及软件的不断进步和持续改进提高，基于硬件基础上的软硬件结合方式带来的应用效果，无论是从制备方式的转变、简化、便捷、规则控制利用、核对等方面，还是从质量保证、效率提高等方面，都具有无以比拟的优势，使冷沉淀凝血因子制备工作上升到一个新的水平。为此，笔者就我中心在软硬件等级及组合不同变化时期基础上所制备的冷沉淀凝血因子的综合性情况进行回顾性调查，结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 对我中心2020年4～5月内二种软硬件组合方式制备的冷沉淀凝血因子6 674袋和6 512袋进行质量抽样检查，抽样数量分别为45袋和55袋。

1.2 硬件设备 polyscience冷沉淀制备仪器(美国polyscience公司)，WT-CⅡ型全自动冷沉淀制备仪(广东沃唐医疗设备有限公司)、BS-600L电子天平(上海友声衡器有限公司制造)，250E热合机(韩国申通有限公司)。

1.3 软件设备 唐山启奥9.0软件系统、沃塘WT-CⅡ型全自动冷沉淀制备仪自带的Cryopreper软件。

1.4 冷沉淀凝血因子制备要求及注意事项 由于冷沉淀凝血因子是由全血经加工成新鲜冰冻血浆再制备而成[6]，而冷沉淀中的凝血因子Ⅷ(FⅧ)为不稳定因子，其回收率与其起始水平、抗凝剂的选择、冷冻前的时间、温度和冷冻时间、贮存的温度、融化的速度和方法等因素有关[7]，导致每袋冷沉淀FⅧ含量各不相同，因此，检测冷沉淀中凝血因子的活性对确保临床输血治疗效果、防止无效输注有着极其重要的意义。为此，我中心均以6～8 h内制备完成的新鲜冰冻血浆作为原料浆，在检测合格基础上以水浴虹吸法[8]来制备的冷沉淀凝血因子，出于确保质量的考虑，注意FFP融化后，FⅧ活性随时间的改变而有明显的降低，12 h后其活性衰减41.17%，24 h后其活性衰减了42.82%[9]这一特性，并使整个制备过程控制在1 h[10]左右加以实施完成。

1.5 水浴虹吸法冷沉淀凝血因子制备方法 取出冻存的原料浆，在经电脑操作系统检测结果合格与否的筛选后，将筛选出合格的原料浆，经称重后置于预先预温的冷沉淀制备仪器中进行融化，待血浆融化可完成虹吸时，依不同冷沉淀制备设备的操作要求完成虹吸操作，其间涉及排气、挤压、导管安装、读取信息等等操作，待未融化的血浆的重量符合质量控制要求后，阻断虹吸和完成热合分离，即制备出冷沉淀凝血因子和冰冻血浆两种血液成分。

1.6 软硬件组合方式

1.6.1 水浴设备+辅助设备+操作系统： 暨以polyscience硬件设备作为原料血浆融化温度控制设备，在血浆融化可虹吸时完成虹吸，并在融化后期通过肉眼观察、称重定量、热合断离等操作直至制备结束，制备完成的血液成分暨冷沉淀凝血因子及冰冻血浆再通过唐山启奥9.0软件系统完成相关的信息生成、录入、存储和应用，这种方式受诸多因素限制可记录的信息相对有限，存在延续性和完整性精度存在不足，人工干预的步骤多，操作繁杂费时等缺点。见图1。

图1 旧式法流程图

1.6.2 水浴设备及软件+操作系统：暨以沃塘WT-CⅡ型硬件设备及自带Cryopreper软件加唐山启奥9.0软件系统组合完成整个冷沉淀凝血因子制备过程。暨先由沃塘WT-CⅡ型硬件设备完成原料浆的称重、水浴融化、水浴虹吸、信息录入、信息关联、信息存贮、自动生成转化等一体化操作，待制备完成后外加热合辅助操作，在经操作者核对确认后，按程序规则化要求自动完成设备软件与操作软件之间信息交互共享，具有延续性和完整性精度大幅度提升，人工干预步骤少，操作快捷快速、融合性好等优势。见图2。

图2 新式法流程图

1.7 冷沉淀凝血因子质量检测方法 按标准要求的方法[11]对FⅧ含量及纤维蛋白原含量进行测定。

1.8 效用性评估 以功能性、风险控制点、效用性指标等作为评估点加以评判。

2 结果

2.1 质量检测情况比较 两种软硬件组合方式制备的冷沉淀凝血因子的制备时长、容量、纤维蛋白原及及Ⅷ因子含量(t值分别为6.06、-2.357、-2.122和-2.004，P值分别为0.000、0.021、0.037和0.032)差异有统计学意义。见表1。

表1 2种软硬件组合方式制备的冷沉淀凝血因子质量检测情况

2.2 实际效果操作应用情况 组合方式二从称重、筛查控制功能、报警提示功能、重量控制功能、操作扫码次数、操作便捷性、软硬件功能性能、总体效率性上低于组合方式一。见表2。

表2 2种软硬件组合方式实际效用性表现情况

2.3 实际应用中的差错表现 温度失控、重量失控、筛查错误、记录错误、数据丢失差错次数比较，组合方式二明显低于组合方式一，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 2种制备模式实际应用中的差错表现情况 袋(%)

3 讨论

随着国内医疗水平的不断发展和进步，冷沉淀凝血因子的临床需求量不断上升，在增加制备量的同时又能提高产品的质量越来越引起重视，而采供血机构在人员编制上的不匹配，单纯依靠人员增加来弥补工作量增长的方式方法不是长久之计，也存在人员参差不齐带来的各种隐患，符合国内外发展潮流的要求。本文中组合方式二的做法也正是遵从持续改进提高和高质量科学发展的要求。随着科技的进步和快速发展，以及血液制备技术及设备不断更新和提高，血液制备已从过去纯手工操作向机器自动化操作的转变。通过软件来管理血液制备的趋势越来越被人们重视，也不断在实际工作中得以应用。针对不同设备、操作、制备过程等环节和步骤中，在软件的支持下，可实现数据录入、传输、连接、共享和保存，为血液制备信息一体化创造了条件和可能也是发展的必由之路。无论是从科学发展、还是采供血先进设备技术的不断应用的角度出发，血液制备作为采供血过程的一个环节，必将新技术、新工艺、新设备等不断应用其间，并与血站技术操作规程中各种要求进行融合，在当下先进技术设备支撑下血液制备过程，通过计算机管理血液制备全过程是一个必由之路。

成分制备环节的信息化控制是提升产品质量、减少差错的必要手段，在不改变原有流程的基础上不断优化信息系统，进一步实现对操作全过程关键控制点的有效监控。由于软硬件组合方式二中使用的硬件及配套软件与文献[12]报道的全自动冷沉淀制备仪能够记录和保存制备过程关键数据，包括血袋条形码、制备时间、解冻温度和虹吸时间、操作者、冷沉淀容量、完成时间等，实现对每袋冷沉淀制备过程的追溯，并提供数据接口，与血站信息管理系统链接，实现冷沉淀制备的信息化管理的结论上基本一致，只是在某些细节上略有不同。由于FⅧ是一种不稳定因子，受制备过程中多种因素影响容易降低或失去活性[13]。融化温度、融化时间以及制备方法对冷沉淀质量有很大影响。冷沉淀总FⅧ含量与制备时间的长度呈负相关，制备时间越长，含量越低而下降。当在2～6℃的制备温度下，FⅧ能够获取最高的回收率，当温度>8℃时，可出现自我融解[14]。软硬件组合方式一中硬件设备由于使用的是血浆融化箱和外接电子天平，在硬件功能上存在不足，制备过程中需多次扫码、反复称重，以免过度解冻引起容量不足，这会导致血袋晃动或抖动，使部分沉降在底部的冷不溶解物质混悬到血浆中，随血浆被吸走而流失，同时还增加冷沉淀在室温环境的暴露时间，易引起凝血因子失活；软硬件组合方式二由于具备扫码次数少、自动称重、自动截停虹吸，制备完成自动报警提示等精准调控优势，可最大限度减少冷沉淀室温暴露时间，提升冷沉淀制备含量的稳定性[15]。同时全自动冷沉淀制备仪可设置开机时间，预约降温，自动注水、排水[16]。其精确的水温控制系统，保证冷沉淀解冻过程的水温恒定，且每袋新鲜冰冻血浆(FFP)均有独立水浴槽位，消除了血浆袋之间相到互紧贴、重叠甚至堆积的可能性，使每袋血浆均具有最大水浴接触面[17]。因此，软硬件组合方式二更具有自动化、精准控制过程。自动截停虹吸、智能称重、自动热合、记录和保存制备过程关键数据，能够保证血袋条形码、制备时间、人员及每袋冷沉淀凝血因子制备过程全程追溯[18]。具有制备质量更高、更稳定，效率更高，操作更方便，过程追踪更完善等优势。

尽管2种软硬件组合方式制备的冷沉淀凝血因子的产品质量均能符合国家相关标准[19]要求。高等级软硬件组合方式中充分考虑设备软硬件功能有机利用、特定规则设定要求、关键控制点、信息资源共享(软件至硬件；软件至软件，硬件至软件多重交融)、自身工作特点等综合因素并加以最大化融合利用，实现一次读码达到筛选(不合格不进行制备，降低暴露风险，同时也减少无用功)、记录、产品生成定位、错误提示等多种目的的一次性完成；制备完成产品批量审核放行等，既提高产品质量、工作效率，又防止错误发生。说明软硬件组合等级高低、功能水平及配套软件功能的不同，以及相互融合设计要求不同，将直接导致最大化软硬件结合效用化功能不同，越是完善、高等级的软硬件组合方式，其所带来的标准化、规范化、信息化、精细化、效益化、质量保证效果等等效用化好处是毋庸置疑的，本调查二种软硬件组合等级不同所表现出的一些综合性状况也验证了这一结论。

综上所述，通过不断提升软硬件组合功能水平，走高质量发展之路，从各方面消除或者降低软硬件功能不足及人为因素等导致的影响质量的事情发生，不仅提高工作效率，还能确保产品质量和后期的临床治疗效果。此外，如硬件设备具有与制备所需完全贴合的硬件功能，如自动热合功能等则更加完美，可进一步提高冷沉淀凝血因子产品质量和工作效率。